朝鲜蓟醇提取物的分离、纯化及结构鉴定

发布时间：2020-10-10 05:12

　　朝鲜蓟(Cynara scolumus L.)是菊科菜蓟属植物,民间将其提取物作为药用,具有促进消化、保肝、利胆、抗癌、抗HIV、抗炎、抑菌、抑制胆固醇生物合成等功能作用,研究表明其功能成分为黄酮类、多酚类、萜类及其倍半萜类化合物(尤其是愈创木烷类倍半萜及其内酯)等。朝鲜蓟的功能成分与品种有关,因此,本文以洛尔卡(Lorca)朝鲜蓟为原材料,研究其功能成分的分离、纯化及对制备获得的纯组分进行了结构鉴定,具体方法及结论如下:(1)方法:朝鲜蓟花苞粉末用70%乙醇溶液浸提72h,料液比为l:10(m/v)。将粗提物用AB-8型大孔树脂进行分离,以不同浓度的乙醇溶液为洗脱剂进行梯度洗脱。对洗脱得到的一个流分A27-29用RP-C18柱层析纯化,将纯化后的组分进行高效液相色谱检测及制备。结论:经纯化、制备后,共获得12个纯组分,具体为:C16-19组分经分离制备获得H-01和H-02;C11-15组分经分离制备获得H-03、H-04和H-05;C5-10组分经分离制备获得H-06、H-07、H-08、H-09和H-11;C25-29组分、Fr.2组分(C25-29组分和A35-36组分合并)经分离制备获得H-10和H-12。经紫外、高效液相和液质检测,化合物中的H-01、H-05、H-09为同种物质。(2)方法:结合LC-QTOF-MS和NMR(1H-NMR、13C-NMR、H-H COSY、HMBC、HSQC)对符合条件的的8个纯组分进行了结构鉴定。结论:经过解析,并结合文献数据确定了8个化合物的结构,分别为:木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(化合物2),cynaratriol(化合物3),grosheimol(化合物4和8),木犀草素7-O-α-L-鼠李糖(1-6)-β-D-葡萄糖苷(化合物5),cynarininB(化合物6),azuleno[4,5-b]furan-2(3H)-one,3-(chloromethyl)decahydro-3,8-dihydroxy-9-methyl-6-methylene-,(3S,3aR,6aR,8S,9S,9aR,9bR)(化合物7a),isolipidiol(化合物7b),菜蓟苦素(化合物10)。其中,2个为黄酮类化合物,6个为愈创木烷类倍半萜内酯(H-07为H-07a和H-07b的混合物),且H-07a为新化合物。
【学位单位】：中南林业科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R284
【部分图文】：

制备流程,化合物,林业科技,硕士学位论文

图１化合物制备流程图逡逑Ｆｉｇ．邋１邋Ｃｈａｒｔ邋ｏｆ邋ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ邋ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ逡逑１３逡逑

半制备,组分,进样量,洗脱程序

，Ｃ１６－１９。逡逑为了不浪费样品且缩短制备时间，还需要确定进样量。对于Ｃ１６－１９样品溶逡逑进样量，选取了邋３０ｕＬ和５０ｕＬ进行分析，最终优选５０ｕＬ的进样量用于逡逑－１９组分的半制备。综上所述，Ｃ１６－１９组分的半制备条件为：色谱柱为Ｖｅｎｕｓｉｌ逡逑Ｃ１８（１０ｍｍｘ２５０ｍｍ，５ｐｍ）；检测波长为邋２０５ｎｍ；流速为邋３ｍＬ／ｍｉｎ；进样量逡逑０ｕＬ；流动相Ａ为乙腈，流动相Ｂ为０．１％甲酸水；洗脱程序如表５所示，逡逑制备液相色谱图见图３。逡逑表５邋ＨＰＬＣ洗脱程序逡逑逦Ｔａｂｌｅ邋５邋Ｅｌｕｔｉｏｎ邋ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ邋ｏｆ邋ＨＰＬＣ逦逡逑时间（ｍｉｎ）逦Ａ（％）逦Ｂ（°／0）逡逑１逦初始逦２３．００逦７７．００逡逑２逦４０．００逦２３．００逦７７．００逡逑３逦４５．００逦１００．００逦０．００逡逑４逦５５．００逦１００．００逦０．００逡逑衫邋３５１逦Ｉ邋ｎ逡逑，

分析图,组分,色谱峰,半制备

Ｆｉｇ．５邋Ｓｅｍｉ－ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ邋ＨＰＬＣ邋ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ邋ｏｆ邋Ｃｌ邋１－１５逡逑在半制备条件下，考虑对每个峰都进行接收制备，依次记为Ｃ１１－１５（Ｉ）、逡逑１１－１５（ＩＩ）、Ｃ１１－１５（ＩＩＩ）．．．．．，共１１个峰，然后浓缩、冷冻干燥、称重，并测纯逡逑。其中，Ｃ１６－１９（ＸＩ）号色谱峰经制备得到Ｈ－０３，其纯度测定结果见２．２Ａ３；逡逑Ｃ１１－１５（ＶＩ）号色谱峰的量较多，但纯度较低，需要再次进行ＨＰＬＣ分析与半逡逑备。逡逑ＩＩ逡逑１．６邋－逡逑！１逡逑，２：逡逑０．８邋－邋，逡逑０４邋－逦＾逡逑逦Ｕ邋＼逦逡逑0？0－！逦逦逦１逦逦逦１逦＞逦１逦逦逦１逡逑５逦１０逦１５逦２０逦２５逡逑时间／分钟逡逑Ｔｉｍｅ＊邋ｔｎｉｎ逡逑图６邋Ｃｌ邋Ｍ５（ＶＩ）的ＨＰＬＣ分析图逡逑Ｆｉｇ．６邋Ｔｈｅ邋Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍ邋ｏｆ邋Ｃｌ邋１－１５（ＶＩ）逡逑

【参考文献】