基于NF-κB信号通路研究芪丹地黄汤对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制

发布时间：2020-04-21 07:48

【摘要】：研究目的基于NF-κB信号通路研究芪丹地黄汤对糖尿病肾病模型大鼠的作用,通过不同的方向来探讨芪丹地黄汤的肾脏保护作用及其机制。方法第一部分主要通过对大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)创建动物模型,以及探讨芪丹地黄汤对模型鼠干预后的生理生化等指标的影响;分别对体重、血糖、24 h尿蛋白、血肌酐值、血尿素氮、24 h尿量、KW/BW值等各项指标进行测量。第二部分主要探讨芪丹地黄汤对糖尿病肾病大鼠肾脏影响之下,其组织学改变;通过制备石蜡切片对其进行HE染色、Masson染色、PAS染色来探讨芪丹地黄汤对肾脏的保护作用。第三部分主要探讨芪丹地黄汤对糖尿病肾病大鼠NF-κB信号通路的影响。通过Western blotting印迹检测了芪丹地黄汤对 NF-κB 信号通路中 p-p65、p65、p50、p-κBα、IκBα、IκBβ、Iκκα/β、TGF-β和α-SMA等蛋白质表达的影响。结果第一部分成功的创建了 T1DM大鼠模型,后期我们检测的模型鼠并且芪丹地黄汤对T1DN模型鼠的生理生化等指标有明显改善作用。第二部分为对肾脏组织进行HE染色、Masson染色、PAS染色;其结果为,与正常组大鼠相比,糖尿病肾病模型组大鼠肾小球中重度纤维化,细胞外基质积聚增加,肾小球系膜增厚,毛细血管壁增厚,肾小球与肾小管细胞内大量糖原蛋白沉积,可见结节,结构不清;非诺贝特组与芪丹地黄汤组大鼠肾小球纤维化程度改善,肾小球系膜轻度增厚,毛细血管壁轻度增厚;芪丹地黄汤组肾小球与肾小管细胞内少量糖原蛋白沉积;肾小球和肾小管结构形态趋于正常。第三部分采用Elisa法检测各组大鼠血清中IL-6、IL-1β和TNF-α水平;与模型组相比,非诺贝特组大鼠与芪丹地黄汤组大鼠血清中IL-6、IL-1β和TNF-α表达水平均显著性降低,且芪丹地黄汤组大鼠血清中IL-6的表达较非诺贝特组大鼠血清中IL-6的表达显著性降低。同时通过Western blotting检测NF-κB信号通路内蛋白p-p65、p65、p50、p-κBα、IκBα、IκBβ、Iκκα/β、TGF-β3 和 α-SMA 的表达,与正常组比较,模型组大鼠p50、p65、IκBβ和IκBα水平没有变化,Iκκα/β、p-p65、p-IκBα、TGF-β和α-SMA的表达水平明显提高;非诺贝特组与芪丹地黄汤组大鼠肾脏内Iκκα/β、p-p65、p-IκBα、TGF-β和α-SMA蛋白的表达较模型组均显著性降低。结论在造模成功的基础之上给予药物干预,我们发现芪丹地黄汤对模型鼠的生理生化以及组织学等指标有明显改善作用;可以改善糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化,降低肾小球与肾小管细胞内糖原蛋白沉积;明显抑制糖尿病肾病大鼠中炎性细胞因子的产生与释放。糖尿病肾病模型组大鼠Iκκα/β、p-p65、p-IκBα、TGF-β和α-SMA的表达水平明显提高,而芪丹地黄汤治疗可显著降低DN大鼠体内Iκκα/β、p-p65、p-IκBα、TGF-β和α-SMA表达水平,说明芪丹地黄汤可显著抑制糖尿病肾病模型组大鼠NF-κκB信号通路的激活。因此我们可以认为芪丹地黄汤通过抑制NF-κB信号通路的激活,抑制炎性细胞因子的产生与释放,改善DN大鼠生理生化以及肾脏组织学等各项功能指标来起到保护肾脏的作用。
【图文】：

