天麻酚性成分对神经血管单元的保护作用

发布时间：2020-10-24 21:56

　　 目的:脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)是导致缺血性脑卒中(Ischemic stroke,IS)进一步恶化的重要原因,其病理改变涉及复杂的时间、空间级联反应,最终导致脑稳态失调。以往的研究只从单一环节入手,忽视脑的整体性,神经血管单元(Neurovascular Unit,NVU)稳态的治疗策略强调从整体研究脑神经血管系统的损伤及其机制,以维持脑微环境的整体稳定,促进神经元存活和神经功能的恢复,以期达到降低IS致残率和死亡率的目标。课题组前期研究表明,天麻乙酸乙酯提取物具有显著抗CIRI的作用,其所含的酚性成分D、H能通过血脑屏障(Blood brain barrier,BBB)进入脑组织,对CIRI早期NVU损伤的不同病理环节具有选择性作用。本研究探讨天麻酚性成分D、H对CIRI早期NVU的保护作用及时效性特点,并探讨其NVU保护作用的可能机制。方法:通过线栓法复制大鼠(Middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型,各组动物于脑缺血2h再灌注2h、24h,采用Longa改良后的5分法对模型大鼠神经功能缺损症状进行神经病学评分、采用TTC染色法检测脑梗死体积、采用EB渗透法测定脑组织EB含量,采用透射电镜观察NVU超微结构(BBB、神经元、胶质细胞)的变化,以评价天麻酚性成分D、H对NVU的保护作用;Western-Blot法检测模型大鼠缺血侧脑组织中NVU各组成成分标志蛋白表达水平的变化,以探讨其保护作用的可能机制。结果:1.天麻酚性成分D、H对MCAO/R模型大鼠NVU的保护作用大鼠脑缺血2h再灌注2h:天麻酚性成分D、H对模型大鼠神经病学评分、脑梗死体积均无明显影响,能降低模型大鼠缺血侧脑组织EB的渗出含量。大鼠脑缺血2h再灌注24h:天麻酚性成分D、H均能降低模型大鼠的神经病学评分、减小脑梗死体积以及减少缺血侧脑组织EB的渗出含量;并且能减轻模型大鼠NVU超微结构的破坏程度,表现为:BBB损伤减轻、血管腔和基底膜形态未完全被破坏,星型胶质细胞足突水肿明显减轻;神经元损伤减轻,细胞核常染色质均匀、异染色质减少,核膜有凹陷;胶质细胞损伤均减轻,细胞结构破坏减轻,周围组织水肿减轻。2.天麻酚性成分D、H对MCAO/R模型大鼠NVU保护作用的机制大鼠脑缺血2h再灌注2h:各组大鼠缺血侧脑组织Occludin、Claudin-5、MAP-2、GFAP和CD68的表达均无明显变化。大鼠脑缺血2h再灌注24h:天麻酚性成分D、H能明显升高模型大鼠缺血侧脑组织Occludin、Claudin-5的表达水平、降低GFAP的表达水平、有升高MAP-2表达的趋势。天麻酚性成分H还能明显降低CD68的表达水平。结论:天麻酚性成分D、H在脑缺血2h再灌注24h时对MCAO/R模型大鼠NVU有保护作用。其机制可能与其上调BBB标志蛋白Occludin和Claudin-5的表达水平、下调星形胶质细胞标志蛋白GFAP的表达水平有关;成分H对NVU保护作用的机制可能还与下调小胶质细胞标志蛋白CD68的表达水平有关。
【学位单位】：云南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R285.5
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文索引表
引言
第一部分 天麻酚性成分D、H对MCAO/R模型大鼠神经血管单元的保护作用
    1. 实验材料
    2. 实验方法
    3. 数据处理
    4. 实验结果
    5. 讨论
    6. 小结
第二部分 天麻酚性成分D、H对MCAO/R模型大鼠神经血管单元的保护作用机制
    1. 实验材料
    2. 实验方法
    3. 数据处理
    4. 实验结果
    5. 讨论
    6. 小结
结论
参考文献
综述
    参考文献
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本文编号：2855022