黄檗不同部位体外抗氧化活性研究

发布时间：2020-10-01 19:03

　　 黄檗是一种集药用、经济用材、改善环境等于一身的多年生木本植物。其内皮加工炮制成的中药材黄柏更是不可或缺的一味良药,具有抗菌、清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮、黄疸等多重功效。也有一些研究表明黄檗提取物具有抗氧化功效,但对于具体不同部位的不同提取层抗氧化效果比较未见详细报道。随着经济条件的改善、生活品质的提高,养生保健越来越受到人们的重视,抗氧化剂的种类也随之层出不穷。人工合成的抗氧化剂经济高效,但有损健康的负面新闻也屡见报道,天然抗氧化剂越来越受到人们的青睐。为进一步合理开发利用黄檗资源的抗氧化功能,本试验进行了黄檗种子、叶子、皮不同提取层抗氧化效果比较。本论文选取黄檗作为研究对象,以自由基清除能力作为体外抗氧化能力大小的评价标准,筛选粗分离了黄檗种子、叶子、皮的抗氧化物质,以期将黄檗抗氧化活性的研究成果应用到天然抗氧化剂、衰老的延缓、疾病的防治等药物研发上。本研究主要成果如下:1、采用超声辅助提取技术,用乙醇水溶液对黄檗种子进行了浸提,对提取次数、浸提液乙醇浓度、浸提料液比、浸提温度、超声时间等条件对黄檗抗氧化活性物质提取的影响,进行考察,采用了 4因素3水平的正交试验法对黄檗进行最优化提取工艺的测定,得出的最佳浸提工艺条件为:浸提次数两次、乙醇浓度为70%、浸提料液比为1:25 g/mL、浸提温度为40℃C、超声时间为2h。2、对黄檗种子、叶子、皮的粗提取物,即水提物与醇提物进行测定,结果表明水提物与醇提物均具有一定的抗氧化能力,而且是醇提物的抗氧化能力强于水提物。3、利用不同有机溶剂极性不同原理,依次用有机溶剂石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对黄檗的粗提物进行液—液萃取分离,分别得到石油醚萃取相、乙酸乙酯萃取相、正丁醇萃取相及水相。结合体外抗氧化实验(清除DPPH自由基的能力、清除羟基自由基的能力、FRAP法测定、清除ABTS自由基的能力)分析,结果表明各个萃取层均具有一定的抗氧化能力,综合比较:乙酸乙酯相的清除能力强于正丁醇相、强于水相,石油醚相清除自由基能力最弱。
【学位单位】：东北林业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285;R284
【部分图文】：

图３－３黄檗皮醇提各相提取物对ＤＰＰＨ的清除能力逡逑Ｆｉｇ．邋３－３邋ｔｈｅ邋ｒｅｍｏｖａｌ邋ａｂｉｌｉｔｙ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｏｆ邋ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｏｎ邋ＤＰＰＨ．逡逑黄檗皮醇提物各相提取物对ＤＰＰＨ自由基的清除活性结果见图３－３，其中在低浓度逡逑条件下，石油醚相清除效果最弱，与其他提取相呈显著量效关系。随着溶剂浓度的增逡逑大，石油醚相对ＤＰＰＨ自由基的清除能力增加，且增加效果显著；而乙酸乙酯相、正丁逡逑醇相和水相虽有增加趋势，但在０．５？２．０邋ｍｇ／ｍＬ浓度范围内增大趋于缓慢。黄檗皮醇提逡逑物不同提取相抗氧化活性大小：乙酸乙酯相＞邋正丁醇相＞邋水相邋＞邋石油醚相。逡逑３．４．１．２羟自由基ＯＯＨ）清除能力的测定逡逑１、黄檗皮水提物的各不同极性萃取相清除作用逡逑３０邋＇逦■＾石油醚相逡逑ｔ邋２５邋＾邋ｆ乙酸乙酯相逦？逡逑Ｓ．逡逑Ｓ逦正丁醇相逡逑－）0邋＿逡逑Ｉ逦—一邋水相逡逑１邋５－逡逑０邋逦！逦；逦；逦逡逑０．２５逦０．５逦１逦２逡逑浓度（ｍｇ／ｍＬ）邋／Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ逡逑图３－４黄檗皮水提物各萃取层清除羟自由基能力逡逑Ｆｉｇ．邋３－４邋ｒｅｍｏｖａｌ邋ｏｆ邋ｈｙｄｒｏｘｙｌ邋ｒａｄｉｃａｌｓ邋ｉｎ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ邋ｌａｙｅｒ邋ｏｆ邋ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ邋ｗａｔｅｒ邋ｅｘｔｒａｃｔ．逡逑由图３－４可知，在实验所选的浓度范围内，黄檗皮水提物各相萃取层对ＯＨ自由基逡逑？１１－逡逑

