景虎通脉方及红景天苷介导巨噬细胞极化抗动脉粥样硬化的研究

发布时间：2020-10-13 03:39

　　 目的:本课题从巨噬细胞极化和泡沫化入手,从分子水平探讨景虎通脉方(原“活血通脉方”)及红景天苷防治动脉粥样硬化可能的作用靶点和机制,从而为中医药方向治疗动脉粥样硬化病变提供有力的理论依据。方法:成年清洁雄性SD大鼠10只,体重(300±50)g,6-8周龄。以临床等效剂量8倍的景虎通脉方灌胃制备景虎通脉方含药血清,并对含药血清中的中药活性成份进行检测。检测ox-ldl、景虎通脉方含药血清及红景天苷对细胞活力的影响;将RAW264.7细胞分组后予以不同浓度的景虎通脉方含药血清及红景天苷处理,收集细胞上清液及细胞,Griss法测定细胞上清中NO水平;ELISA法检测上清液中M1型细胞因子IL-6、TNF-α及IL-1β的表达;油红染色检测细胞内脂质沉积情况;流式细胞术检测巨噬细胞CD36、CD204水平。结果:(1)Griess法测定NO水平:与正常对照组比较,模型组细胞NO含量明显增高,具有显著的统计学差异。而与模型组相比,景虎通脉方含药血清及红景天苷各浓度组均不同程度的减少了NO的水平。(2)油红染色检测细胞内脂质沉积:与正常对照组相比,模型组中细胞胞质内脂质沉积明显,且着色强。而景虎通脉方含药血清组及红景天苷各浓度组较模型对照组比较,胞内红色脂质均不同程度减少。(2)ELISA检测IL-6、TNF-α及IL-1β的表达:与正常对照组比较,模型组中IL-6、TNF-α、IL-1β含量显著升高,与模型组比较,景虎通脉方含药血清1%组及红景天苷各浓度组的IL-6水平均有不同程度的降低;景虎通脉方含药血清2%、0.5%浓度组及红景天苷各浓度组TNF-α表达水平均呈不同程度的抑制;景虎通脉方含药血清及红景天苷各浓度组均明显抑制了IL-1β的分泌。(3)流式细胞术检测CD36、CD204水平:CD36各组之间差异无统计学意义,但药物干预后,景虎通脉方含药血清及红景天苷各浓度阳性率均低于模型组的阳性细胞率。与正常对照组相比,模型组的CD204阳性率比例为22.9%;与模型组相比,景虎通脉方含药血清1%浓度组和红景天苷各浓度组阳性率均低于模型组,差异具有统计学意义。结论:在体外细胞培养过程中,景虎通脉方含药血清及红景天苷可以减少巨噬细胞内脂质的沉积,抑制泡沫细胞的形成;通过抑制炎性介质NO,M1型细胞因子IL-6、TNF-α及IL-1β的分泌,抑制巨噬细胞向M1型极化;且可能是通过抑制CD204的表达来减少泡沫细胞的形成,从而延缓动脉粥样硬化的发生和发展。
【学位单位】：云南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
中英文缩略词对照表
前言
材料和方法
    1、实验细胞
    2、实验动物
    3、药物制备
    4、仪器与试剂
    5、实验方法与步骤
    6、统计学方法
    7、技术路线
实验结果
    1、景虎通脉方含药血清质控
    2、氧化低密度脂蛋白对RAW264.7细胞活力的影响
    3、景虎通脉方含药血清及红景天苷对RAW264.7细胞活力的影响
    4、景虎通脉方含药血清及红景天苷对ox-ldl诱导的RAW264.7 细胞泡沫化的影响
    5、景虎通脉方含药血清及红景天苷对NO含量的影响
    6、景虎通脉方含药血清及红景天苷对RAW264.7 细胞IL-6、TNF-α、IL-1β表达的影响
    7、景虎通脉方含药血清及红景天苷对RAW264.7 细胞CD36、CD204水平的影响
讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢

【参考文献】

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本文编号：2838685