邻苯二甲酸—单—乙基己酯引起EA.hy926细胞自噬依赖性凋亡的实验研究

发布时间：2024-01-03 19:50

　　目的:邻苯二甲酸二乙基己酯(Di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)作为一种增塑剂被广泛应用于食品包装和医疗设备,且年产量巨大(近三百万吨)。邻苯二甲酸酯能够很轻易地迁入人体体液中,血袋和静脉输液管等很可能是人类接触DEHP的重要途径。邻苯二甲酸-单-乙基己酯(Mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)是DEHP的一种活性代谢产物。大量研究表明,MEHP具有生殖系统毒性、泌尿系统毒性、肝脏毒性、生长发育毒性和致癌性,但是对于心血管毒性的探究却不多见,其作用机制也不明确。近年来,随着对自噬研究的深入,发现细胞自噬是细胞对细胞器及长半衰期蛋白质进行降解并予以回收再利用的一种细胞生存机制,被称为Ⅱ型程序性死亡,区别于细胞凋亡(Ⅰ型程序性死亡)。虽然二者从形态学和代谢途径等方面存在差别,但是,越来越多的研究表明,自噬和凋亡之间的信号转导通路存在广泛交联。有研究表明,MEHP会引起一些细胞发生凋亡。所以本实验以人脐静脉内皮细胞EA.hy 926为研究对象,探究MEHP是否可以引起溶酶体膜通透性增加(Lysosomal membrane permea...

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【学位级别】：硕士

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英文摘要
(一)前言
(二)材料和方法
    1.材料
        1.1 实验对象、药品和主要试剂
        1.2 主要仪器
    2.方法
        2.1 细胞培养和处理
        2.2 MTT实验
        2.3 蛋白质印迹实验(Westernblot)
        2.4 AO染色检测溶酶体膜稳定性
        2.5 JC-1检测线粒体膜电位
        2.6 TUNEL染色检测细胞凋亡
        2.7 统计方法
(三)结果
    1.MEHP对细胞活性的影响
    2.MEHP诱导EA.hy926细胞发生自噬
    3.MEHP引起LMP
    4.MEHP引起组织蛋白酶B释放增加
    5.MEHP引起细胞线粒体膜电位下降
    6.MEHP引起细胞色素c蛋白表达量增加
    7.MEHP诱导EA.hy926细胞自噬依赖性凋亡
    8.CA-074Me对细胞色素c的释放和细胞凋亡的影响
(四)讨论
(五)结论
(六)参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表论文情况
致谢



本文编号：3876703