腺苷对甘氨酸受体α1 ins 亚基的调节作用

发布时间：2025-03-15 02:17

　　目的:甘氨酸受体（Glycine receptors,GlyRs）是由α（α1-α4）亚基和β亚基组成的五聚体蛋白。在成年动物的脊髓背角中,包含α1亚基的甘氨酸受体介导的抑制性突触传递,在痛觉调控中发挥着重要作用。α1亚基存在一种异构体,即α1^ins。资料显示:在炎性疼痛发生后,腺苷能够显著增强甘氨酸受体的功能,缓解动物的疼痛反应,然而到目前为止,腺苷调节甘氨酸受体的机制尚不明确。本研究旨在探索腺苷对甘氨酸受体α1^ins亚基的调控作用。方法:本研究足底注射完全弗氏佐剂（Complete Freund’s adjuvant,CFA）建立炎性疼痛模型,通过行为学实验测定动物的疼痛阈值,研究腺苷对炎性疼痛诱发的痛觉超敏和痛觉过敏的影响;通过免疫组织化学和免疫细胞化学方法,确定α1^ins亚基在脊髓神经元中的分布;通过膜片钳电生理学记录方法,研究腺苷对甘氨酸受体电流的影响;通过免疫印迹分析,研究腺苷对α1^ins亚基第380位丝氨酸残基（Ser380）和细胞外信号调节激酶1/2（Extracellular sig...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略词
第一章 前言
    1.1 甘氨酸受体
        1.1.1 甘氨酸受体的结构与特性
        1.1.2 甘氨酸受体的功能调控与疼痛
        1.1.3 蛋白激酶
    1.2 腺苷受体
        1.2.1 腺苷受体的结构与特性
        1.2.2 A1型腺苷受体与疼痛
    1.3 Gi蛋白的结构与特性
    1.4 假设
第二章 实验材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验仪器与器材
        2.1.3 实验药物与试剂
        2.1.4 抗体
        2.1.5 实验溶液及配制
    2.2 实验方法和步骤
        2.2.1 行为学测定
        2.2.2 炎性疼痛模型建立
        2.2.3 鞘内给药
        2.2.4 动物麻醉
        2.2.5 蛋白样品制备
        2.2.6 蛋白免疫印迹(Western blot)
        2.2.7 细胞培养和转染
        2.2.8 脊髓片制备
        2.2.9 电生理膜片钳记录
        2.2.10 免疫组织化学染色
        2.2.11 免疫细胞化学染色
    2.3 数据统计
第三章 实验结果
    3.1 腺苷对CFA诱发的炎性疼痛的影响
        3.1.1 腺苷对CFA诱发的痛觉超敏的影响
        3.1.2 腺苷对CFA诱发的痛觉过敏的影响
    3.2 腺苷对甘氨酸受体电流的影响
        3.2.1 腺苷增强甘氨酸受体的电流幅值
        3.2.2 腺苷促进甘氨酸能突触传递
    3.3 腺苷对甘氨酸受体α1剪接异构体的调节作用
        3.3.1 A1Rs对α1亚基的调节作用
        3.3.2 A1Rs对 α1^ins亚基的调节作用
        3.3.3 A1Rs对α1与配体亲和力的影响
    3.4 甘氨酸受体α1^ins亚基在脊髓背角中的分布
        3.4.1 α1^ins亚基表达于脊髓背角神经元
        3.4.2 α1^ins亚基的突触分布
    3.5 腺苷调节甘氨酸受体α1^ins亚基的信号通路
        3.5.1 cAMP-依赖性蛋白激酶(PKA)通路在腺苷调节α1^ins中的作用
        3.5.2 Gβγ通路在腺苷调节α1^ins中的作用
    3.6 腺苷对α1^ins亚基磷酸化的作用
        3.6.1 A1Rs对脊髓背角ERK1/2 磷酸化水平的影响
        3.6.2 腺苷对α1^ins亚基Ser380 磷酸化水平的影响
        3.6.3 A1Rs对 α1^ins亚基Ser380 磷酸化水平的影响
第四章 讨论
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
在学期间的研究成果
致谢



本文编号：4034997