复方蜥蜴散不同微粒组合剂对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡及SIRT1、P53影响的实验研究
发布时间：2020-04-22 20:36
【摘要】：目的:观察复方蜥蜴散不同微粒组合剂对人SGC-7901胃癌细胞增殖、凋亡及对SIRT1、P53蛋白表达水平的影响,阐明该方干预胃癌细胞的作用机制。方法:160只SPF级雄性SD大鼠随机分8组:生理盐水组、复方蜥蜴散80目组、100目组,80目+100目混合高剂量组、中剂量组、低剂量组、华蟾素片组、5-Fu组,每组20只。各组分别予相应药物灌胃或尾静脉注射1周后,在无菌环境下腹主动脉取血离心制备含药血清,将其加入人SGC-7901胃癌细胞培养预定时间。MTT法测定经复方蜥蜴散含药大鼠血清干预后体外培养SGC-7901细胞的增殖活性;Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞仪检测复方蜥蜴散对SGC-7901细胞凋亡和周期的影响;免疫细胞化学法和Western-Blot法检测复方蜥蜴散对SGC-7901细胞SIRT1、P53蛋白表达水平的影响。采用SPSS20.0 For Windows软件进行统计分析。结果1.MTT检测细胞增殖:与生理盐水组比较,各药物血清干预组细胞增殖明显受到抑制(P0.05);与5-Fu组、华蟾素片组比较,各中药组OD均值减小(P0.05);80目+100目混合组的OD值小于80目组、100目组(P0.05);各混合组之间相互比较,以80目+100目混合高剂量组效果最优(P0.05)。2.Annexin V-FITC/PI双染法对细胞凋亡的影响:与生理盐水组比较,各药物血清干预组细胞总凋亡率明显增加(P0.05);各中药组细胞总凋亡率大于5-Fu组、华蟾素片组(P0.05);80目+100目混合组的总凋亡率大于80目组、100目组(P0.05);各混合组相互比较,以80目+100目混合高剂量组细胞总凋亡率最高(P0.05)。3.流式细胞仪检测细胞周期:与生理盐水组相比,各药物血清干预组处于G_1期细胞的比例显著增多(P0.05);各中药组G_1期细胞的比例大于华蟾素片组、5-Fu组(P0.05);80目+100目混合组G_1期细胞的比例大于80目组、100目组(P0.05);各混合组之间比较,以80目+100目混合高剂量组G_1期细胞的比例最大(P0.05)。4.免疫细胞化学法检测人SGC-7901胃癌细胞SIRT1、P53表达:与生理盐水组比较,各含药血清组中SIRT1、P53蛋白的阳性表达均有不同程度降低(P0.05);各中药组SIRT1、P53蛋白的阳性表达均低于华蟾素片组、5-Fu组(P0.05);80目+100目混合组SIRT1、P53蛋白的阳性表达低于80目组、100目组(P0.05);各混合组比较,SIRT1、P53蛋白的阳性表达以80+100目高剂量组最少(P0.05)。5.Western-Blot检测人SGC-7901胃癌细胞SIRT1、P53表达水平:与生理盐水组比较,各含药血清组中SIRT1、P53的灰度值均有不同程度降低(P0.05);各中药组SIRT1、P53的灰度值均低于华蟾素片组、5-Fu组(P0.05);80目+100目混合组SIRT1、P53的灰度值低于80目组、100目组(P0.05);各混合组比较,SIRT1、P53的灰度值以80目+100目高剂量组最低(P0.05)。结论1.复方蜥蜴散不同微粒组合剂能够抑制人SGC-7901胃癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。2.复方蜥蜴散不同微粒组合剂能够促进人SGC-7901胃癌细胞周期停滞,并且将细胞阻滞在G_1期。3.复方蜥蜴散不同微粒组合剂能够降低SIRT1、P53蛋白表达,通过抑制SIRT1介导的P53信号通路进而阻断癌变,发挥抑制肿瘤增长作用。
【图文】：
组别 总凋亡率（%）生理盐水组 7.9±1.235-Fu 组 15.3±1.45*华蟾素片组 18.1±2.32*80 目组 24.3±2.51*△100 目组 24.3±2.11*△80 目+100 目低剂量组 27.3±2.42*△▲80 目+100 目中剂量组 30.3±1.97*△▲80 目+100 目高剂量组 35.7±3.98*△▲□注：*与生理盐水组比较，*P<0.05；△与 5-Fu 组、华蟾素片组比较，△P<0.05；▲与 80 目组、100 目组比较<0.05；□各混合组之间比较，□P<0.05。
组别 G1期比例生理盐水组 50.4±4.245-Fu 组 59.51±3.87*华蟾素片组 60.36±6.21*80 目组 65.44±6.15*△100 目组 65.24±8.76*△80 目+100 目低剂量组 67.69±6.19*△▲80 目+100 目中剂量组 69.3±5.22*△▲80 目+100 目高剂量组 73.32±2.96*△▲□注：*与生理盐水组比较，*P<0.05；△与 5-Fu 组、华蟾素片组比较，△P<0.05；▲与 80 目组、100 目组比较.05；□各混合组之间比较，□P<0.05。
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：
组别 总凋亡率（%）生理盐水组 7.9±1.235-Fu 组 15.3±1.45*华蟾素片组 18.1±2.32*80 目组 24.3±2.51*△100 目组 24.3±2.11*△80 目+100 目低剂量组 27.3±2.42*△▲80 目+100 目中剂量组 30.3±1.97*△▲80 目+100 目高剂量组 35.7±3.98*△▲□注：*与生理盐水组比较，*P<0.05；△与 5-Fu 组、华蟾素片组比较，△P<0.05；▲与 80 目组、100 目组比较<0.05；□各混合组之间比较，□P<0.05。
组别 G1期比例生理盐水组 50.4±4.245-Fu 组 59.51±3.87*华蟾素片组 60.36±6.21*80 目组 65.44±6.15*△100 目组 65.24±8.76*△80 目+100 目低剂量组 67.69±6.19*△▲80 目+100 目中剂量组 69.3±5.22*△▲80 目+100 目高剂量组 73.32±2.96*△▲□注：*与生理盐水组比较，*P<0.05；△与 5-Fu 组、华蟾素片组比较，△P<0.05；▲与 80 目组、100 目组比较.05；□各混合组之间比较，□P<0.05。
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
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