缩泉丸对糖尿病膀胱病变的作用研究

发布时间：2020-05-07 19:26

【摘要】：目的:通过建立DCP小鼠模型,观察缩泉丸对DCP模型小鼠排尿情况、糖代谢水平及膀胱结构与功能的影响,并运用现代分子生物学技术研究其对DCP小鼠膀胱组织中CHRM3、β3-AR、TRPV1 mRNA 以及 SP、NK1R、P2X2、P2X3 表达的影响,共同探讨缩泉丸对糖尿病膀胱病变的作用及其机制。方法:1构建DCP模型,观察缩泉丸对其排尿情况及糖代谢水平的影响。SPF级雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常组(n=8)及造模组。试验期间,正常组喂养普通饲料,造模组采用高脂饲料喂养。饲养4周后,造模组按200mg/kg剂量腹腔注射2%的STZ溶液。注射STZ三天后,FBG达189 mg/dL视造模成功,将造模成功小鼠随机分为模型组,阳性组(甲钴胺片),缩泉丸高、低剂量组,每组8只。注射STZ第9周开始,分别灌胃给药4周,给药期间对各组动物体重、饮食、排尿、血糖进行监测,末次给药前后进行口服葡萄糖耐量试验,腹主动脉取血测定血清中糖化血清蛋白及胰岛素含量,观察缩泉丸的影响。2观察缩泉丸对DCP小鼠膀胱结构与功能的影响末次给药后使用尿动力学检测仪观察缩泉丸对DCP小鼠膀胱功能的影响;无菌分离膀胱,运用Powerlab生理机能放大系统研究缩泉丸对膀胱肌条对α,β-meATP、Carbachol、Capsaicin、KCl诱发的逼尿肌条舒缩反应的影响;将膀胱组织浸入4%多聚甲醛溶液,进行HE染色及MASSON染色,观察缩泉丸对DCP小鼠膀胱组织病理形态学的影响。3研究缩泉丸对DCP小鼠相关神经受体及神经递质的影响利用RT-PCR及免疫荧光技术,研究缩泉丸对DCP小鼠膀胱组织中CHRM3、β3-AR、TRPV1mRNA以及SP、NK1R、P2X2、P2X3表达的影响,阐释缩泉丸治疗糖尿病膀胱病变的作用机制。结果:1各组动物排尿情况及糖代谢水平监测结果DCP模型小鼠体重明显减轻;饮水量、摄食量、排尿量均显著增多;血糖水平以及血清中GSP和胰岛素含量显著上升。缩泉丸对DCP小鼠干预后,体重、饮水量、摄食量以及血清中GSP及胰岛素含量无明显变化,高剂量缩泉丸能明显减少DCP小鼠排尿量。2各组动物膀胱结构与功能观测结果尿动力学监测结果表明,DCP模型小鼠漏尿点压、膀胱最大压、排尿效率均显著降低,排尿量、膀胱容量、膀胱顺应性及残余尿量明显升高;缩泉丸可以上调DCP小鼠膀胱压力与排尿效率,减少排尿量和残余尿量,降低膀胱容量及膀胱顺应性。膀胱离体肌条实验结果显示,DCP模型小鼠膀胱肌条对α,β-meATP、Carbachol、Capsaicin与KC1的收缩反应均显著下降,且Capsaicin刺激后ATP释放量明显减少;缩泉丸高低剂量均可以增强DCP小鼠膀胱肌条对α,β-me ATP、Carbachol与Capsaicin的收缩反应强度,并能增加膀胱肌条受Capsaicin刺激所释放ATP量。缩泉丸高剂量还能增强DCP小鼠膀胱肌条对KC1的收缩反应强度,缩泉丸低剂量对KC1的收缩反应强度无明显影响。膀胱组织病理形态学观察发现,DCP小鼠膀胱壁厚及胶原密度明显下降,并出现肌束排列紊乱,肌细胞肥大,胶原蛋白及弹性蛋白松散等状况,经缩泉丸干预后,膀胱组织病理形态学得到明显改善。3各组动物相关神经受体及神经递质表达情况RT-PCR及免疫荧光实验结果表明,DCP模型小鼠膀胱组织中CHRM3、TRPV1 mRNA及SP、NK1R、P2X2、P2X3表达水平均明显下降;缩泉丸能够显著升高DCP小鼠膀胱组织中CHRM3、TRPV1mRNA及SP、NK1R、P2X2、P2X3表达水平;各组动物β3-AR mRNA表达水平未出现显著性差异。结论:缩泉丸可以通过肌源性和神经源性两大方面改善DCP小鼠膀胱功能。其机制可能是:缩泉丸通过升高膀胱组织中CHRM3、TRPV1、NK1R及P2X3受体的表达,以及促进相关神经递质(如ATP、SP)的释放,从而改善DCP小鼠膀胱失约及逼尿肌收缩无力等症状,
【图文】：

图２缩泉丸对ＤＣＰ小鼠ＯＧＴＴ的影响逡逑缩泉丸对ＤＣＰ小鼠口服糖耐量ＡＡＵＣ0－２ｈ邋（ｍｇ＊ｈｒ／ｄｌ）的影响（７±邋ｓ邋，，Ｔａｂｌｅ邋６邋Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ邋ｏｆ邋ＳｕｏＱｕａｎ邋Ｗａｎ邋ｏｎ邋ｔｈｅ邋ｇｌｕｃｏｓｅ邋ＡＡＵＣ0－２ｈ邋ｏｆ邋ＤＣＰ邋ｍｉ（ｘ邋±邋ｓ，ｎ＝８）逡逑

图３缩泉丸对ＤＣＰ小鼠ＡＡＵＣｔｗｈ的影响逡逑２缩泉丸对ＤＣＰ小鼠糖代谢水平的影响逡逑
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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