紫地榆防龋活性部位和活性成分的筛选

发布时间：2020-03-28 16:13

【摘要】：目的:研究紫地榆提取物对人工早期根面龋的作用并对其活性成分进行分离和筛选,为紫地榆防治根面龋提供理论依据。方法:(1)采用琼脂稀释法测定紫地榆提取物对常驻口腔细菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),再以低于MIC的4个浓度梯度配制含药的TPY液体培养基测定紫地榆提取物对口腔常驻细菌产酸的影响。(2)采用变形链球菌诱导法形成早期人工根面龋模型,以去离子水作为阴性对照组,以20.00 mg/LNaF作为阳性对照组,用不同浓度的紫地榆提取物处理早期根面龋,再放入新鲜菌液24h,通过24h, 48h, 72h三个时间点钙溶出量的检测和扫描电子显微镜观察紫地榆提取物再矿化人工根面龋后牙根组织表面矿物质的沉积情况定性分析紫地榆抑制根面龋的作用效果;采用离体牛切牙制备人工离体牙根组织块,开窗,置37℃脱矿液中96h,形成人工根面龋后,随机分组,每组6个样本,用不同实验组进行再矿化循环。应用偏光显微镜观察各组样本再矿化后的形态学变化和激光扫描共聚焦显微镜观察样本再矿化后矿物质含量的变化分析紫地榆提取物对根面龋的再矿化效果。(3)测定紫地榆活性成分对变形链球菌和粘性放线菌的最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC),再以低于MIC的4个浓度梯度配制含药的TPY液体培养基测定紫地榆活性成分对2种口腔常驻细菌产酸的影响。(4)采用硅胶、SephadexLH-20凝胶等现代色谱分离材料对紫地榆活性部位(正丁醇萃取物)进行分离纯化,再通过波谱学(核磁共振波谱)方法对分离的化合物进行结构解析。结果:(1)紫地榆提取物对常驻口腔细菌生长和产酸均有不同程度的抑制作用。(2)紫地榆正丁醇、乙酸乙酯、乙醇提取物对变形链球菌的最低抑菌浓度分别为4.00 g/L、4.00 g/L、8.00 g/L;紫地榆提取物在最低抑菌浓度时对早期根面龋的发展有抑制作用;偏光显微镜观察结果和激光扫描共聚焦显微镜分析显示紫地榆提取物对早期根面龋的再矿化作用效果:乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物乙醇提取物水提取物,其中再矿化效果较好的是4.5 mg/mL乙酸乙酯提取物组和4.5 mg/mL正丁醇提取物组。(3)紫地榆活性成分(没食子酸、五倍子酸甲酯、儿茶素、鞣花酸)可影响致龋菌生长代谢并能有效抑制其产酸。(4)从紫地榆正丁醇部位中首次分离得到四个化学成分:胡萝卜苷(daucosterol),齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃木糖苷(Oleanolic acid 3-O-β-D -xylopyranoside),1 个双黄酮(3,2'-Epilarixinol),3,3',4-三甲基鞣花酸-4'-O-β-D-葡萄糖苷(3,3',4-tri-methylellagic acid-4'-O-β-D-glucopyranoside)。结论:紫地榆提取物对常驻口腔细菌生长和产酸有抑制作用,并能抑制根面龋脱矿并促进其再矿化,从而有效抑制人工早期根面龋的发展,其效果较好的是紫地榆正丁醇提取物和乙酸乙酯提取物;紫地榆活性成分(没食子酸、五倍子酸甲酯、儿茶素、鞣花酸)对变形链球菌和粘性放线菌生长及产酸均有抑制作用。对紫地榆正丁醇提取物提取物进行分离纯化得到胡萝卜苷(daucosterol),齐墩果酸-3-O-β-D-吡喃木糖苷(Oleanolic acid 3-O-β-D-xylopyranoside),1个新的双黄酮(3,2,-Epilarixinol),3,3',4-三甲基鞣花酸-4'-O-β-D-葡萄糖苷(3, 3'4-tri-methylellagic acid-4'-O-β-D-glucopyranoside)四个化合物。
【图文】：

紫地榆防龋活性部位和活性成分的筛选

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紫地榆防龋活性部位和活性成分的筛选

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【学位授予单位】：大理大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284;R285

【参考文献】