孕哺期壬基酚暴露对仔鼠小脑轴突和髓鞘的影响及其机制的研究
发布时间：2021-05-07 15:08
目的:壬基酚（Nonylphenol,NP）是壬基酚聚氧乙烯醚（nonylphenol polyethoxylate,NPE）的一种主要分解产物。NPE在工、农业中被广泛用作分散剂、乳化剂和表面活性剂等。NPE在生产和使用的过程中,以及排放到环境中后容易分解为NP,分解出的NP会造成水体、底泥、土壤,甚至空气的污染,使人和生物体暴露在NP中。发育期的神经系统对NP敏感,已有研究证实,发育期暴露于NP可致小脑功能出现异常,然而其机制尚不明确。本研究构建了孕哺期NP暴露动物模型,研究NP暴露对仔鼠小脑轴突和髓鞘发育的影响,并深入探讨其可能的分子机制。研究方法:建立孕哺期NP暴露动物模型。对妊娠第0天至生育后第21天（postnatal day 21,PD 21）的母鼠通过灌胃的方式分别给与10、50和100 mg/kg的NP（溶于玉米油中）,对照组母鼠只给予玉米油。仔鼠出生后,母鼠对仔鼠进行自然哺乳直至仔鼠PD 21断奶。以PD 14、PD 21和PD 80的雄性仔鼠小脑为研究对象,用Luxol fast blue染色的方法观察PD 14仔鼠小脑髓鞘的发育情况;用免疫荧光的方法检测轴突髓鞘...
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 孕哺期壬基酚暴露对仔鼠小脑髓鞘发育的影响及其机制的研究
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要试剂和器材
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要器材
2.2 主要试剂的配制
2.2.1 4%多聚甲醛的配制
2.2.2 10%SDS的配制
2.2.3 10%APS的配制
2.2.4 TBST的配制
2.2.5 电泳缓冲液的配制
2.2.6 转膜液的配制
2.2.7 封闭液的配制
2.2.8 Luxol fast blue染色液的配制
2.2.9 PBS的配制
2.2.10 抗原修复液的配制
2.3 动物模型的建立
2.4 组织收集和处理
2.5 western blot检测
2.6 Luxol fast blue染色
2.7 免疫荧光
2.8 统计分析
3 结果
3.1 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑髓鞘发育迟缓
3.2 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑中成熟少突胶质细胞减少
3.3 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑星形胶质细胞增加
3.4 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑BMP4通路激活
4 讨论
5 结论
第二部分 孕哺期壬基酚暴露致仔鼠小脑轴突损伤及其机制的研究
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要试剂和仪器
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要器材
2.2 主要试剂的配制
2.2.1 4%多聚甲醛的配制
2.2.2 10%SDS的配制
2.2.3 10%APS的配制
2.2.4 TBST的配制
2.2.5 电泳缓冲液的配制
2.2.6 转膜液的配制
2.2.7 封闭液的配制
2.2.8 PBS的配制
2.2.9 抗原修复液的配制
2.3 研究对象和分组
2.3.1 实验动物模型的构建和组织处理
2.3.2 PC12细胞系的培养与模型的建立
2.3.3 小脑的免疫荧光检测
2.3.4 小脑的western blot检测
2.3.5 PC12 细胞western blot检测
2.3.6 PC12细胞免疫荧光检测
2.3.7 统计分析
3 结果
3.1 孕哺期NP暴露抑制仔鼠小脑轴突发育
3.2 孕哺期NP暴露使仔鼠小脑浦肯野细胞的轴突产生肿胀
3.3 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑中ROCK2 的表达增加,ROCK2 通路激活
3.4 NP致 PC12 细胞中ROCK2 表达量增加,ROCK2 通路激活
3.5 NP抑制PC12细胞的神经突生长
3.6 NP通过激活ROCK2 通路抑制PC12 细胞神经突生长
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
文献综述
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects of chronic exposure to nonylphenol on locomotor activity and social behavior in zebrafish（Danio rerio）[J]. Jigang Xia,Cuijuan Niu ,Xuejiao Pei Ministry of Education Key Laboratory of Biodiversity Science and Ecological Engineering,College of Life Sciences,Beijing Normal University,100875 Beijing,China.. Journal of Environmental Sciences. 2010(09)
