应用改良庆大霉素保护试验检测肠炎沙门氏菌侵袭力表型

发布时间：2024-11-03 01:03

　　 肠炎血清型沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Enteritidis,SE)是引起肠炎和全身感染重要的沙门氏菌血清型之一,了解沙门氏菌侵袭力表型对阐明其感染致病机制至关重要。传统庆大霉素保护试验(GPA)存在通量低、重复性差等缺点。文中利用96孔细胞培养和多孔道移液的高通量优势,结合菌落分区微量滴板计数法改良了传统GPA试验方案。应用改良的GPA方法检测了16株SE菌株对非吞噬细胞(HT-29)的入侵表型和43株SE菌株对吞噬细胞(RAW264.7)的胞内复制表型。通过比较分析SE强、弱菌株JL228和LN248对吞噬细胞(RAW264.7)的侵袭力表型发现,改良的GPA得出的数据组内和组间变异系数低、数据重复性强,胞内复制表型也与显微观察结果相符。通过实践应用发现,改良的GPA方法具有通量高、重复性强、结果可靠兼具省时、省力等优点,可作为沙门氏菌菌株侵袭力表型检测的更新方案,为进一步阐明其致病机制提供了更科学有效的方法。

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【部分图文】：

沙门氏菌的巨噬细胞侵袭力决定其全身性感染的能力。应用传统和改良的GPA分别检测了小鼠高致病性SE菌株JL228和低致病性菌株LN248的巨噬细胞侵袭能力。结果发现，两种方法得出类似结果，在“结合”表型检测中，LN248菌落数显著高于JL228(P<0.001)，而在“入侵”和“....

图1传统与改良GAP方法检测JL228与LN248感染RAW264.7细胞侵袭表型2.2巨噬细胞内复制表型验证

应用改良GPA试验方案检测了43株SE分离菌株对RAW264.7细胞的入侵和胞内复制表型，此外，对16株SE分离株的上皮细胞HT-29入侵表型进行了检测。在实践操作方面，改良的检测方法在单块96孔细胞培养板上最多可同时检测32株菌株的体外侵袭表型，是传统方法(24孔板)的4倍，....

图3JL228与LN248感染RAW264.7细胞复制表型的GPA滴板结果与共聚焦显微观察3讨论

本文编号：4010436