miR-1-3p/206/613对LXRα调控OATP1B1作用的影响及其机制研究

发布时间：2025-01-14 09:54

　　背景:课题组前期研究发现miR-206和miR-613可通过靶向结合于OATP1B1mRNA 3'-UTR从而抑制OATP1B1蛋白的表达。资料报道PXR、CAR、FXR、LXRα等核受体可介导OATP1B1的转录调控。采用miRWalk等生物信息学软件预测并筛选出靶向LXRα和OATP1B1 mRNA 3′-UTR的miRNAs,结果显示miR-1-3p/206/613与LXRα和OATP1B1 mRNA 3'-UTR高度互补。那么miR-1-3p/206/613是否能通过靶向LXRαmRNA 3'-UTR调控OATP1B1的表达确实值得思量;拟或对OATP1B1 mRNA 3'-UTR可呈现直接作用亦令我们关注;故而系统研究miR-1-3p/206/613对LXRα调控OATP1B1作用的影响,深入探讨其作用机制可为调控药物转运体OATP1B1的研究增添新内容。目的:1.研究核受体LXRα对转运体OATP1B1的转录调控的影响及其机制。2.研究miR-1-3p/206/613对LXRα、OATP1B1基因和蛋白表达的影响以及对OATP1B1转运功能的影响,并深入探索上述影响的分子机制...

【文章页数】：102 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 生物信息学分析
    2.1 方法
    2.2 结果
    2.3 讨论
第3章 核受体LXRα对转运体OATP1B1的转录调控
    3.1 材料
        3.1.1 细胞株及质粒
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要仪器设备
    3.2 方法
        3.2.1 HepG2细胞的培养
        3.2.2 主要溶液的配制
        3.2.3 质粒构建、扩增、提取及鉴定
        3.2.4 质粒转染
        3.2.5 双荧光素酶活性检测
        3.2.6 HepG2细胞质粒转染条件探索
        3.2.7 核受体LXRα对转运体OATP1B1的转录调控
        3.2.8 数据处理与统计分析
    3.3 结果
        3.3.1 HepG2细胞形态学
        3.3.2 质粒鉴定
        3.3.3 HepG2细胞质粒转染条件
        3.3.4 核受体LXRα对转运体OATP1B1的转录调控
    3.4 讨论
第4章 构建和评估过表达或抑制表达miR-1-3p/206/613的HepG2细胞模型
    4.1 材料
        4.1.1 细胞株
        4.1.2 主要试剂
        4.1.3 主要仪器设备
    4.2 方法
        4.2.1 主要溶液的配制
        4.2.2 HepG2细胞的培养
        4.2.3 过表达或抑制表达miR-1-3p/206/613对HepG2细miR-1-3p/206/613 表达的影响
        4.2.4 数据处理与统计分析
    4.3 结果
    4.4 讨论
第5章 miR-1-3p/206/613对LXRα和OATP1B1表达水平及其转运功能的影响
    5.1 材料
        5.1.1 细胞株
        5.1.2 主要试剂
        5.1.3 主要仪器设备
    5.2 方法
        5.2.1 HepG2细胞的培养
        5.2.2 主要溶液的配制
        5.2.3 miR-1-3p/206/613对HepG2细胞LXRα和OATP1B1mRNA水平的影响
        5.2.4 miR-1-3p/206/613对HepG2细胞LXRα和OATP1B1蛋白水平的影响
        5.2.5 miR-1-3p/206/613对HepG2细胞转运瑞舒伐他汀的影响
        5.2.6 数据处理与统计分析
    5.3 结果
        5.3.1 过表达或抑制表达miR-1-3p/206/613对HepG2细胞LXRα和OATP1B1mRNA水平的影响
        5.3.2 过表达或抑制表达miR-1-3p/206/613对HepG2细胞LXRα和OATP1B1蛋白水平的影响
        5.3.3 过表达或抑制表达miR-1-3p/206/613对HepG2细胞转运瑞舒伐他汀的影响
    5.4 讨论
第6章 双荧光素酶报告基因探究miR-1-3p/206/613作用于LXRα和OATP1B1的机制
    6.1 材料
        6.1.1 细胞株
        6.1.2 主要试剂
        6.1.3 主要仪器设备
    6.2 方法
        6.2.1 HepG2细胞的培养
        6.2.2 质粒构建、扩增、提取及鉴定
        6.2.3 miRNA-质粒转染
        6.2.4 双荧光素酶活性检测
        6.2.5 HepG2细胞质粒转染条件探索
        6.2.6 miR-1-3p/206/613对LXRα和OATP1B1报告基因荧光素酶活性的影响
        6.2.7 数据处理与统计分析
    6.3 结果
    6.4 讨论
第7章 结论与展望
    7.1 结论
    7.2 展望
致谢
参考文献
附录
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：4026765