云南产红花蜂花粉多糖组分PBPCⅡ抗肿瘤活性及机制研究

发布时间：2020-09-15 15:34

　　红花为菊科红花属植物红花的干燥花,具有活血通经、逐瘀止痛之功效,是一种药食两用的植物资源。蜂花粉系蜜蜂从蜜源植物花药中采集的生殖细胞,经其特殊加工后形成的淡黄色团状物。多糖作为蜂花粉中有效的活性成分,具有调节免疫、抗氧化、抗炎、抗病毒等多种生物学活性。这些生物学活性与抗肿瘤作用有密切关系。本课题组前期实验研究已发现红花蜂花粉多糖的均一组分PBPCⅡ具有显著的体外抗肿瘤活性,但PBPCⅡ是否具有体内抗肿瘤作用及作用机制研究尚不清楚,有必要进行进一步的探索研究。目的:观察云南产红花蜂花粉多糖组分PBPCⅡ对S180荷瘤小鼠的肿瘤抑制作用,并在细胞与分子水平上研究其抗肿瘤作用机制。方法:取雌性昆明种小白鼠60只,体质量18-22 g。采用瘤块接种法,除空白对照组外,其余小鼠于右腋下接种S180肉瘤瘤块建立实体肿瘤模型,随机分为模型组、环磷酰胺(CTX)组(30 mg/kg)和PBPCⅡ低、中、高剂量组(100、200、400 mg/kg),每组10只。连续给药14 d。末次给药后,禁食不禁水24 h,称体质量,采血后,断颈处死小鼠,剖取肿瘤块及胸腺、脾脏各组织并称质量,分别计算抑瘤率和免疫器官指数。通过ELISA法检测小鼠血清IL-1α、IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α、VEGF的水平,RT-qPCR实验检测肿瘤组织bax、bcl-2、c-myc、p53相关基因mRNA表达水平变化,Western Blot实验检测肿瘤组织Bax、Bcl-2、C-myc、P53相关基因蛋白的表达水平,HE染色观察S180荷瘤小鼠肿瘤组织的病理组织学变化。结果:PBPCⅡ低、中、高剂量组均有一定的抑制肿瘤生长作用,抑瘤率分别为37.44%,42.55%,54.01%,并能升高小鼠胸腺指数、脾脏指数。ELISA结果显示,与肿瘤模型组比较,PBPCⅡ可提高荷瘤小鼠血清中IL-1α、IL-2、IFN-γ、TNF-α的水平,降低血清IL-6、VEGF水平。RT-qPCR结果显示,与肿瘤模型组相比,PBPCⅡ能明显促进bax、p53 mRNA表达,降低bcl-2、c-myc mRNA的表达量。Western Blot结果显示,与肿瘤模型组相比,PBPCⅡ能明显促进Bax、P53蛋白表达,降低Bcl-2、C-myc蛋白表达量。HE染色结果显示,与肿瘤模型组相比较,PBPCⅡ组肿瘤细胞表现出细胞凋亡、坏死的形态学改变。结论:PBPCⅡ能够明显抑制S180肉瘤小鼠肿瘤的生长,具有较好的抗肿瘤作用。调节机体免疫功能、诱导肿瘤细胞凋亡可能是其发挥抗肿瘤作用的途径之一。
【学位单位】：大理大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

对比图,小鼠,体质量,对比图

图 1 末次给药后肿瘤模型组与高剂量组小鼠对比图3.2 PBPCII 对 S180 荷瘤小鼠体质量的影响结果见表 7。结果表明，给药前各组小鼠体质量差异无统计学意义（P＞0.05）；给药后 PBPC 各剂量组与 CTX 组比较，体质量显著增加（P＜0.05）；与肿瘤模型

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图 2 PBPCII 对 S180 荷瘤小鼠实体瘤的抑制作用（注：Low 100 mg/kg；Middle 200 mg/kg；High 400 mg/kg；CTX 30 mg/kg ）3.4 PBPCII 对 S180 荷瘤小鼠血清细胞因子水平的影响结果见表 9、表 10。结果表明，与肿瘤模型组相较，PBPCII 各剂量组的 IL-1

肉瘤,S180荷瘤小鼠,bax基因,荷瘤小鼠

图 3 PBPCII 对 S180 荷瘤小鼠肉瘤组织 bax 基因 mRNA 表达的影响（注：与肿瘤模型组：*P＜0.05；与 CTX 组：#P＜0.05）II 对 S180 荷瘤小鼠肉瘤组织 bcl-2 基因 mRNA 表达水平的图 4。

【参考文献】