益气养血疏肝方对谷氨酸钠损伤的视网膜神经节细胞的保护作用

发布时间：2020-10-21 11:47

　　 目的研究益气养血疏肝方(青盲一号方)抑制谷氨酸钠诱导的视网膜神经节细胞(RGC-5)凋亡的作用及可能机制。方法星孢菌素(STSN)分化体外培养的RGC-5细胞后,L-谷氨酸钠诱导RGC-5细胞损伤模型,分别用2.5%、5%、10%益气养血疏肝方药物血清干预24 h。采用CCK-8检测各组细胞活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Western-blot检测Bcl-2/Bax信号通路相关蛋白的表达水平;RT-PCR检测Bcl-2、Bax基因表达。结果各药物血清组的细胞存活率均高于模型组(P0.05),且5%益气养血疏肝方药物血清组的存活率高于其他药物血清组(P0.05),同时凋亡率最低。与空白对照组比较,模型组Bcl-2蛋白表达下降(P0.05),Caspase-9、Caspase-3蛋白表达增加(P0.05)。与模型组比较,5%益气养血疏肝方药物血清组Bcl-2蛋白表达增加,Caspase-9、Caspase-3蛋白表达下降(P0.05),且5%药物血清组Bcl-2/Bax高于2.5%、10%药物血清组。结论 5%益气养血疏肝方药物血清能够通过调控Bcl-2/Bax信号通路来抑制RGC-5细胞的凋亡。
【部分图文】：

表2 各组RGC-5细胞凋亡信号通路Bcl-2、Bax 基因表达水平比较 ( x ˉ ±s ; n=3)Table 2 mRNA expression of Bcl-2 and Bax in RGC-5 cells of all groups ( x ˉ ±s ; n=3) 组别 Groups Bcl-2 mRNA Bax mRNA 模型组Model group 0.503±0.045 2.690±0.788 空白血清组Blank serum group 1.054±0.033* 0.810±0.404 2.5%益气养血舒肝方药物血清组2.5% QMYH group 0.627±0.058□# 2.194±0.535 5%益气养血舒肝方药物血清组5% QMYH group 1.107±0.323* 1.496±0.248 10%益气养血舒肝方药物血清组10% QMYH group 0.779±0.072□# 1.900±0.448 F 8.915 1.823 P <0.000 1 0.201 注:与模型组比较*P<0.05;与空白血清组比较□P<0.05;与5%益气养血疏肝药物血清组比较#P<0.05。Note: *P<0.05 compared with model group; □P<0.05 compared with blank serum group; #P<0.05 compared with 5% QMYH group.图3 Bcl-2/Bax凋亡信号通路蛋白表达情况

RGC-5于6 h左右完全贴壁。倒置显微镜下观察,可见RGC-5胞体呈不规则多边形,有细长突触向外延展,中央有卵圆形核,胞质突起,生长时呈放射状(图1 A),经0.125 μmol/L的STSN作用1 h即可出现形态改变(图1 B)。3.2 各组细胞存活率比较

Bcl-2/Bax凋亡信号通路蛋白表达情况
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本文编号：2850076