CT-1042抗肿瘤药效学及与姜黄素联合的评价研究

发布时间：2025-03-19 04:36

　　CT-1042(4-乙基-8-氟-4-羟基-9-甲氧基-11-甲基-1,12-二氢-4H-2-氧杂-6,12a-二氮杂-二苯并[b,H]芴-3,13-二酮)是一种小分子化合物,在体外实验中表现出对许多组织来源的肿瘤细胞都有抑制活性。非小细胞肺癌(NSCLC)发病率高且后果严重,虽然已有靶向药物上市,但易发生耐药,人群适用有限,研发新型抗肺癌药物,仍是临床迫切需求。CT-1042是一种抗癌活性很强的新型喜树碱类化合物,但对肺癌细胞的作用和潜在机制却不清楚。本研究在较为系统地评价CT-1042的抗癌特点的同时,重点评价和研究了CT-1042对NCI-H460 NSCLC细胞的抗癌特性及其分子机制。本研究用MTT实验来评估细胞增生活性,并用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡、线粒体膜电位(MMP)和进行细胞周期分析。进行实时定量PCR和Western blotting以确定相对的mRNA和蛋白质表达水平。进行裸鼠皮下移植瘤实验以评价CT-1042对体内肿瘤生长的影响。实验证实,CT-1042明显抑制了12种肿瘤细胞的增殖,诱导了受试细胞中MMP的减少,并增加了相对Caspase-3的活性。细胞周...

【文章页数】：154 页

【学位级别】：硕士

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英文缩略词对照表
摘要
abstract
1 引言
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 药品与主要试剂
        2.1.2 抗体
        2.1.3 实验仪器
        2.1.4 受试药
        2.1.5 细胞及实验动物
    2.2 体外实验方法
        2.2.1 细胞培养
        2.2.2 MTT实验
        2.2.3 Hoechst33342染色
        2.2.4 AnnexinV/PI双染实验
        2.2.5 线粒体膜电位(MMP)实验
        2.2.6 细胞周期分析
        2.2.7 Caspase-3活性实验
        2.2.8 细胞划痕实验
        2.2.9 Transwell实验
        2.2.10 实时定量PCR(RT-qPCR)
        2.2.11 蛋白质印迹法(WesternBlotting)
    2.3 体内实验方法
        2.3.1 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人肺癌细胞(NCI-H460)皮下移植瘤的治疗作用
        2.3.2 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人肝癌细胞(HCCLM3)皮下移植瘤的治疗作用
        2.3.3 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人结肠癌细胞(LoVo)皮下移植瘤的治疗作用
        2.3.4 苏木素-伊红染色法(H&E)
        2.3.5 免疫组织化学法(IHC)
    2.4 联合用药实验方法
        2.4.1 体外药物联合实验
        2.4.2 两药联合对细胞凋亡的影响
        2.4.3 两药联合对细胞周期分布的影响
        2.4.4 两药联合对mRNA表达的影响
        2.4.5 两药联合对蛋白表达的影响
        2.4.6 体内药物联合实验
    2.5 统计学分析
3 实验结果
    3.1 CT-1042对细胞增殖的抑制作用
    3.2 CT-1042对细胞核形态的影响
    3.3 CT-1042对肿瘤细胞凋亡的影响
    3.4 CT-1042对肿瘤细胞线粒体膜电位的影响
    3.5 CT-1042对肿瘤细胞周期分布的影响
    3.6 CT-1042对肿瘤细胞Caspase-3活性的影响
    3.7 CT-1042对肿瘤细胞迁移能力的影响
    3.8 CT-1042对肿瘤细胞mRNA表达的影响
    3.9 CT-1042对肿瘤细胞蛋白表达的影响
    3.10 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人肺癌细胞(NCI-H460)皮下移植瘤的治疗作用(第一批)
    3.11 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人肺癌细胞(NCI-H460)皮下移植瘤的治疗作用(第二批)
    3.12 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人肝癌细胞(HCCLM3)皮下移植瘤的治疗作用(第一批)
    3.13 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人肝癌细胞(HCCLM3)皮下移植瘤的治疗作用(第二批)
    3.14 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人结肠癌细胞(LoVo)皮下移植瘤的治疗作用(第一批)
    3.15 CT-1042对Nu/Nu裸小鼠人结肠癌细胞(LoVo)皮下移植瘤的治疗作用(第二批)
    3.16 H&E染色和免疫组化
    3.17 联合用药实验结果
        3.17.1 CT-1042联合姜黄素(Curcumin)对肺癌细胞增殖的影响
        3.17.2 姜黄素增强CT-1042对肺癌细胞周期阻滞以及凋亡的诱导作用
        3.17.3 CT-1042联合姜黄素对肺癌细胞mRNA表达的调控
        3.17.4 CT-1042联合姜黄素对肺癌细胞蛋白表达的调控
        3.17.5 CT-1042联合姜黄素对裸鼠皮下移植瘤的治疗作用
4 讨论
5 结论
参考文献
附录
个人简历
致谢
综述
    参考文献



本文编号：4036669