pH响应性聚合物PEG-b-PCL-b-PAE递送万古霉素靶向皮炎的研究

发布时间：2017-10-07 16:47

  本文关键词：pH响应性聚合物PEG-b-PCL-b-PAE递送万古霉素靶向皮炎的研究

  更多相关文章： pH响应 β-氨基酯 药物载体

【摘要】：智能型纳米药物载体在正常人体生理环境时,药物释放很慢甚至不释放,而在特定的靶向部位时药物快速并持续释放,从而达到靶向给药和药物缓释的目的。肿瘤内部的微酸环境是研究肿瘤部位靶向给药的热点之一,已有国内外研究利用纳米材料电荷反转的特性增强其在肿瘤部位的聚集,并取得较好的研究效果。炎症部位与肿瘤组织均呈酸性,pH响应性聚合物也可应用于抗感染研究。在本研究中,利用聚(β-氨基酯)(PAE)电荷转换的特点,我们设计并合成了具有pH响应的三嵌段共聚物聚乙二醇-b-聚已内酯-b-聚氨基酯(PEG-b-PCL-b-PAE),以无pH响应的两嵌段共聚物聚乙二醇-b-聚已内酯(PEG-b-PCL)为对照,6-羧基四甲基罗丹明(TAMRA)标记的万古霉素的载体进行体内外作用细菌的研究。实验结果表明：通过开环聚合和迈克尔加成反应成功合成了PEG-b-PCL和PEG-b-PCL-b-PAE,利用自组装技术分别得到了PEG-PCL和PEG-PCL-PAE胶束。通过MTT实验证实两种胶束对NIH 3T3和293T增殖生长无明显影响；在pH 7.4时,两种胶束表面均带负电荷,当pH逐渐降低至小于6.5时,PEG-PCL-PAE胶束表面带正电,且随着pH降低其表面所带正电荷越大,而PEG-b-PCL胶束表面一直带负电；PEG-PCL-PAE和PEG-PCL分别与万古霉素通过双溶剂乳化挥发法形成53nm和61nm的纳米粒(分别以PEG-PCL-PAE/Van和PEG-PCL/Van表示)；通过CLSM对比不同pH(6.5和7.4)下Vanco-TAMRA、PEG-PCL/Van和PEG-PCL-PAE/Van分别与耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)结合所呈现的荧光,结果显示pH 6.5时PEG-PCL-PAE/Van与细菌结合后其荧光强度明显增强,其他两组在不同pH下无明显变化；裸鼠活体荧光成像结果表明PEG-PCL-PAE可以有效延长药物长循环时间并提高药物在炎症部位的聚集。本研究中我们将稳定性好、生物相容、具有电荷转变特性的PAE聚合物作为万古霉素的载体应用于体内外的研究,结果显示该聚合物能有效延长抗生素在体内的循环时间,并增加其在炎症部位的聚集。PAE利用电荷反转靶向结合细菌的作用方式使其能广泛应用于各类细菌引起的炎症,为炎症的早期诊断和治疗提供新的思路和方法。
【关键词】：pH响应 β-氨基酯 药物载体
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R943;R96
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-9
• 前言9-18
• 1 研究背景及意义9-16
• 1.1 细菌耐药性9
• 1.2 纳米载体9-14
• 1.2.1 无机纳米载体10-12
• 1.2.2 高分子纳米载体12-14
• 1.3 刺激响应性纳米载体14-16
• 1.3.1 pH敏感纳米粒子14-15
• 1.3.2 温度敏感纳米载体15
• 1.3.3 还原敏感纳米载体15-16
• 2 研究内容16-17
• 3 技术路线17-18
• 实验材料与方法18-30
• 1. 实验材料18-22
• 1.1 主要实验试剂18-19
• 1.2 主要实验仪器19-21
• 1.3 主要实验耗材21
• 1.4 细胞株、菌株及动物21
• 1.5 主要溶液配制21-22
• 2. 实验方法22-30
• 2.1 聚合物合成和纳米粒制备23-25
• 2.1.1 PEG-PCL的合成23
• 2.1.2 PEG-PCL-PAE的合成23-24
• 2.1.3 Vanco-TAMRA的合成24
• 2.1.4 PEG-PCL-PAE/Van制备24-25
• 2.1.5 PEG-PCL/Van的制备25
• 2.2 材料表征25
• 2.2.1 质谱和~1H NMR分析25
• 2.2.2 纳米粒Zeta电位分析25
• 2.2.3 载药纳米粒粒径分布和形态观察25
• 2.2.4 PEG-PCL-PAE/Van的体外稳定性检测25
• 2.3 胶束载药及体外药物释放25-26
• 2.3.1 罗丹明标准曲线测定26
• 2.3.2 载药量和包封率测定26
• 2.3.3 万古霉素释放26
• 2.4 体外靶向研究26-27
• 2.5 抑菌实验27-28
• 2.5.1 细菌培养27
• 2.5.2 材料抗菌能力测定27-28
• 2.6 细胞毒性实验28-29
• 2.6.1 细胞培养28
• 2.6.2 细胞毒性测定28-29
• 2.7 体内炎症靶向29-30
• 2.7.1 建立动物皮炎模型29
• 2.7.2 裸鼠体内活体荧光成像29-30
• 2.7.3 切片水平验证30
• 2.8 数据分析30
• 实验结果30-41
• 1. 材料表征30-35
• 1.1 质谱和~1H NMR分析31-33
• 1.2 纳米粒Zeta电位分析33-34
• 1.3 纳米粒粒径分布和形态观察34
• 1.4 PEG-PCL-PAE/Van的稳定性34-35
• 2. 纳米粒载药效率测定及药物释放35-37
• 2.1 罗丹明标准曲线35-36
• 2.2 载药量及包封率36
• 2.3 万古霉素释放36-37
• 3. 体外靶向实验37-38
• 4. 体外抑菌实验38-39
• 5. 细胞毒性实验39
• 6. 体内炎症靶向39-41
• 6.1 裸鼠体内活体荧光成像39-40
• 6.2 CLSM观察切片荧光40-41
• 讨论41-42
• 结论42-44
• 参考文献44-48
• 附录一48-64
• 综述1：靶向肽在递送siRNA进行肺癌治疗研究中的应用48-56
• 参考文献54-56
• 综述2：多模态成像在干细胞研究中的应用进展56-64
• 参考文献61-64
• 附录二64-66
• 附录三：英文缩略词汇表66-68
• 附录四：致谢68-69
• 附录五：个人简历69-70

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 ;德国博兰斯勒PH梦幻钢琴上海乐器展先发夺魁[J];钢琴艺术;2012年11期

2 曲东,王保莉;甲酚红分光光度法测定黄土pH[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);1989年01期

3 P.DEDOMATO ,J.M.CASES ,M.KONGOLO ,A.CARTIER ,J.L.RIVAIL ,赵景云;戊黄药离子的稳定性与PH的关系-模拟及与乙黄药离子的比较[J];有色矿冶;1992年06期

4 赵玲;对总离子强度缓冲液pH影响水中氟化物测定的讨论[J];污染防治技术;1994年01期

5 王少波;杜永峰;姚秉华;;pH示差法测定黑豆皮中的花青素[J];化学分析计量;2008年01期

6 陈俊芳;周裔彬;白丽;杨大伟;;水分、温度、时间和pH对板栗淀粉颗粒形态的影响[J];食品研究与开发;2010年03期

7 陈建伟;郑平;唐崇俭;余q，

本文编号：988988