[2]性早熟女童血清中双酚A、辛基酚、4-壬基酚测定和分析[J]. 乔丽丽,郑力行,蔡德培. 卫生研究. 2010(01)
[3]性早熟患儿血清中环境内分泌干扰物的测定和分析[J]. 芦军萍,郑力行,蔡德培. 中华预防医学杂志. 2006(02)
本文编号：3173608
【文章来源】：中国医科大学辽宁省
【文章页数】：102 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 孕哺期壬基酚暴露对仔鼠小脑髓鞘发育的影响及其机制的研究
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要试剂和器材
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要器材
2.2 主要试剂的配制
2.2.1 4%多聚甲醛的配制
2.2.2 10%SDS的配制
2.2.3 10%APS的配制
2.2.4 TBST的配制
2.2.5 电泳缓冲液的配制
2.2.6 转膜液的配制
2.2.7 封闭液的配制
2.2.8 Luxol fast blue染色液的配制
2.2.9 PBS的配制
2.2.10 抗原修复液的配制
2.3 动物模型的建立
2.4 组织收集和处理
2.5 western blot检测
2.6 Luxol fast blue染色
2.7 免疫荧光
2.8 统计分析
3 结果
3.1 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑髓鞘发育迟缓
3.2 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑中成熟少突胶质细胞减少
3.3 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑星形胶质细胞增加
3.4 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑BMP4通路激活
4 讨论
5 结论
第二部分 孕哺期壬基酚暴露致仔鼠小脑轴突损伤及其机制的研究
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要试剂和仪器
2.1.1 主要试剂
2.1.2 主要器材
2.2 主要试剂的配制
2.2.1 4%多聚甲醛的配制
2.2.2 10%SDS的配制
2.2.3 10%APS的配制
2.2.4 TBST的配制
2.2.5 电泳缓冲液的配制
2.2.6 转膜液的配制
2.2.7 封闭液的配制
2.2.8 PBS的配制
2.2.9 抗原修复液的配制
2.3 研究对象和分组
2.3.1 实验动物模型的构建和组织处理
2.3.2 PC12细胞系的培养与模型的建立
2.3.3 小脑的免疫荧光检测
2.3.4 小脑的western blot检测
2.3.5 PC12 细胞western blot检测
2.3.6 PC12细胞免疫荧光检测
2.3.7 统计分析
3 结果
3.1 孕哺期NP暴露抑制仔鼠小脑轴突发育
3.2 孕哺期NP暴露使仔鼠小脑浦肯野细胞的轴突产生肿胀
3.3 孕哺期NP暴露致仔鼠小脑中ROCK2 的表达增加,ROCK2 通路激活
3.4 NP致 PC12 细胞中ROCK2 表达量增加,ROCK2 通路激活
3.5 NP抑制PC12细胞的神经突生长
3.6 NP通过激活ROCK2 通路抑制PC12 细胞神经突生长
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
文献综述
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历
【参考文献】：
期刊论文
[1]Effects of chronic exposure to nonylphenol on locomotor activity and social behavior in zebrafish（Danio rerio）[J]. Jigang Xia,Cuijuan Niu ,Xuejiao Pei Ministry of Education Key Laboratory of Biodiversity Science and Ecological Engineering,College of Life Sciences,Beijing Normal University,100875 Beijing,China.. Journal of Environmental Sciences. 2010(09)
[2]性早熟女童血清中双酚A、辛基酚、4-壬基酚测定和分析[J]. 乔丽丽,郑力行,蔡德培. 卫生研究. 2010(01)
[3]性早熟患儿血清中环境内分泌干扰物的测定和分析[J]. 芦军萍,郑力行,蔡德培. 中华预防医学杂志. 2006(02)
本文编号：3173608
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