麦角菌Cp-1菌株遗传转化体系的建立

发布时间：2017-09-05 19:31

  本文关键词：麦角菌Cp-1菌株遗传转化体系的建立

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【摘要】：麦角菌Cp-1菌株是本实验室筛选获得的工业生产菌株,能产生多种麦角生物碱。为了实现该菌株定向生物合成某种特定的药用麦角碱,遗传转化体系的建立不可或缺,但由于麦角菌本身存在遗传异质性,现有的遗传转化体系不能满足Cp-1菌株的需要。本文研究了菌丝体浓度、溶壁酶浓度和酶解时间对原生质体形成的影响,并考察了该菌株对不同抗生素的敏感性,以期建立其遗传转化体系。结果表明,使用1%溶壁酶(5 mL)25℃酶解菌丝体(1g)2 h后,即可产生大量的原生质体。在PEG的介导下,以1.5 mg·mL~(-1)的潮霉素B为筛选标记,转化质粒pAN7-1于原生质体,可获得大量转化子,PCR诊断证明外源基因已成功地整合到Cp-1菌株的基因组上。本研究为进一步改良Cp-1生产菌株奠定了重要的基础。
【作者单位】： 中国医学科学院北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室&国家卫生计生委天然药物生物合成重点实验室;
【关键词】： 麦角菌 麦角生物碱 原生质体制备 遗传转化
【基金】：药物研究所基本科研业务费(2015CX07)
【分类号】：R915
【正文快照】： 麦角菌(Claviceps)能够产生多种天然的、具有药用活性的麦角生物碱(ergot alkaloid),具有广泛的临床用途[1]。很多天然或者半合成的麦角生物碱在现代医学中普遍使用,如麦角新碱用于催产和治疗产后出血;麦角胺及其衍生物用于治疗偏头痛、产后止血;麦角毒碱类用于治疗高泌乳素血

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本文编号：799864