乙烯利对雄性小鼠生殖毒性和免疫毒性作用的研究

发布时间：2018-02-27 08:14

  本文关键词： 乙烯利 小鼠 生殖毒性 细胞周期 胸腺 脾脏 淋巴细胞亚群　出处：《济南大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：乙烯利（ethephon）（40%的水剂也叫一试灵）是一种植物生长调节剂型农药，主要作用是促进果实的成熟；在某些果品的保存和远距离运输等方面发挥着巨大的作用。目前很多瓜果蔬菜等农产品在上市前大多使用乙烯利作为催熟剂。近年来，很多不法商贩和果农为了获取更大的经济利益，过量使用和滥用乙烯利的现象越来越严重。乙烯利的超量滥施滥用造成果蔬中乙烯利残留严重超标，乙烯利残留在水果并进入人体，会对健康产生一定的影响。乙烯利毒性研究报道较少，有个别文献报道乙烯利能引起小鼠的生殖毒性并能产生一定的免疫毒性作用，本实验深入系统地探讨了乙烯利对昆明种雄性小鼠的生殖功能和免疫功能的毒性作用。 【研究目的】 探讨乙烯利对雄性小鼠生殖系统的影响和对免疫系统的毒性作用，为今后深入、系统地探讨乙烯利的毒性作用及其毒性作用机制等研究提供线索。 【研究方法】 1、雄性小鼠随机分为4组，每组20只，实验设四个剂量组，分别设低剂量染毒组(85mg/kg，1"32LD50)、中剂量染毒组(170mg/kg，1"16LD50)和高剂量染毒组(340mg/kg，1"8LD50)，另设阴性对照组（生理盐水），经口灌胃染毒，连续染毒14天，1次/天，随时观察雄性小鼠的生长情况。从首次给药第15天起以1:1与雌性小鼠合笼。从合笼的第2天起，每天早晨8点左右观察并记录雌性小鼠阴栓出现情况，以此作为雄性小鼠性欲功能的指标。于合笼后第21天以颈椎脱臼处死雌性小鼠，剖腹检查，计算受孕率和生育仔鼠数。于首次给药后第28天采用颈椎脱臼法处死雄性小鼠，摘取睾丸、附睾及精囊腺，肉眼观察并称重。 观察乙烯利对雄性小鼠精子质量的影响及睾丸组织的病理学改变，用流式细胞技术（FCM）对每组10只雄性小鼠的睾丸生精细胞的细胞周期进行测定，并选用原位末端转移酶标记法（TUNEL）进行雄性小鼠的睾丸生精细胞凋亡情况的分析。 2、将健康成年SPF级雄性昆明种小鼠随机分为4组，每组10只，实验组设低剂量染毒组(85mg/kg)、中剂量染毒组(170mg/kg)和高剂量染毒组(340mg/kg)，染毒剂量相当于乙烯利的1"32LD50、1"16LD50、1"8LD50；另设阴性对照组（生理盐水）。选用经口灌胃方法进行染毒，染毒容量为20ml/kg，分别给予雄性小鼠不同剂量的乙烯利溶液，每天1次，连续染毒14天。于首次给药后第28天，采用摘眼球取血法采血2ml，颈椎脱臼法处死小鼠，迅速摘取脾脏和胸腺，肉眼观察并称重。检测并观察分析小鼠外周血的血液学各项指标和淋巴细胞细胞周期的变化情况。选用流式细胞技术（FCM）对每组6只雄性小鼠脾细胞和胸腺细胞进行细胞周期的检测，并观察对脾脏淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+及胸腺淋巴细胞CD4+、CD8+比例的影响。 【研究结果】 1、乙烯利对雌雄小鼠生殖系统的影响 与阴性对照组相比较，中、高剂量染毒组雄性小鼠体重明显减轻(P0.05)，高剂量染毒组雌性小鼠受孕率、雄性小鼠精囊腺重量和精子计数明显减少(P0.05)；各剂量染毒组雄性小鼠精子活动率均低于阴性对照组(P0.05)；各剂量染毒组雄性小鼠精子畸形率均高于阴性对照组(P0.05)；中、高剂量染毒组雄性小鼠睾丸组织病理学检查可见明显异常。与阴性对照组相比，中、高剂量染毒组雄性小鼠的单倍体细胞细胞比例明显减少，中、高剂量染毒组雄性小鼠的二倍体细胞和四倍体细胞的细胞比例明显升高，其差异均具有统计学意义(P0.05)；中、高剂量染毒组雄性小鼠1C:4C和1C:2C呈下降趋势，与阴性对照组比较其差异均具有统计学意义（P0.05）；各剂量染毒组雄性小鼠睾丸组织生精细胞的细胞凋亡率均升高（P0.05）。 