尼美舒利通过Caspase-3促进HSC-T6细胞的凋亡

发布时间：2017-09-17 05:39

  本文关键词：尼美舒利通过Caspase-3促进HSC-T6细胞的凋亡

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【摘要】：目的:研究选择性COX-2抑制剂尼美舒利对Caspase-3蛋白表达的影响,为进一步阐明COX-2抑制HSC凋亡促肝纤维化的机制提供新的研究思路。方法:1.实验细胞培养:大鼠HSC-T6细胞用含10%灭活胎牛血清的RPMI-l640培养基,在37℃饱和湿度、含5%CO2的孵箱中培养。每2-3天换一次培养基。2.实验分组:本实验共分为三个小组,设计HSC-T6细胞为空白对照组(以下简称NC组),200μmol/L、400μmol/L尼美舒利为处理组(以下分别将200umol/L、400umol/L尼美舒利处理组简称为NS200组、NS400组)。3.实验方法:待用相应剂量尼美舒利对各组HSC-T6细胞进行处理48小时后,采用流式细胞术分别检测各组HSC-T6细胞的周期和细胞凋亡情况,并运用蛋白质印迹法检测Caspase-3蛋白表达水平。结果:1.尼美舒利对HSC-T6细胞凋亡的影响:NC组、NS200组和NS400组细胞总凋亡率分别为:10.23%±1.34%、25.23%±7.7%、65.87%±2.89%。各组凋亡率有显著差异(P0.05)。同NC组比较,NS200组和NS400组总凋亡率明显升高,有统计学意义(P0.05)。提示尼美舒利可以促进HSC-T6细胞凋亡,且呈剂量依赖性。2.尼美舒利对HSC-T6细胞周期的影响:将各组HSC-T6细胞周期(G0/G1、S及G2)结果进行汇总后得出,NS400组的G0/G1%相较NC组有所增高,且S%较NC组明显下降,故初步推测,NS400组的细胞周期有可能在G0/G1期有所阻滞,而NS200组的HSC-T6细胞发育几乎没受影响。提示尼美舒利可以阻滞HSC-T6细胞周期进程,而且呈剂量依赖性。3.尼美舒利对Caspase-3蛋白表达的影响:同NC组相比,NS-200组和NS400组的Caspase-3蛋白的表达明显增加,呈剂量依赖性。结论:1.尼美舒利可以促进HSC-T6细胞凋亡,呈剂量依赖性。2.尼美舒利可使HSC-T6细胞的生长阻滞于G0/G1期,且呈剂量依赖性。3.尼美舒利促进HSC-T6细胞凋亡及阻滞HSC-T6细胞周期进程的机制可能同其上调Caspase-3蛋白的表达相关。
【关键词】：肝星状细胞 尼美舒利 半胱天冬酶-3 环氧化酶-2
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R965
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 主要英文缩略语索引10-11
• 第1章 前言11-15
• 第2章 实验材料和方法15-23
• 2.1 实验材料15-17
• 2.2 实验方法17-23
• 第3章 实验结果23-27
• 3.1 尼美舒利对HSC-T6细胞凋亡的影响23-24
• 3.2 尼美舒利对HSC-T6细胞周期的影响24-26
• 3.3 WB检测各组HSC-T6细胞中Caspase-3 的蛋白水平26-27
• 第4章 讨论27-31
• 4.1 COX-2 与 HSC 凋亡的关系27
• 4.2 COX-2 可能通过 Caspase-3 参与 HSC 凋亡27-31
• 第5章 结论31-33
• 参考文献33-37
• 综述37-45
• 参考文献42-45
• 硕士期间发表的文章及获奖情况45-47
• 致谢47

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本文编号：867590