基于“以广南者为佳”的广西铁皮石斛之实证研究
发布时间：2020-06-06 13:05
【摘要】：具有官修性质的北宋《本草图经》记载石斛“以广南者为佳”,本研究在课题组前期研究基础上,对“以广南者为佳”中石斛在“广南”产区的历史分布进行大量地方志及本草考证、实地考察,并进一步运用色谱分析、活性筛选、转录组等现代技术来实证广西铁皮石斛品质,阐明古人认为石斛“以广南者为佳”的缘由。目的:对石斛“以广南者为佳”的历史进行考证,阐明北宋时期“广南”是指何处,且所指为哪种石斛。进而对广西不同产地铁皮石斛样品的品质进行评价,比较其差异,同时建立其黄酮类成分HPLC特征图谱研究,并与广东丹霞种、福建丹霞种、云南种、浙江种铁皮石斛黄酮特征指纹图谱进行比较,鉴定广西种铁皮石斛特异性成分,为广西铁皮石斛资源的开发应用提供实验依据。在此基础上探讨广西铁皮石斛多糖抗肿瘤、抗氧化活性,重点讨论多糖分子量对抗肿瘤活性的影响,以期初探铁皮石斛多糖具有抗肿瘤高活性的分子量范围。最后利用转录组分析多糖相关合称的基因。方法:1.通过对史料、主流本草及地方志对“广南”石斛历史分布进行考证,并实地考察。2.采用HPLC方法对广西不同产地铁皮石斛样品的甘露糖与葡萄糖峰面积比、甘露糖含量、多糖含量进行比较。3.采用HPLC特征图谱技术,建立广西不同产地铁皮石斛黄酮类成分HPLC特征图谱分析方法,采用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)进行相似度分析。4.采用HPLC-MS方法鉴定广西不同产地铁皮石斛黄酮特征性成分。5.采用Fe2+-Vc-H2O2体系氧化法制备不同分子量铁皮石斛多糖片段。6.测定对人肺癌A549、PC9、人肝癌HepG-2、人结肠癌HT-29、人宫颈癌Hela、人胃癌SGC7901等肿瘤细胞增殖的抑制作用,流式测定对Hela细胞凋亡率的影响,荧光定量PCR测定对Hela细胞Bax、Bcl-2 mRNA表达量的影响,在细胞水平开展铁皮石斛不同分子量(652.29～11.10kDa)多糖抗肿瘤活性研究。体外清除自由基的方法研究铁皮石斛不同分子量多糖抗氧化活性的差异。7.转录组学分析广西桂平白石山种源铁皮石斛多糖合成相关基因。结果:1.《本草图经》中“广南”即为广南东路、广南西路暨当今广东、广西。①广西石斛历史分布主要分布于广西的东南部(容县、桂平、梧州、贺州等地)、东北部(桂林)、西北部(百色靖西、凌云县、德保,崇左、河池等地),其中容县“都峤山”、桂平“白石山”者为佳。②南北朝时期韶关已经盛产石斛,至唐代,石斛的产地扩大至广东省多地。在唐代和宋代,广州、韶关、泷州(罗定市)、春州、勤州(阳春市)石斛作为贡品上贡,说明了该地的石斛质量上乘。地方志记载广东石斛主要分布于西北部的清远市的阳山县、连山县,河源市连平县,肇庆市开建县;北部到东北部的韶关市始兴县、乐昌县、乳源县、南雄县,梅州市、英德市;东部到东南部的潮州市、汕尾市、东莞市。③本草考证、实地考察确认了生长于始兴天柱\铩⑷菹囟坚缴健⒐鹌桨资绞现柿考训氖な，
本文编号：2699719
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