天然水蛭素对人微血管内皮细胞三维培养模型的影响

发布时间：2020-04-24 06:20

【摘要】：研究目的研究天然水蛭素对人微血管内皮细胞(human microva-scular vein endothelial cells,HMVECs)增殖的影响及其诱导血管再生的机制。实验方法取HMVECs接种至Matrigel基质胶培养24h,体外建立三维培养模型,于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。然后将细胞三维培养模型随机分为含不同浓度天然水蛭素培养组(1、4、7 ATU/ml组)以及单纯含10%FBS的DMEM培养基的培养组(对照组)。各组细胞三维培养模型加入对应培养基后,培养24、48、72 h采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测各组细胞增殖情况;培养24 h对1、4、7 ATU/ml组行成管实验,免疫荧光染色法测定各组细胞VEGF及Notch1表达水平。实验结果细胞三维培养观察示,HMVECs于基质胶上贴附良好,24h完全形成管腔样结构。CCK-8检测示,各时间点1、4 ATU/ml组A值均高于对照组(P0.05),其中4 ATU/ml组最高;而7 ATU/ml组A值显著低于对照组以及1、4 ATU/ml组,(P0.05)。细胞成管实验示,1、4 ATU/ml组成管数较对照组及7 ATU/ml组明显增多,且4 ATU/ml组多于1 ATU/ml组,比较差异有统计学意义(P0.05);7 ATU/ml组与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。免疫荧光染色示,与对照组比较,1、4 ATU/ml组Notch1表达量增高,7 ATU/ml组降低;其中4 ATU/ml组与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。1、4、7 ATU/ml组VEGF表达量均较对照组增高,比较差异均有统计学意义(P0.05);4 ATU/ml组高于1、7 ATU/ml组,比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论低、中浓度天然水蛭素可促进HMVECs增殖使血管再生,而高浓度天然水蛭素则对HMVECs的血管再生起抑制作用;其作用机制可能与VEGF-Notch信号通路有关。
【图文】：

图 1 人微血管内皮细胞（HMVECs）三维培养 24 小时后观察（倒置相差显微镜×2Fig1 HMVECs by 3D cultured after 24 hours (inverted phase contrast microscope×200

CCK-8检测人微血管内皮细胞（HMVECs）生长曲线
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2638630