复方当归注射液对叔丁基过氧化氢诱导的EA.hy926细胞氧化损伤的保护作用

发布时间：2020-10-22 07:06

　　 目的:研究复方当归注射液对对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)氧化损伤的保护作用。方法:首先测定DPPH自由基及羟基自由基清除率,初步研究复方当归注射液的体外抗氧化能力;然后体外培养EA.hy926细胞,分为正常组、模型组(t-BHP组)和复方当归注射液处理组(各浓度复方当归注射液+t-BHP组),采用MTT法检测各组细胞活力,试剂盒比色法检测各组乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原性谷胱甘肽(GSH-Px)含量。结果:复方当归注射液清除DPPH及羟基自由基有显著的清除效果,EC_(50)值分别为20.88μL/mL,0.8211μL/mL。对比正常组,t-BHP(600μmol/L)可显著致EA.hy926细胞氧化损伤,经复方当归注射液预处理可显著提高EA.hy926细胞的活性,降低LDH释放量和MDA含量,提高SOD和GSH-Px活力,并呈明确的浓度依赖性。结论:复方当归注射液对t-BHP诱导的EA.hy926细胞氧化损伤具有保护作用。
【部分图文】：

不同浓度的复方当归注射液羟基自由基清除活性如图1B所示，结果表明复方当归注射液对羟基自由基的清除活性随浓度升高而增大，呈现浓度依赖性。应用GraphPad Prism 7.04软件处理复方当归注射液的量-效关系数据并计算其清除羟基自由基的EC50值为0.8211 mL/mL。2.3 复方当归注射液对EA.hy926细胞氧化损伤保护作用

与正常细胞组相比，模型组（t-BHP损伤组）SOD、GSH-Px活力明显下降（P<0.01),MDA、LDH含量明显上升（P<0.01）；与模型组（t-BHP损伤组）相比，复方当归注射液组SOD、GSH-Px活力显著升高（P<0.01),MDA、LDH含量显著下降（P<0.05,P<0.01）。结果见图3。3 讨论

近年来大量研究表明生物体内过量的氧自由基及氧化应激是导致心血管系统心力衰竭、缺血再灌注损伤的重要原因之一[10]。复方当归注射液作为当归、川芎、红花为组分制成的中药复方注射液，临床上常用于心脑血管缺血性疾病的防治[6]，为阐明临床上复方当归注射液的作用机制，本研究以DPPH自由基及羟基自由基清除法并进一步在细胞水平建立氧化应激损伤模型来系统研究复方当归注射液的体外抗氧化性能。DPPH自由基是一种很稳定的以氮为中心的自由基，其可以捕获其他的自由基[11]，对DPPH自由基的清除效果可以反映物质的抗氧化能力。OH自由基能与绝大部分生物大分子物质发生反应，其反应可能导致严重的组织损伤或细胞死亡[12]。因此，及时清除多余的OH自由基对保护机体的正常生命活动和生理代谢反应具有重要作用。本研究结果显示，复方当归注射液能有效地清除DPPH自由基和羟基自由基，具有一定的体外抗氧化活性。
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本文编号：2851274