黄芩的敞开式质谱快速分析

发布时间：2020-10-20 13:01

　　 黄芩是唇形科黄芩属多年生草本植物,以根入药,属常用大宗中药材;有清热燥湿、泻火解毒的功效,常用于湿热病、上呼吸道感染等的治疗。因其分布广、栽种年限不同(枯芩、条芩)及炮制不规范(酒炒、炒炭),常导致药材和饮片的质量参差不齐。为保证黄芩的用药安全性和准确性,药材的质量控制就显得尤为重要。目前采用液相色谱(HPLC)指纹图谱进行化学成分比较及指标性成分定量的方法来评价药材质量;但HPLC耗时长,溶剂消耗大,对于大批量样品分析对通量有限。敞开式质谱(Ambient mass spectrometry,AMS)是一种操作简单、分析速度快的新型质谱技术,已被广泛应用于中草药质量控制。纸喷雾质谱(Paper-spray mass spectrometry,PS-MS)就是其中一种,具有实时监测、简便快速的性能,有望成为一种快速、可靠、实时分析的中药质量控制方法。目前,PS-MS用于中药材质量控制的研究报道还很少,未见用于黄芩分析研究的报道。在本论文中,以黄芩为研究对象,开展相应的研究工作,具体内容为:1、绪论。介绍了黄芩的主要化学成分、药理作用以及建立中药指纹图谱的方法及原则,介绍了纸喷雾质谱的原理及应用,综述了黄芩炮制的方法及炮制的影响。2、基于HPLC法的枯芩和条芩的分析研究。采用HPLC法建立了枯芩和条芩的指纹图谱,通过优化提取溶剂和提取方法得到最优指纹图谱,结合ChemPattern~(TM)化学计量学软件对9批条芩和8批枯芩的指纹图谱进行了分析,结果显示枯芩和条芩的的指纹图谱各具特征,两者之间差异明显。同时,采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)对两者的共有成分进行了确证,结合文献确定了8个黄酮类化学成分。采用气相色谱-质谱法(GC-MS)分析了枯芩和条芩的挥发性成分,结合计算机谱库和CAS号确定了13个化学成分,为开发黄芩的药用资源提供了理论支持。3、敞开式质谱快速鉴别枯芩和条芩。优化了敞开式质谱的影响因素,得到枯芩和条芩的PS-MS图,并用不同的金属盐溶液修饰纸基,利用金属与黄酮类物质的络合效应使质谱图差异增大,结合ChemPattern~(TM)化学计量学软件对两者的质谱图进行分析,结果发现CuCl_2、FeCl_3、CoCl_2修饰的纸基可以成功的鉴别枯芩和条芩,且CuCl_2修饰的纸基稳定性较好,为最佳实验条件。PS-MS法的结果与HPLC法的结果一致,证明采用PS-MS法建立的方法可用于枯芩和条芩的鉴别。4、基于HPLC法、AMS法的黄芩炮制质量控制。探索了酒黄芩的烘制方法,将黄芩用酒闷润24小时后,在85℃,95℃,105℃的烘箱中烘干,通过HPLC法对总黄酮的定量分析得出95℃为最佳炮制温度。通过PS-MS法得出生品与炮制品的质谱轮廓图,利用ChemPattern~(TM)化学计量学软件进行分析,7批生黄芩与酒黄芩明显的分为了两类,建立了快速准确鉴别生品和炮制品的方法。
【学位单位】：湖南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R284;O657.63
【部分图文】：

以常见环保方便的纸为样品载体完成样品的离子化，结合质谱检测析目的。PS-MS 法具有分析速度快、灵敏度高、检出限低的特点，尤价格低廉、容易携带、使用后处理方便环保，受到研究者的青睐，已在展示了应用前景[65]。1.3.2 纸喷雾质谱的原理纸喷雾质谱技术的离子源按 AMS 的离子源电离机理属于类电（Electrospray ionization，ESI）[66]，原理如图 1-1 所示。用一定形状的品载体并用铜夹固定，将液体样品滴加在纸上或是将溶剂滴加在固体样通外接电源进行高压放电，在高压电的作用下，分析物向纸的尖端移动离。样品最终在纸的尖端实现离子化，进入仪器进行检测分析。此方法操耗费小、分析速度快，已成为一种高通量分析的手段。目前，PS-MS安全、生物样品分析、药物分析、植物成分分析等多个领域得到了广泛应

图 2-1 提取溶剂的影响Figure 2-1 Effect of the extraction solvent图 2-2 提取方式的优化Figure 2-2 Optimization of the extraction method和条芩的指纹图谱分析a: Microwave extrab: Refluxing extracc: Ultrasonic extracd: Ultrasonic extrae: Ultrasonic extrac

14图 2-2 提取方式的优化Figure 2-2 Optimization of the extraction method和条芩的指纹图谱分析提取溶剂和提取方式，在最优的条件下得到枯芩和条芩的指）所示。随着年限的增长，猜测可能有部分物质分解为其他，枯芩和条芩所含成分相同，只是成分含量差异较大，故两显成分差异，从图 2-3（a）上可以看见的差异是几个主要峰图 2-3（b）为 8 批枯芩和 9 批条芩的液相指纹图谱，从图中条芩中相同峰的峰高存在差异，这也正是它们含量差异的显似，但成分含量差异导致药效不同，所以临床使用才需要区地发挥作用。
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 赵佳文;李水清;刘艳菊;涂济源;瞿领航;石坤;;基于抗菌活性及病理指标评价子芩与枯芩对肺炎的药效学差异[J];中草药;2018年17期

2 李先端;顾雪竹;程立平;张丽宏;毛淑杰;;黄芩的不同规格及不同部位质量评价[J];中国实验方剂学杂志;2013年19期

3 赵佳文;瞿领航;刘艳菊;李水清;徐依依;肖玲;;多成分含量测定结合UPLC指纹图谱及其模式判别评价子芩与枯芩质量[J];中药材;2017年09期

4 刘萍;古今;周文斌;;RP-HPLC法考察枯芩与子芩不同部位中黄芩苷含量和不同炮制方法的影响[J];中国药物应用与监测;2007年02期

5 谢琴,华晓东,王菊美;不同产地、不同部位黄芩的黄芩甙含量测定[J];上海中医药杂志;2001年03期

6 李松藩;;芍药汤加减治疗痢疾44例[J];福建中医药;1964年04期

7 李先端;程立平;张丽宏;顾雪竹;毛淑杰;;不同等级枯芩条芩有效成分含量比较[J];中国中医药信息杂志;2013年06期

8 魏菲,张红;李时珍创新思想的探讨[J];中医函授通讯;1998年06期

9 赵学思;;浅谈黄芩在宠物临床上的应用[J];中国动物保健;2015年04期

10 芦海生;陈铭阳;刘春生;;枯芩、条芩主要活性成分含量比较[J];中国医院用药评价与分析;2016年12期

相关硕士学位论文 前2条

1 赵文翔;黄芩的敞开式质谱快速分析[D];湖南师范大学;2019年

2 赵佳文;子芩与枯芩化学成分及药效差异研究[D];湖北中医药大学;2019年

本文编号：2848711