2、乙烯利对雄性小鼠外周血常规及淋巴细胞细胞周期的影响 各剂量染毒组雄性小鼠外周血的红细胞计数（RBC）、白细胞计数（WBC）、淋巴细胞计数（LYM）、血小板计数（PLT）和血红蛋白（HGB）、嗜中性粒细胞（NEU）含量及淋巴细胞百分比（LYM％）以及淋巴细胞G0/G1期、S期、G2/M期细胞所占比例与阴性对照组相比，差异均无统计学意义。 3、乙烯利对雄性小鼠脾脏和胸腺细胞周期及淋巴细胞亚群的影响 本试验研究发现与阴性对照组比较，中、高剂量染毒组雄性小鼠脾脏G2/M期细胞数所占比例升高，差异均有统计学意义（P0.05）；各剂量染毒组雄性小鼠脾脏S期和G0/G1期细胞数所占比例均无显着改变。 与阴性对照组相比，高剂量染毒组雄性小鼠脾脏淋巴细胞CD3+比例明显升高（P0.05）；各剂量染毒组雄性小鼠胸腺淋巴细胞CD8+比例明显升高（P0.05），CD4+/CD8+比值下降（P0.05）；中、高剂量染毒组雄性小鼠胸腺淋巴细胞CD4+比例升高（P0.05）。 【研究结论】 1、乙烯利对雄性小鼠产生了一定的生殖毒作用，能使雄性生育力下降，睾丸组织的生精细胞凋亡率升高。 2、乙烯利能引起雄性小鼠生精细胞比例的变化，1C:4C和1C:2C的相对下降，，阻滞小鼠生精细胞的细胞周期进程。 3、本研究尚未发现乙烯利能引起雄性小鼠外周血血液学各指标及外周血淋巴细胞细胞周期分布的改变。 4、乙烯利通过G2/M期阻滞抑制了雄性小鼠脾细胞和胸腺细胞的细胞增殖。乙烯利使雄性小鼠脾脏和胸腺淋巴细胞中的CD3+、CD4+和CD8+比例相对增加，这提示乙烯利对雄性小鼠脾脏和胸腺淋巴细胞亚型比例有一定的影响。
[Abstract]:ethephon ( 40 % water agent is also called a test ) is a kind of plant growth regulating dosage form pesticide . The main function is to promote the maturity of fruit . In recent years , many kinds of agricultural products such as fruits and vegetables have been used as the ripening agent . In recent years , many illegal traders and farmers have been used as the ripening agent . In recent years , many illegal traders and farmers have had a certain effect on health . The study of ethrel toxicity has been reported relatively few , and some literature reports that ethephon can cause reproductive toxicity of mice and can produce certain immune toxic effects . This experiment deeply studied the toxic effects of ethephon on the reproductive function and immune function of Kunming male mice . Purpose of research To investigate the effects of ethephon on the reproductive system of male mice and the toxic effects on the immune system , and provide clues for the future in - depth and systematic study on the toxicity and toxic mechanism of ethephon . Methodology of research

1,闆勬

本文编号：1541858