邋２逡逑浓度（ｍｇ／ｍＬ）邋／Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ逡逑图３－９黄檗叶醇提各相提取物对ＤＰＰＨ的清除能力逡逑Ｆｉｇ．邋３－９邋ｔｈｅ邋ｒｅｍｏｖａｌ邋ａｂｉｌｉｔｙ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔｓ邋ｏｆ邋ｂｅｒｂｅｒｉｓ邋ｆｒｏｍ邋ｅａｃｈ邋ｐｈａｓｅ邋ｏｆ邋ＤＰＰＨ逡逑从图３－９中数据可以看出，黄檗叶醇提物４个不同萃取相对ＤＰＰＨ均有清除能力，逡逑且呈显著量效关系。不同萃取相的清除ＤＰＰＨ自由基能力存在差异，同种萃取相随着浓逡逑度的增大抗氧化能力有所提升，相同浓度下石油醚对ＤＰＰＨ的清除率最小，其次是水提逡逑取物，正丁醇提取物，乙酸乙酯提取物清除率最大。在浓度为１．０邋ｍｇ／ｍＬ时，石油醚、逡逑乙酸乙酯、正丁醇和水相提取物对ＤＰＰＨ的清除率分别是６５．１％、８１．３１％、７６．５９％和逡逑７０．２６％，且差异不显著（ｐ＞０．０５）。ＩＣ５０值（清除率达到５０％时的相应浓度）也与清除逡逑率相一致，石油醚提取物最大，乙酸乙酯提取物的最小。４个溶液提取物的ＩＣ５０值分别逡逑为邋０．８０邋ｍｇ／ｍＬ、０．１１邋ｍｇ／ｍＬ、０．１４邋ｍｇ／ｍＬ邋和邋０．３８邋ｍｇ／ｍＬ0逡逑３．４．２．２羟自由基ＯＯＨ）清除能力的测定逡逑１、黄檗叶水提物的各不同极性萃取相清除作用逡逑５０邋－逡逑？ｆ邋４５邋－逦＋石油醚相逦７逡逑｜４０＿逦一乙酸乙酯相逡逑＆邋３５－逦＋正丁醇相逡逑＇｜３０邋＂逦一ｘ—水相逦，逡逑ｌｒ逡逑0逦°＝￣＂．．．；逦…逦：逦

邋２逡逑浓度（ｍｇ／ｍＬ）邋／Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ逡逑图３－１３黄檗叶醇提取物各萃取层对ＡＢＴＳ＋？自由基清除作用逡逑Ｆｉｇ邋３－１３邋ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔｓ邋ｏｆ邋ｂｅｒｂｅｒｉｓ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｆｒｏｍ邋ｔｈｅ邋ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ邋ｌａｙｅｒ邋ｏｆ邋ＡＢＴＳ＋＊邋ｆｒｅｅ逡逑ｒａｄｉｃａｌ邋ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ逡逑从图３－１３中可以看出，黄檗叶各相提取物对ＡＢＴＳ＋？均表现出不同程度的清除能逡逑力，并且都具有明显的剂量关系。在浓度较低的情况下，各相提取对ＡＢＴＳ＋？的清除逡逑能力相对较低，并且差异不显著（ｐ＜０．０５）。随着浓度升高，逐渐表现差异性，在浓度逡逑为２．０邋ｍｇ／ｍＬ时，乙酸乙酯相与正丁醇相对ＡＢＴＳ＋？的清除能力最好，其次为水相提逡逑取物，石油醚的清除率最小，并且表现出显著性差异（ｐ＜０．０５）。在浓度为１．０邋ｍｇ／ｍＬ逡逑时

【参考文献】

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本文编号：2831877