纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探

发布时间：2017-06-11 09:11

  本文关键词：纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的建立纳豆激酶(nattokinase,NK)酶联检测体系,探讨其跨膜转运机制。方法采用杂交瘤技术筛选抗NK的单克隆抗体,竞争抑制法鉴定单抗识别的抗原表位,Western Blot测定单抗特异性,双抗夹心ELISA法进行单抗灵敏度测定,Caco-2细胞模型探讨NK跨膜转运机制,生物信息学预测NK穿膜相关序列。结果筛选得到稳定分泌抗体且特异性识别NK的杂交瘤细胞6株,其中3株单抗识别相近的抗原表位,其余单抗识别不同的抗原表位;6株单抗检测NK的最小灵敏度分布为0.78~20.00ng/mL;Caco-2细胞模型显示,胞吞作用不是NK跨膜转运的主要途径;生物信息学提示,NK中含有3段穿膜相关序列。结论基于NK单抗建立的酶联检测体系,可有效监控NK跨膜转运过程,NK可能是依据蛋白转导结构域直接介导而实现其肠道吸收转运。
【作者单位】： 成都医学院科研实验中心;成都医学院生物医学系;成都医学院基础医学院;
【关键词】： 纳豆激酶 单克隆抗体 跨膜转运 蛋白转导结构域
【基金】：四川省教育厅项目(No:13ZB0220) 四川省科技厅项目(No:2015JY0205) 四川省卫生厅项目(No:130302,130298) 成都医学院科研基金(No:CYZ11-005) 国家级大学生创新项目(No:201313705007,201313705003,201413705005)
【分类号】：R927
【正文快照】： 药物在体内的生物利用度与药物胃肠粘膜通透性相关联,蛋白质、肽类等大分子药物因其膜透过性不甚理想,影响其生物利用度,限制了该类药物的应用[1]。此外,很多具有应用前景的药物受到人体内各种天然屏障(如血脑屏障)的限制也难以到达靶器官或靶细胞发挥药效,可见药物的跨膜转运

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 岑小波,王瑞淑,王莉,王航;成骨细胞跨膜转运锌特性及其机制的初步研究[J];中国药理学通报;2001年01期

2 夏承来;廖端芳;;依泽替米贝及其靶点和胆固醇跨膜转运[J];国外医学.药学分册;2006年05期

3 赵珊珊;张强;李静;周艳秋;单文卫;管洁;张藜莉;赵平;;香豆素6胶束的制备及在单层上皮细胞摄取和跨膜转运研究[J];中国药学杂志;2014年10期

4 李凤英;何京;钟海军;;细胞穿透肽的研究进展[J];中国新药杂志;2013年15期

5 程晓华;熊玉卿;;熊果酸在Caco-2细胞单层模型中的跨膜转运[J];中国药理学通报;2009年08期

6 亓宏;巫冠中;;药物跨膜转运细胞模型影响因素及应用[J];现代生物医学进展;2014年25期

7 刘宇;刘洪臣;吴霞;鄂玲玲;冷斌;;人牙周膜成纤维细胞对头孢噻肟钠的跨膜转运[J];实用口腔医学杂志;2009年06期

8 颜苗;方平飞;李焕德;徐萍;郑媚;张金娇;;甘草次酸18位差向异构体对P-gp底物罗丹明123在Caco-2细胞上跨膜转运的影响[J];中国药学杂志;2012年19期

9 王斌,陈敏珠,徐叔云;白芍总甙对大鼠腹腔巨噬细胞Ca~(2+)跨膜转运的影响[J];中国药理学与毒理学杂志;1997年03期

10 贾爱娟;谭树华;;双精氨酸转运(Tat)系统及其在大肠杆菌分泌表达重组蛋白中的应用[J];药物生物技术;2012年05期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 邱峰;郑姣妮;龙潇鸿;邱宗荫;;蜕皮甾酮在Caco-2细胞模型中的摄取、跨膜转运及外排研究[A];2008年中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集[C];2008年

2 秦小清;曲恒燕;刘泽源;;中国健康人群OATP1B1基因多态性与匹伐他汀钙片代谢的关系[A];第十二次全国临床药理学学术会议会议论文集[C];2010年

中国硕士学位论文全文数据库 前4条

1 邓利群;功能化胆酸二聚体的合成及阴阳离子同向跨膜转运活性[D];南方医科大学;2015年

2 张晨宇;小檗碱及8－羟基二氢小檗碱在小肠吸收机制的比较研究[D];华中科技大学;2011年

3 张庆颢;头孢妥仑跨膜转运吸收机制的体内外研究[D];大连医科大学;2008年

4 刘治芳;盐酸西莫替尼对小肠上皮细胞跨膜转运影响研究[D];中南大学;2014年

  本文关键词：纳豆激酶检测体系的建立及其跨膜转运途径初探，由笔耕文化传播整理发布。

，

本文编号：441274