黄连膏提取工艺优化及其体外抗炎活性

发布时间：2020-10-16 08:35

　　 目的优化黄连膏提取工艺,并评价其体外抗炎活性。方法以药材粒度、煎炸时间、煎炸温度、浸泡时间为影响因素,姜黄素总量为评价指标,正交试验优化提取工艺。检测黄连膏提取油(0.05、0.5、1μL/mL)对Hacat细胞中TARC、MDC、RANTES、IL-8水平的抑制作用。结果最佳工艺为饮片不浸泡而直接投入5倍量香油中,200℃下煎炸4 h,姜黄素总量为1.198 g。黄连膏提取油降低了TARC、MDC、RANTES、IL-8水平,并呈剂量依赖性(P0.05,P0.01)。结论该方法稳定可行,可用于提取体外抗炎活性较强的黄连膏。
【部分图文】：

图6显示,TNF-α、IFN-γ处理后IL-8水平高于空白对照组(P<0.05),而0.05、0.5、1 μL/mL黄连膏提取油对其水平有较强的抑制作用(P<0.01)。3 讨论

采用重复测量设计的方差分析,发现不同造模浓度TNF-α、IFN-γ对HaCat细胞存活率影响的差异有统计学意义(P<0.05),并随着造模浓度升高而逐渐降低(P<0.05)。图1显示,当造模浓度为20 ng/mL时,细胞存活率为50%,即为LD50。2.3.2 细胞毒性试验

0.25% EDTA-胰蛋白酶消化HaCat细胞后,MEM完全培养基吹打稀释成浓度为4×104/mL的细胞悬液,以每孔100 μL的体积加到96孔板中,置于5%CO2、37 ℃恒温培养箱中培养。细胞贴壁后弃去完全培养基,加入空白培养基饥饿培养6 h,再加入含0.05、0.5、1、2 μL/mL黄连膏提取油的MEM空白培养基各100 μL,以MEM空白培养基为空白对照组[14],每组平行设置6个副孔,作用24 h后每孔加入5 mg/mL MTT溶液20 μL,继续培养4 h,弃去原培养液,加入150 μL DMSO溶解,振荡3 min使结晶物充分溶解,在490 nm波长处检测吸光度(OD),计算细胞存活率,结果见图2。由此可知,提取油浓度为2 μL/mL时对细胞生长有抑制作用(P<0.01),存活率为77%,而在0.05～1 μL/mL时无细胞毒性,故最终选择0.05、0.5、1 μL/mL作为实验浓度。2.3.3 TARC、MDC、RANTES、IL-8水平检测
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本文编号：2843025