纳米氧化锌致细胞凋亡的机制研究

发布时间：2017-08-08 00:03

  本文关键词：纳米氧化锌致细胞凋亡的机制研究

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【摘要】：目的研究氧化应激在纳米氧化锌引起的人非小细胞肺癌细胞(H1299)细胞自噬和凋亡之间的作用。方法实验分为实验组和对照组,对照组给予正常的培养基而实验组在培养基中分别给予2.5、10和25μg/ml(低,中,高剂量组)浓度的纳米氧化锌。向细胞中转染绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(GFP-LC3)质粒,通过观察绿色荧光斑点确定自噬的发生。Western blotting检测LC3-Ⅱ来验证绿色荧光斑点确定的细胞自噬。钙黄绿素乙酰甲酯(calcein AM)和碘化丙啶(PI)染色来确定活细胞和晚期凋亡细胞。超氧化物阴离子荧光探针(DHE)染色检测细胞内活性氧(ROS)的聚集。应用动态光散射测定纳米氧化锌在培养基中的分散状态。结果对照组细胞有少量的DHE被氧化成红色,也出现了绿色荧光斑点的聚集,但没有细胞被PI染成红色。低剂量组被氧化的DHE开始增多,绿色荧光斑点开始增多,少量细胞被PI染成红色;中、高剂量组中大量DHE被氧化,绿色荧光斑点显著增多,大量细胞被PI染成红色。实验组纳米氧化锌在培养基中分散良好。结论纳米氧化锌在H1299细胞中引起了氧化应激,氧化应激诱发了细胞的自噬,细胞自噬功能的紊乱诱导了细胞的凋亡。
【作者单位】： 包头医学院研究生学院;
【关键词】： 靶向运输 纳米粒子 氧化应激 凋亡 自噬
【基金】：国家自然基金(81160341)
【分类号】：R96
【正文快照】： 肿瘤和炎症组织中的血管不完整,使得纳米粒子和大分子物质可向这些组织渗漏,而淋巴回流功能的受损又降低了其将纳米粒子和大分子物质清除出肿瘤和炎症组织的可能性,使得纳米粒子和大分子物质在肿瘤和炎症组织中滞留的现象称之为增强的通透性和潴留作用(EPR)[1],即EPR效应。EPR

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