成纤维细胞，血管紧张素ＩＩ（Ａｎｇｌｌ）的增多导致大量的单核细胞和巨噬细胞浸逡逑润肾小球，从而使ＥＣＭ合成增多，同时降解减少［１９，，２（）］。炎症参与糖尿病肾病逡逑发生的机制如图１所示。逡逑血管紧张素Ｈ逦高血糖逡逑Ｃ邋Ａｎｇ邋ＩＩ）邋ｒ逦ｔ逡逑与ＲＡＧＥ结合，诱导炎逡逑诱导ＴＧＦ－ｐ的表达逦系膜细胞逦症基因如ＩＬ－１、ＴＮＰ－逡逑ａ等的表达．逡逑氃局部纤溶酶原激活物逦子逦基膜糖化，其电荷丧逡逑抑制剂、ＭＣＰ－１的表达逦失，蛋白尿增多．逡逑单核／巨噬细胞逡逑在背脏炎症聚集、逡逑活化逡逑细胞外基质g逡逑ＣＥＣＨ）逡逑肾小球硬化、背小管间质纤维化逡逑图１炎症参与糖尿病肾病发生机制逡逑３逡逑

诱发肾脏的氧化应激［２６，２７］。伍少伟等［２８］发现２型糖尿病患者血清中的丙二醛水逡逑平与肾脏损害有关，其表现形式主要为正相关表达。高血糖通过ＲＯＳ引起糖尿逡逑病的病理生理学如图２所示。逡逑Ｔ邋Ｆｒｅｅ邋Ｆａｔｔｙ邋Ａｃｉｄｓ逦Ｈｙｐｅｒｇｌｙｃｅｍｉａ逡逑逦逦逦邋Ｉ逡逑士逡逑丨个柋ｏｃｈｏｎｄｒｌａｌ邋ＲＯＳ邋＇？—），逦逡逑逦ｊ逦邋：￣＾邋Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅ邋Ｄａｍａｇｅ逡逑ｔ邋Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ邋Ｓｔｒｅｓｓ邋＾逦逡逑ｔ邋ＮＦ－ｋＢ逦Ｉ逡逑逦ｔ邋ｐ３８邋ＭＡＰＫ逦１逡逑ＴＪＮＫ／ＳＡＰＫ邋ｉ逦Ｉ逦逡逑Ｉ邋Ｚ逦邋丨一邋逦逡逑ｆ邋ｆ邋Ｓｏｒｂｉｔｏｌ邋Ｉ邋ｔ邋ＡＧＥ逦ｆ邋ｔ邋ＤＡｇ］逦ｔ邋Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ逡逑Ｉ邋—邋＇逦ｉ逦Ｉ逦ｊ邋ｔ邋Ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄｓ逡逑ＲＡＧＥ邋个邋ＰＫＣ邋丨逦＼逡逑ｉ逦逦逦逦逦＼逡逑逦ｉ逦邋？逦＾——ｉ逡逑｜邋Ｉｎｓｕｌｉｎ邋Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ！逦Ｐ邋Ｃｅｌｌ邋Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ邋｜逡逑｜逦｜逦￣＇逦Ｉ逡逑Ｌ逦＞｜邋Ｄｉａｂｅｔｉｃ邋Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ逦＾逡逑图２高血糖通过ＲＯＳ引起糖尿病的病理生理学示意图逡逑核转录因子－ｋＢ邋（邋ｎｕｃｌｅａｒ邋ｆａｃｔｏｒ邋ｋＢ，邋ＮＦ－ｋＢ邋）信号通路是介导炎症和氧化应逡逑激的重要通路［２９］，在调控因各种因素激活的炎症细胞通路中起着重要作用。研逡逑究发现
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张安东;;葛丹地黄汤治疗耳鸣临床诊疗探析[J];航空航天医学杂志;2019年07期

2 徐明鑫;王俊志;丁玮涔;;麦味地黄汤治疗痤疮阴虚火旺证50例[J];实用中医药杂志;2017年05期

3 王献之;;地黄汤帖[J];绿风;2018年02期

4 李光芒;;四妙勇安地黄汤治疗膝关节骨性关节炎120例[J];四川中医;2009年10期

5 李颖骥;;丹芪地黄汤结合激素治疗成人难治性肾病综合征40例[J];实用中医内科杂志;2009年08期

6 陈友方,张万峰;归芪地黄汤治疗原发性肾病综合征的临床观察[J];赣南医学院学报;2004年02期

7 张岐山,李淑钊;桂附地黄汤加味治疗输尿管结石[J];山东中医杂志;1998年05期

8 董建华;;临证验方十则[J];中国农村医学;1987年01期

9 ;中医药信息[J];山东中医杂志;1988年05期

10 李熊飞;;羚羊地黄汤[J];中医杂志;1988年01期

相关会议论文 前10条

1 江华;张奕颖;杜明瑞;;归芪地黄汤联合糖皮质激素治疗系统性红斑狼疮的效果分析[A];湖南中医药大学学报2016/专集：国际数字医学会数字中医药分会成立大会暨首届数字中医药学术交流会论文集[C];2016年

