CpG ODN作用于膀胱癌细胞的机制探讨及表柔比星联合卡介苗作用于膀胱癌细胞的机制探讨

发布时间：2025-01-04 03:41

　　目的:探究非甲基化CpG寡聚脱氧核苷酸(ODN)对人膀胱癌的抗肿瘤作用,以及探究表柔比星与卡介苗对人膀胱癌细胞的联合作用。方法:对于探究CpG ODN对人膀胱癌的抗肿瘤作用,我们常规培养人膀胱癌细胞,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)方法检测CpG ODN处理后的膀胱癌细胞的体外增殖情况,探究膀胱癌细胞对CpG ODN的剂量-时间-效应关系,选取合适的细胞株进行后续试验。以卡介苗作阳性对照,比较CpG ODN的对膀胱癌细胞的体外增值情况。采用流式细胞术检测CpG ODN作用膀胱癌细胞后的细胞凋亡情况和细胞周期分布。蛋白印迹实验(Western Blot)检测药物处理后的膀胱癌细胞中促凋亡因子caspse-3、p53和B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(Bax)的表达水平,以及抗凋亡因子B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)的表达水平。对于表柔比星联合卡介苗对膀胱癌细胞作用的探究,同样常规培养人膀胱癌细胞,表柔比星、卡介苗单独作用以及两者联合作用于膀胱癌细胞,采用CCK-8方法检测药物处理作用后的细胞的细胞活性,选取合适的细胞株及浓度进行后续机制实验。采用流式细胞术检测表柔比星、卡介苗单...

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【部分图文】：

图1-1转膜图示

直至膜完全变透明。3）将海绵和滤纸预先泡入转膜缓冲液中。海绵、滤纸、胶和PVDF膜按图1-1所示摆放，注意转膜夹子正负极和整个过程中不能有气泡。图1-1转膜图示Figure1-1Transfergraphic4）将转膜夹子置于转膜槽中，注意夹子与转膜槽的正负极。在....

图1-1转膜图示

3)将海绵和滤纸预先泡入转膜缓冲液中。海绵、滤纸、胶和PVDF膜按图1-1所示摆放,注意转膜夹子正负极和整个过程中不能有气泡。4)将转膜夹子置于转膜槽中,注意夹子与转膜槽的正负极。在冰浴中以100V电泳90min。

图1-2 CpG ODN对人膀胱癌细胞的活性影响

3.1CpGODN抑制人膀胱癌细胞的活性如图所示,CpGODN随浓度的增大和时间点的延长,对人膀胱癌UM-UC-3细胞的活性抑制作用越明显(图1-2A)。在24h,CpGODN浓度为10μM时,其细胞活性显著降低(P<0.05);在48h,CpGODN浓度为0.1μ....

图1-3卡介苗对人膀胱癌细胞的活性影响

3.2卡介苗抑制人膀胱癌细胞的活性如图所示,卡介苗作用于人膀胱癌UM-UC-3细胞,随时间和浓度的增加,对膀胱癌细胞的活性产生抑制作用。在24h,菌落数与细胞数比值≤5时,卡介苗对膀胱癌细胞的促凋亡作用并不明显,但在48h却起明显的促凋亡的作用(**P<0.01),这说明在....

本文编号：4022850