六味地黄醇提物联合顺铂对人肝癌BEL-7402细胞凋亡和肿瘤血管生成因子的影响

发布时间：2020-10-24 18:33

　　 目的:探讨六味地黄醇提物联合顺铂对人肝癌BEL-7402细胞凋亡及肿瘤血管生成的影响。方法:体外培养BEL-7402细胞,以不同质量浓度的六味地黄醇提物作用于细胞,CCK-8法检测其对细胞生长的影响,选择后续实验浓度。将BEL-7402细胞分为正常对照组、六味地黄醇提物100 mg/ml组、顺铂1 mg/ml组、六味地黄醇提物100 mg/ml+顺铂1 mg/ml组。CCK-8法检测细胞增殖抑制率,细胞成像分析系统观察BEL-7402细胞形态学变化,Hoechst染色法观察细胞凋亡现象,免疫荧光法检测肿瘤血管生成相关因子:血管内皮生长因子(VEGF)、促血管生成素-2(Ang-2)、血小板反应素(TSP)、金属蛋白酶-2组织抑制因子(TIMP-2)蛋白表达水平的影响。结果:六味地黄丸醇提物能呈剂量依赖性地抑制BEL-7402细胞活性,选择100 mg/ml用于后续实验。与正常对照组比较,各用药组细胞抑制率均明显升高;细胞胞质回缩,漂浮的死细胞增多;胞核偏于一侧,染色质浓染,呈马蹄形或月牙状的典型凋亡特征;细胞内VEGF、Ang-2蛋白表达明显降低,而TSP、TIMP-2蛋白表达明显升高(P0.05或P0.01)。与顺铂1 mg/ml组和六味地黄醇提物100 mg/kg组比较,顺铂1 mg/ml+六味地黄醇提物100 mg/ml组更能明显抑制BEL-7402细胞增殖;细胞内VEGF、Ang-2蛋白表达明显降低,而TSP、TIMP-2蛋白表达明显升高(P0.05或P0.01)。结论:六味地黄醇提物及其联合顺铂能诱导BEL-7402细胞凋亡,并可能通过下调细胞内肿瘤血管相关VEGF、Ang-2蛋白表达、上调TSP、TIMP-2蛋白表达增强对BEL-7402细胞的抑制作用。
【部分图文】：

细胞形态学用细胞形态阳性率表示,细胞形态阳性率=正常细胞/细胞总数×100%。与正常对照组(阳性率为100%)比较,六味地黄醇提物组阳性率为(51.06±3.06)%、顺铂组阳性率为(40.31±2.87)%、联合用药组阳性率为(29.43±3.54)%。细胞胞质回缩,细胞变成圆球形或不规则形,典型的正常形态细胞减少,细胞折光性降低,漂浮的死细胞增多。结果详见图1。2.3 六味地黄醇提物及联合顺铂对BEL-7402细胞抑制率的影响

细胞凋亡程度用细胞凋亡率表示,细胞凋亡率=凋亡细胞/细胞总数×100 %。Hoechst染色结果显示,与正常对照组比较(凋亡率为0 %),六味地黄醇提物组凋亡率为(25.36±3.65)%、顺铂组凋亡率为(34.68±2.74)%、联合用药组凋亡率为(63.15±1.97)%,凋亡的细胞显著增多(P<0.05),凋亡细胞核偏于一侧,染色质浓染,呈马蹄形或月牙状的典型凋亡特征,提示六味地黄醇提物联合顺铂具诱导BEL-7402细胞凋亡的作用。结果详见图2。2.5 六味地黄醇提物联合顺铂对VEGF、Ang-2、TSP、TIMP2蛋白表达水平的影响

表3 六味地黄醇提物联合顺铂对VEGF、Ang-2、TSP、TIMP2蛋白表达水平的影响 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 浓度/(mg/ml) D/OD VEGF Ang-2 TSP TIMP2 正常对照 2873±140 3546±255 1564±99 1121±63 顺铂 1 1669±102*△ 2605±165*△ 2172±122*△ 2565±143*△ 六味地黄醇提物 100 2126±134*△ 2827±150*△ 1961±138*△ 2354±132*△ 六味地黄醇提物+顺铂 100+1 1332±84* 1944±74* 2728±173* 3347±200*图4 六味地黄醇提物联合顺铂对BEL-7402细胞Ang-2蛋白表达的影响(免疫荧光,×200)
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 徐新;陈向凡;唐春梅;;七叶皂苷钠体外抑制Bel-7402细胞增殖[J];江苏医药;2013年24期