2 张燕;;芪草地黄汤治疗难治性肾病综合征临床研究[A];中华中医药学会第二十一届全国中医肾病学术会议论文汇编（下）[C];2008年

3 褚晓秋;范尧夫;张会峰;刘超;;九子地黄汤治疗非增殖期糖尿病视网膜病变的临床研究[A];中华中医药学会糖尿病分会全国中医药糖尿病大会（第十九次）资料汇编[C];2018年

4 林瑞霞;杨青;陈敏广;庄捷秋;陈晓英;;黄芪地黄汤对小儿过敏性紫癜肾炎的治疗作用[A];2008年浙江省肾脏病学术年会论文汇编[C];2008年

5 南征;孙胜君;;二仙地黄汤治疗2型糖尿病胰岛素抵抗30例临床研究[A];第十二届全国中医糖尿病大会论文汇编[C];2010年

6 林瑞霞;杨青;陈敏广;庄捷秋;陈晓英;;黄芪地黄汤对小儿过敏性紫癜肾炎治疗作用的研究[A];2007年浙江省儿科学、小儿外科学学术年会论文汇编[C];2007年

7 沈丕安;;羌活地黄汤治疗类风湿关节炎的研究[A];第四次中华中医药科技成果论坛论文集[C];2014年

8 赵维洪;吕欣;;参芪芡实地黄汤治疗糖尿病肾病Ⅳ期的临床观察(摘要)[A];第十九次全国中医肾病学术交流会论文汇编[C];2006年

9 黄向阳;;仙鹤地黄汤治疗血精症[A];浙江省中医药学会男性病专业委员会2009年学术年会暨继续教育学习班资料汇编[C];2009年

10 何映;;二至地黄汤治疗血精症体会[A];第二次全国中西医结合男科学术会议论文集[C];2003年

相关重要报纸文章 前3条

1 周富明全国名老中医传承工作室、浙江省平湖市中医院 沈晓昀 张忠贤 整理;三紫地黄汤[N];中国中医药报;2017年

2 ;桑麻地黄汤加减治疗脑萎缩[N];上海中医药报;2005年

3 ;芪丹地黄汤治疗糖尿病肾病有效[N];中国中医药报;2004年

相关博士学位论文 前4条

1 谌祖江;芪丹地黄汤抑制糖尿病肾病肾脏纤维化的作用和机制研究[D];南方医科大学;2018年

2 马飞;基于NF-κB信号通路研究芪丹地黄汤对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用及其机制[D];南方医科大学;2018年

3 张云璧;犀角（水牛角）地黄汤对变态反应性皮炎动物模型的治疗及作用机理的研究[D];北京中医药大学;2008年

4 周珂;超微黑地黄汤治疗CKD3期患者临床观察及对UUO大鼠肾组织细胞凋亡的影响[D];湖南中医药大学;2011年

相关硕士学位论文 前10条

1 孙凡舒;知柏萆參地黄汤治疗急性痛风性关节炎的临床疗效观察及代谢组学研究[D];南京中医药大学;2019年

2 沈璐;丹芪地黄汤治疗气阴两虚型糖尿病肾病临床研究[D];陕西中医学院;2006年

3 程相稳;桂附地黄汤加减方治疗桥本甲状腺炎所致甲状腺功能减退症的临床观察[D];山东中医药大学;2014年

4 董丽婷;葛丹地黄汤治疗肾精亏虚型耳鸣的临床疗效观察[D];山东中医药大学;2010年

5 李建英;参麦地黄汤对慢性肾衰血浆内皮素的影响及临床研究[D];山东中医药大学;2003年

6 袁锐;祛风地黄汤加减治疗寻常型银屑病（血虚风燥证）的临床观察[D];黑龙江中医药大学;2013年

7 韩翠翠;桑麻地黄汤治疗帕金森病的临床研究[D];山东中医药大学;2016年

8 邹敏;茵陈地黄汤联合蓝光治疗早期新生儿病理性黄疸的临床观察[D];广西中医药大学;2017年

9 李思运;从脾阴虚论治干燥综合征的理论探讨及临床研究[D];南京中医药大学;2010年

10 曾雪榕;芪药地黄汤治疗糖尿病肾病Ⅲ期（气阴两虚型）的临床疗效观察[D];福建中医学院;2008年

本文编号：2635543