大鼠肝微粒体中睾酮及其代谢产物6β-羟基睾酮的高效液相色谱检测方法的改进

发布时间：2017-08-28 23:08

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【摘要】：建立快速、准确、灵敏的高效液相色谱法,对大鼠肝微粒体中的探针药物睾酮及其代谢产物6β-羟基睾酮进行准确定量分析,用于体外评价大鼠肝微粒体CYP3A酶的活性.对色谱条件进行优化,采用Durashell C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以10 mmol/L Na2HPO4水溶液(p H 9.26)-乙腈-甲醇(58∶32∶10,体积比)为流动相,流速1.0 m L/min,检测波长245 nm,柱温30℃,进样量10μL.大鼠肝微粒体与睾酮标准品在37℃进行温孵,用固相萃取小柱对温孵产物进行萃取,用甲醇-水(体积比1妣1)复溶上机分析.6β-羟基睾酮和睾酮分别在0.05~10 mg/L和0.2~20 mg/L内线性关系良好(r0.999 5),检出限分别为0.003 4和0.034 mg/L(S/N≥3),定量限分别为0.011和0.114 mg/L(S/N≥10),加标回收率分别为100.1%和99.2%,相对标准偏差(RSD)分别为1.75%和1.13%.该方法符合生物样品测定标准.适合体外测定6β-羟基睾酮和睾酮含量,进而用于评价药物对肝微粒体CYP3A酶活性的影响.
【作者单位】： 河北大学化学与环境科学学院;河北大学药学院;河北大学医学实验中心;
【关键词】： 大鼠肝微粒体 睾酮 β-羟基睾酮 高效液相色谱法
【基金】：河北省自然科学基金项目(H2013201203) 河北大学医学学科专项资金建设资助项目(2014A1003)
【分类号】：R965;O657.72
【正文快照】： 细胞色素P450[1]混合功能氧化酶系统(CYP450)是最大的药物代谢酶蛋白超家族,它的CYP3A亚族是最重要的功能成分,不仅含量占CYP450总量的30%[2]左右,该酶还在许多内源性和外源性化合物的代谢中起着重要作用[3].CYP3 A酶的活性可被一些药物抑制或诱导,其活性的改变,关系着药物在

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