救必应酸和救必应酸固体分散体制备方法及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

发布时间：2020-10-28 05:50

　　 目的:研究救必应药材是冬青科植物铁冬青的干燥根皮和树皮,提取总三萜酸并对总三萜酸中主要成分救必应酸进行分离纯化;以提高其溶解度和生物利用度制备得到救必应酸固体分散体,并对救必应总三萜酸、救必应酸及其固体分散体进行体外抑制α-葡萄糖苷酶活性进行研究。方法:利用紫外吸收光谱法测所得物中总三萜酸的量,利用Box-Behnken响应面法对总三萜酸工艺提取优化;对总三萜酸中主要成分救必应酸采用ODS常压柱进行分离纯化并进行结构鉴定;利用溶剂法制备救必应酸最终得到其固体分散体,用X-射线衍射、SEM扫描电镜及溶出速率测定等分析方法对固体分散体的分散状态及质量优劣作出评价,固体分散体中救必应酸含量测定采用高速液相色谱法。采用PNPG法研究救必应总三萜酸、救必应酸及其固体分散体的抑制α-葡萄糖苷酶活性。结果:通过救必应总三萜酸提取、纯化工艺的研究,最终确定的制备工艺为:取救必应药材,用含8%NaOH的45%乙醇溶液,溶液与物料比为8:1,提取2小时,提取2次,过滤,合并滤液,使用盐酸调节pH值在5-6之间,放置,过滤,滤液放置,滤渣用水洗至中性,干燥,得救必应总三萜酸粗品;再用95%乙醇溶液加热水浴溶解,料液比为1:25,加入1%的药用活性炭(以溶液的体积计),滤过,滤液回收溶剂、干燥,即得;制备得到的救必应总三萜酸中总三萜酸的含量为90%左右,而救必应酸的含量高于80%;采用常压ODS柱分离救必应总三萜酸中的救必应酸,并通过理化性质、薄层色谱法、核磁共振波谱法、高效液相色谱鉴定了救必应酸的结构;救必应酸的溶解度与溶出率为考察指标,考察不同种类载体及不同药载比例的救必应酸固体分散体,最后以PVPK30为载体,药物载体比为1:5,用溶剂法制固体分散体。并经过X-射线衍射及SEM电镜分析,证实了固体分散体的形成并且形成了不同于原料药的新形态。其固体分散体在60min的溶出率达到90%以上,大大提高了救必应酸的生物利用度及溶解度;以PNPG为底物,对救必应总三萜酸、救必应酸及救必应酸固体分散体抑制α-葡萄糖苷酶活性进行了研究,实验结果表明,待测样品均具有一定的抑制α-葡萄糖苷酶活性,救必应酸固体分散体IC_(50)为1.06 mg·mL~(-1),救必应酸IC_(50)为1.98 mg·mL~(-1),救必应总三萜酸IC_(50)为2.53 mg·mL~(-1)。说明救必应酸形成固体分散体后溶解度增大,活性显著增强,体现出制备固体分散体具有现实的意义。结论:通过对救必应总三萜酸、救必应酸及救必应酸固体分散体α-葡萄糖苷酶抑制活性的研究,为从救必应中提取的救必应总三萜酸开发成降血糖的新药奠定了基础。
【学位单位】：长春中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R283.6
【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语
前言
第一章 文献综述
    1 救必应的化学成分和药理作用的研究进展
        1.1 救必应化学成分
        1.2 救必应药理作用
    2 α-葡萄糖苷酶抑制剂研究进展
        2.1 α-葡萄糖苷酶的结构特点
        2.2 α-葡萄糖苷酶抑制剂的作用机制
        2.3 α-葡萄糖苷酶抑制剂的来源
    3 小结
第二章 救必应总三萜酸提取、纯化工艺的研究
    1 材料
        1.1 材料与试剂
        1.2 仪器
    2 方法
        2.1 救必应总三萜酸含量测定方法的建立
        2.2 救必应总三萜酸提取单因素试验
    3 结果与讨论
        3.1 救必应酸标准曲线
        3.2 救必应提取单因素试验结果
        3.3 响应面优化试验结果分析
        3.4 救必应总三萜酸纯化条件的考察
    4 小结
第三章 救必应酸的分离及鉴定
    1 实验仪器与试剂
        1.1 实验仪器
        1.2 实验试剂
    2 救必应酸的分离纯化
    3 救必应酸的鉴定
    4 小结
第四章 救必应酸固体分散体的制备
    1 仪器与试药
        1.1 仪器
        1.2 药品与试剂
    2 实验方法
        2.1 救必应酸固体分散体的制备
        2.2 救必应酸物理混合物的制备
        2.3 救必应酸固体分散体含量测定方法的建立
        2.4 溶出介质的选择
        2.5 溶解度测定方法
        2.6 溶出度的测定方法
        2.7 处方筛选
        2.8 固体分散体的质量评价
    3 实验结果
        3.1 救必应酸含量测定方法
        3.2 救必应酸固体分散体制备工艺筛选
        3.3 固体分散体的质量评价
    4 讨论
    5 小结
第五章 救必应酸及固体分散体抑制α-葡萄糖苷酶活性研究
    1 试验仪器与材料
        1.1 试验仪器
        1.2 试验试剂
        1.3 溶液的配制
    2 试验方法
        2.1 实验体系
        2.2 阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶抑制作用测定
        2.3 样品对α-葡萄糖苷酶抑制作用测定
    3 实验结果
        3.1 阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶抑制作用测定
        3.2 样品对α-葡萄糖苷酶抑制作用测定
    4 小结
第六章 结语
致谢
参考文献
附图

【参考文献】

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本文编号：2859683