大鼠及比格犬体内异甜菊醇的定量分析及代谢物鉴定

发布时间：2017-08-13 08:04

  本文关键词：大鼠及比格犬体内异甜菊醇的定量分析及代谢物鉴定

  更多相关文章： 异甜菊醇 定量分析 代谢物鉴定 UPLC-MS/MS

【摘要】：异甜菊醇是由甜菊糖分离得到的化学单体,研究发现其具有抗心脑血管-缺血复灌损伤、抗糖尿病等多种生理作用,具有较高的药用价值,但目前缺乏有效的针对异甜菊醇药物代谢研究的分析方法。本文运用UPLC-MS/MS联用技术,建立了一种优于文献报道的快速、灵敏的异甜菊醇的定量分析方法;并进行大鼠及比格犬体内异甜菊醇的初步药代动力学研究及代谢物鉴定。具体如下:1)经方法优化,异甜菊醇定量分析的UPLC-MS/MS方法确定为:经液液萃取法或蛋白沉淀法预处理生物样品,以醋酸甲羟孕酮为内标,采用UPLC C18柱,以均含0.1%甲酸(v/v)的水和乙腈组成流动相,经梯度洗脱,在正离子模式下经多反应监测扫描测定离子对m/z 319.25→255.24通道下的异甜菊醇信号。2)方法学验证结果表明,该方法对大鼠及比格犬血浆样品中异甜菊醇的选择性良好,线性范围为2.000~1000 ng/m L,定量下限为2.000 ng/m L。准确度、精密度、稳定性均符合接受标准,异甜菊醇及内标的提取回收率与基质效应结果精密、可重现。应用上述方法初步研究大鼠及比格犬体内异甜菊醇的药代动力学过程,结果表明静脉注射给药后异甜菊醇的血药浓度呈双指数方式下降。大鼠20 mg/kg异甜菊醇钠(isosteviol sodium,STVNa)静脉注射及比格犬6 mg/kg STVNa静脉注射后,异甜菊醇的初始血药浓度C0、分布相半衰期t1/2α、末期半衰期t1/2z、血药浓度-时间曲线下面积AUC0~∞分别为84.59±12.75μg/m L、0.27±0.12 h、10.13±5.61 h、239.9±161.9 mg/L.h;14.20±8.220μg/m L、0.14±0.02 h、6.92±2.65 h、3.495±1.523 mg/L.h。此外,应用上述方法对大鼠体内异甜菊醇的组织分布进行了初步研究。3)结合肝微粒体孵育体外试验及STVNa静脉注射体内试验,运用UPLC-MS/MS联用技术,采用全信息串联质谱扫描、碎片离子扫描及多反应监测扫描,利用MetabolynxXS软件分析,进行异甜菊醇代谢物鉴定。结果首次发现,大鼠体内异甜菊醇主要代谢为4种代谢物,包括3种新发现的I相代谢羟基加合代谢物,和1种已知的II相代谢葡萄糖醛酸结合物;比格犬体内异甜菊醇主要代谢为葡萄糖醛酸结合物。
【关键词】：异甜菊醇 定量分析 代谢物鉴定 UPLC-MS/MS
【学位授予单位】：华南理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R965;O657.63
【目录】：

• 摘要5-6
• ABSTRACT6-11
• 缩略词11-13
• 第一章 绪论13-24
• 1.1 液相色谱-质谱联用技术在药物分析中的运用13-15
• 1.1.1 质量分析器13-14
• 1.1.2 电离方式14
• 1.1.3 色谱分离系统14-15
• 1.2 异甜菊醇药代动力学研究方法15-19
• 1.2.1 体内药代动力学研究方法15-18
• 1.2.2 体外代谢研究方法18-19
• 1.3 异甜菊醇生物学及药代动力学研究现状19-21
• 1.3.1 异甜菊醇的生物学研究现状19-20
• 1.3.2 异甜菊醇的药代动力学研究现状20-21
• 1.4 研究背景、意义和内容21-24
• 1.4.1 研究背景21-22
• 1.4.2 研究意义22
• 1.4.3 研究内容22-24
• 第二章 建立大鼠及比格犬体内异甜菊醇定量分析的UPLC-MS/MS方法24-46
• 2.1 引言24
• 2.2 材料与方法24-32
• 2.2.1 实验仪器与试剂24-25
• 2.2.2 实验方法25-32
• 2.3 结果与讨论32-45
• 2.3.1 质谱方法优化结果32-36
• 2.3.2 内标选择36-37
• 2.3.3 色谱方法优化结果37-43
• 2.3.4 样品预处理方法优化结果43-45
• 2.4 本章小结45-46
• 第三章 异甜菊醇定量分析方法的验证及应用46-84
• 3.1 引言46-49
• 3.1.1 药代动力学模型46-47
• 3.1.2 药代动力学参数47-49
• 3.2 材料与方法49-56
• 3.2.1 实验仪器与试剂49-50
• 3.2.2 实验方法50-56
• 3.3 结果与讨论56-82
• 3.3.1 异甜菊醇定量分析方法的验证56-76
• 3.3.2 异甜菊醇定量分析方法的应用76-82
• 3.4 本章小结82-84
• 第四章 异甜菊醇代谢物鉴定84-106
• 4.1 引言84-86
• 4.1.1 药物代谢研究的意义84
• 4.1.2 药物代谢研究的方法84-85
• 4.1.3 异甜菊醇代谢物鉴定的研究思路85-86
• 4.2 材料与方法86-92
• 4.2.1 实验仪器与试剂86
• 4.2.2 试验方法86-92
• 4.3 结果与讨论92-104
• 4.3.1 肝微粒体体外孵育试验92-100
• 4.3.2 体内试验结果100-103
• 4.3.3 代谢途径推测103-104
• 4.4 本章小结104-106
• 结论与展望106-109
• 结论106-107
• 创新之处107
• 展望107-109
• 参考文献109-115
• 攻读硕士学位期间取得的研究成果115-116
• 致谢116-117
• 附件117

【参考文献】

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 闫海霞;鼠尾草酸在大鼠体内的药物动力学及代谢研究[D];沈阳药科大学;2008年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 孙淑萌;Beagle犬血清中HS203的微量分析及初步药代动力学研究[D];中国海洋大学;2012年

，

本文编号：666220