莲子分离蛋白对小鼠抗衰老作用的研究

发布时间：2018-03-17 06:31

  本文选题：莲子分离蛋白　切入点：DE-52纯化　出处：《南京师范大学》2012年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：本文以莲子作为原料,通过优化蛋白质的提取条件,采用DEAE-cellulose52纯化得到分离蛋白,评价其营养价值,并通过D-半乳糖致衰老小鼠实验进一步研究分离蛋白的抗衰老作用,结果如下： 1.采用Tris-HCl缓冲液浸提莲子中的总蛋白,并利用响应面法优化其提取条件,得到的最佳提取工艺为：液料比7.2：1,提取时间2.4h,提取温度11.1℃,此时总蛋白的提取率达到81.35%,与回归模型的相对误差小于0.5%。 2.经透析除盐后的莲子蛋白再结合DEAE-cellulose52纯化,即用最佳工艺提取的蛋白液上样,用不同浓度(0.2、0.4、0.6、0.8mo1/L)的Tris-NaCl洗脱液梯度洗脱,得到的分离蛋白蛋白浓度为83.75%。氨基酸分析后得出分离蛋白中氨基酸种类是16种,必需氨基酸的比例为57%,分离蛋白的氨基酸评分为48.2,化学评分为38.4,接近于WHO/FAO的氨基酸模式,生物价约为47,营养价值较全面。 3.建立D-半乳糖致衰老的动物模型,分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组以及阳性对照组,通过测定血液以及肝脏、心脏、肾脏中的抗氧化指标(包括丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱时肽过氧化物酶(GSH-Px)的酶活力)以及皮肤中的羟脯氨酸的含量来研究莲子分离蛋白的抗衰老活性,结果显示,高剂量的莲子分离蛋白(500mg/kg/d)能明显降低血液与内脏组织中的MDA含量,能显著提高CAT、GSH-Px、SOD的活力以及皮肤中的羟脯氨酸含量(P0.05),而低剂量(100mg/kg/d)的作用不显著(P0.05),但与模型组相比还是有一定的作用,阳性对照组(300mg/kg/d)的作用几乎介于两者之间,符合理论的剂量关系,且莲子分离蛋白对于抗氧化酶的作用力大小为：CATSODGSH-Px。并通过石蜡切片后的细胞观察,得出模型组中细胞核内含物明显增多、染色深,高剂量组与阳性对照组均能明显改善此现象,但低剂量组改善作用不显著,进一步证实了前面所测指标的准确性。由于关于莲子分离蛋白的抗衰老作用的体内研究很少,故本实验的研究成果为莲子的进一步开发利用与深入研究提供了科学得理论依据。
[Abstract]:In this paper, lotus seed was used as raw material, the protein was purified by DEAE-cellulose52, and its nutritional value was evaluated. The anti-senescence effect of the isolate was further studied by aging mice induced by D-galactose. The results are as follows:. 1. The total protein in lotus seed was extracted with Tris-HCl buffer solution, and the extraction conditions were optimized by response surface method. The optimum extraction conditions were obtained as follows: the ratio of liquid to material was 7.2: 1, the extraction time was 2.4 h, and the extraction temperature was 11.1 鈩，

本文编号：1623580