新型抗菌肽Anoplin的N-甲基化氨基酸替换和N端脂肪酸修饰类似物的设计及构效关系研究
发布时间：2025-03-19 04:22
抗生素的滥用导致的耐药菌出现并以惊人的速度增长已经成为威胁人类健康的严重公共卫生问题。抗菌肽作为先天性免疫系统的重要组成部分,其非特异性的膜破坏作用能够有效对抗包括多药耐药菌在内的多种病原菌引起的感染,并且不容易诱导细菌产生耐药性,是一种具有极大发展潜力的新型抗菌剂。Anoplin（GLLKRIKTLL-NH2）是从黄蜂毒液中分离得到的两亲性?-螺旋抗菌肽,具有广谱抗菌活性和极低的溶血活性,但是它的酶解稳定性差,抗菌作用强度不够理想。本研究为了改善Anoplin的局限性,首先采用N-甲基化氨基酸对Anoplin中敏感酶切位点的氨基酸（Leu,Ile,Lys和Arg）进行替换,设计合成了14条含N-甲基化氨基酸替换的Anoplin类似物。酶解稳定性研究结果显示,N-甲基化氨基酸替换后类似物的稳定性得到显著改善,其中,与母肽Anoplin相比,类似物M4.7抵抗胰蛋白酶和糜蛋白酶降解的能力提高了10～6和10～5倍,类似物M5.7耐受胰蛋白酶和糜蛋白酶降解的能力也分别提高了10～6和10～4倍,同时,类似物M3.6对这两种蛋白酶的稳定性均提高了10～5倍。但是,抗菌活性...
【文章页数】：111 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第一章 综述
1.1 引言
1.2 抗菌肽简介
1.2.1 抗菌肽的来源多样性
1.2.2 抗菌肽的生物活性多样性
1.2.3 抗菌肽的结构多样性
1.2.4 抗菌肽的结构特点
1.2.5 抗菌肽的作用机制研究
1.2.6 抗菌肽的发展与应用
1.3 抗菌肽修饰改造策略研究
1.3.1 提高抗菌肽抗菌活性的修饰策略
1.3.2 提高抗菌肽稳定性的修饰策略
1.3.3 降低抗菌肽毒性的修饰策略
1.4 天然抗菌肽Anoplin的研究背景
第二章 实验部分
2.1 设计思路
2.2 实验材料和仪器
2.2.1 实验试剂
2.2.2 实验仪器
2.2.3 实验菌株
2.3 实验方法
2.3.1 溶剂预处理
2.3.2 Anoplin及其类似物的多肽固相合成
2.3.3 最低抑菌浓度
2.3.4 二级结构研究
2.3.5 酶解稳定性试验
2.3.6 RP-HPLC降解率-时间分析
2.3.7 溶血活性试验
2.3.8 细胞毒性试验
2.3.9 不同培养条件下抗菌活性的测定
2.3.10 联合用药
2.3.11 抗生物膜试验
2.3.12 杀菌动力学试验
2.3.13 作用机制研究
2.3.14 诱导耐药试验
2.3.15 统计学分析
第三章 实验结果
3.1 N-甲基化氨基酸替换对天然抗菌肽Anoplin抗菌活性、稳定性和二级结构的影响
3.1.1 Anoplin及其N-甲基化氨基酸替换类似物的多肽固相合成
3.1.2 最低抑菌浓度
3.1.3 酶解稳定性
3.1.4 二级结构研究
3.2 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修饰的新型Anoplin类似物的设计、合成及活性研究
3.2.1 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修饰的新型Anoplin类似物的多肽固相合成
3.2.2 最低抑菌浓度
3.2.3 不同培养条件下的抗菌活性
3.2.4 二级结构研究
3.2.5 溶血活性
3.2.6 酶解稳定性
3.2.7 RP-HPLC降解率-时间分析
3.2.8 细胞毒性
3.2.9 联合用药
3.2.10 抗生物膜活性
3.2.11 杀菌动力学
3.2.12 作用机制研究
3.2.13 诱导耐药
第四章 讨论与总结
4.1 N-甲基化氨基酸替换对天然抗菌肽Anoplin抗菌活性、稳定性和二级结构的影响
4.2 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修饰的新型Anoplin类似物的设计、合成及活性研究
研究工作小结
参考文献
缩略词中英文对照表
在学期间的研究成果
致谢
附录
本文编号：4036652
【文章页数】：111 页
【学位级别】：硕士
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中文摘要
Abstract
第一章 综述
1.1 引言
1.2 抗菌肽简介
1.2.1 抗菌肽的来源多样性
1.2.2 抗菌肽的生物活性多样性
1.2.3 抗菌肽的结构多样性
1.2.4 抗菌肽的结构特点
1.2.5 抗菌肽的作用机制研究
1.2.6 抗菌肽的发展与应用
1.3 抗菌肽修饰改造策略研究
1.3.1 提高抗菌肽抗菌活性的修饰策略
1.3.2 提高抗菌肽稳定性的修饰策略
1.3.3 降低抗菌肽毒性的修饰策略
1.4 天然抗菌肽Anoplin的研究背景
第二章 实验部分
2.1 设计思路
2.2 实验材料和仪器
2.2.1 实验试剂
2.2.2 实验仪器
2.2.3 实验菌株
2.3 实验方法
2.3.1 溶剂预处理
2.3.2 Anoplin及其类似物的多肽固相合成
2.3.3 最低抑菌浓度
2.3.4 二级结构研究
2.3.5 酶解稳定性试验
2.3.6 RP-HPLC降解率-时间分析
2.3.7 溶血活性试验
2.3.8 细胞毒性试验
2.3.9 不同培养条件下抗菌活性的测定
2.3.10 联合用药
2.3.11 抗生物膜试验
2.3.12 杀菌动力学试验
2.3.13 作用机制研究
2.3.14 诱导耐药试验
2.3.15 统计学分析
第三章 实验结果
3.1 N-甲基化氨基酸替换对天然抗菌肽Anoplin抗菌活性、稳定性和二级结构的影响
3.1.1 Anoplin及其N-甲基化氨基酸替换类似物的多肽固相合成
3.1.2 最低抑菌浓度
3.1.3 酶解稳定性
3.1.4 二级结构研究
3.2 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修饰的新型Anoplin类似物的设计、合成及活性研究
3.2.1 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修饰的新型Anoplin类似物的多肽固相合成
3.2.2 最低抑菌浓度
3.2.3 不同培养条件下的抗菌活性
3.2.4 二级结构研究
3.2.5 溶血活性
3.2.6 酶解稳定性
3.2.7 RP-HPLC降解率-时间分析
3.2.8 细胞毒性
3.2.9 联合用药
3.2.10 抗生物膜活性
3.2.11 杀菌动力学
3.2.12 作用机制研究
3.2.13 诱导耐药
第四章 讨论与总结
4.1 N-甲基化氨基酸替换对天然抗菌肽Anoplin抗菌活性、稳定性和二级结构的影响
4.2 含N-甲基化氨基酸及N端脂肪酸修饰的新型Anoplin类似物的设计、合成及活性研究
研究工作小结
参考文献
缩略词中英文对照表
在学期间的研究成果
致谢
附录
本文编号：4036652
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