闽北三叶青中芦丁含量的测定及其指纹图谱分析

发布时间：2020-09-16 15:15

　　 药用植物有效成分的积累受到基因型和环境等因素的双重调控。本研究选定闽北地区不同产地的三叶青为研究对象,以芦丁作为黄酮活性成分的评价指标,分析了闽北8个不同产区三叶青芦丁含量,并建立了闽北地区间三叶青的指纹图谱。论文通过甲醇浓度、超声功率、提取时间和料液比四个单因素试验,确定了最优芦丁提取条件,利用HPLC法测定三叶青中芦丁的含量,并研究了多种因素对芦丁测定的影响。采用不同萃取剂、色谱柱、萃取方式分析建立了福建省闽北地区三叶青的HPLC指纹图谱分析方法。为闽北地区间不同产地三叶青中芦丁含量检测和三叶青指纹图谱的制定提供前期的实验依据。主要研究结果如下:1、建立了提取三叶青中芦丁的工艺条件。实验结果表明:超声波提取时间为20 min、甲醇浓度为60%、料液比为1:50 g/mL、超声提取功率为324 W,为本试验三叶青中芦丁的提取最佳工艺条件。采用高效液相色谱法进行三叶青芦丁含量的测定,其色谱条件为:安捷伦Allsphere ODS-2(250×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈:0.1%磷酸水溶液(16:84);波长360 nm;柱温40℃;流速1 mL/min;进样量10μL。芦丁浓度在5μg/mL到100μg/mL范围内时,峰面积(у)与芦丁浓度(х)的回归方程为Y=16.0853×X-19.0162,R=0.9992;三叶青样品加标回收率为95.00%-99.56%,平均加标回收率为98.30%,RSD=1.53%(n=6)。结果表明,不同产地的三叶青中芦丁含量为0.36-3.28 mg/g,闽北地区8个产地三叶青中芦丁含量依次为:松溪县花桥镇邵武市金杭镇武夷山市上梅乡光泽县司前镇政和县外屯镇顺昌县洋口镇蒲城县富岭镇邵武市南武夷药博园。2、利用高效液相色谱仪对三叶青样品进行指标性成分检测分析,构建了高效液相色谱指纹图谱方法。实验结果表明:采用甲醇40 mL,提取时间为20min,超声功率为324 W进行超声波提取三叶青中有效成分。利用高效液相色谱仪进行分离各个组分,色谱条件为:Agilent 5 TC-C18(2)(150×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.1%磷酸-乙腈为流动相,360 nm波长检测芦丁,1 mL/min流量,40℃柱箱温度。三叶青的指纹图谱分析表明:8批不同产地的三叶青指纹图谱的相似度在0.815-0.926之间,表明闽北三叶青药材的指纹图谱相似度良好,可以为闽北产区的三叶青种质鉴定和质量控制标准的制定提供一定的依据。
【学位单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R284

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本文编号：2820013