2 罗辉;汪亚君;陈杰;刘江琴;张海涛;;根皮素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡[J];南方医科大学学报;2008年07期

3 罗辉;马超;汪亚君;陈杰;刘江琴;张海涛;;高良姜素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡的研究[J];中药材;2008年08期

4 姜艳霞;纪朋艳;王莹;朱文赫;罗军;徐俊杰;芦晓晶;;海带多糖对人肝癌bel-7402细胞存活和凋亡的影响[J];上海中医药杂志;2015年03期

5 路蕾;朱文渊;林国旺;梁康檐;;桂皮酸诱导Bel-7402人肝癌细胞凋亡的作用及机制[J];中山大学学报(医学科学版);2013年04期

6 罗颖颖;陈兰英;简晖;崔亚茹;谢欣序;刘鹏;杨世林;郭建生;;白头翁皂苷调节Bel-7402人肝癌异体移植瘤裸鼠能量代谢的研究[J];中草药;2014年07期

7 皇甫超申;刘彬;马永超;邓锦波;;苦参碱诱导人肝癌细胞BEL-7402自吞噬性死亡[J];中草药;2008年09期

8 韩晓;吴成爱;王伟;刘舒;王绿娅;;荷叶碱对bel-7402细胞胆固醇代谢的影响[J];现代生物医学进展;2008年09期

9 郭昱;姚树坤;;黄芩甙对人肝癌BEL-7402细胞系侵袭和转移的影响[J];第三军医大学学报;2006年06期

10 姜艳霞;纪朋艳;朱文赫;张巍;徐俊杰;李妍;雷钧涛;;海带多糖对人肝癌细胞Bel-7402增殖的抑制作用及其机制[J];食品科学;2015年15期

相关博士学位论文 前3条

1 简序;酪丝亮肽在人肝癌BEL-7402细胞中的定位及其跨膜转运机制的初步研究[D];天津医科大学;2008年

2 芦冲;尖叶假龙胆醇提物对H_(22)荷瘤小鼠及人肝癌Bel-7402细胞的影响和机制研究[D];黑龙江中医药大学;2016年

3 李卫民;影响方剂中地黄功效发挥方向的诸因素研究[D];成都中医药大学;2009年

相关硕士学位论文 前10条

1 李忠魁;汉黄芩苷对人肝癌细胞BEL-7402的抑制作用研究[D];中南大学;2007年

2 张锐;乌骨藤注射液对Bel-7402细胞增殖及血管生成作用的实验研究[D];扬州大学;2009年

3 姬剑;秦皮乙素通过线粒体途径诱导人肝癌BEL-7402细胞凋亡[D];辽宁医学院;2015年

4 王小峰;苦参碱对肝癌细胞BEL-7402凋亡和自噬相关基因表达的影响[D];山西医科大学;2014年

5 张睿苏;龙枝配伍促H_(22)荷瘤小鼠肿瘤细胞及人肝癌Bel-7402细胞凋亡作用的研究[D];黑龙江中医药大学;2017年

6 徐方野;甘草次酸类及甘草查尔酮类化合物对人肝癌Bel-7402细胞的抗癌活性及其机制的研究[D];新疆医科大学;2013年

7 王岩;桂附地黄方多糖质量控制与评价方法研究[D];沈阳药科大学;2009年

8 杨晓丹;裙带菜褐藻多糖硫酸酯对SMMC-7721肿瘤细胞凋亡的诱导及对BEL-7402的迁移抑制作用[D];大连医科大学;2010年

9 李莉萍;白藜芦醇对人肝癌细胞株Bel-7402作用的实验研究[D];中南大学;2010年

10 周倩;地黄标准物质及熟地黄质量评价标准的研究[D];河南大学;2014年

本文编号：2854835