PGC-1α-PPARγ通路介导PM2.5联合低氧致BEAS-2B细胞损伤的机制及玉屏风颗粒的保护作用

发布时间：2020-11-01 08:49

　　 目的:研究已证实玉屏风颗粒(YPF)具有良好的抗炎、抗氧化及免疫调节作用,但其作用机制还未完全阐明。本研究主要探究PGC-1α-PPARγ通路是否介导PM2.5联合低氧暴露对人支气管上皮细胞损伤的机制及YPF的保护作用。方法:1.观察PM2.5、低氧及PM2.5联合低氧对人支气管上皮细胞BEAS-2B中PGC-1α、PPARγmRNA表达的影响:分别以PM2.5(0、25、50、100μg/mL)、低氧、PM2.5联合低氧3种方法干预细胞6、12、24h后,qPCR法检测PGC-1α、PPARγmRNA水平以筛选PM2.5联合低氧合适的暴露时间及浓度;2.探究YPF对PM2.5联合低氧暴露的BEAS-2B细胞保护作用的机制:CCK8法观察不同浓度YPF溶液干预后细胞的活性,设立正常对照组、PM2.5+低氧组、PM2.5+低氧+YPF组、PM2.5+低氧+siCONTROL+YPF组、PM2.5+低氧+siPGC-1α+YPF组,qPCR、Western法分别测定PGC-1α、PPARγmRNA及蛋白水平,Western法测定β-防御素2(β-defension 2)、核因子κB(NF-κB)p65蛋白水平,ELISA法测定单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白水平。结果:1.PM2.5、低氧两种因素单独或联合干预后PGC-1α、PPARγmRNA水平均低于正常对照组(P均0.01);PM2.5+低氧组PGC-1α、PPARγ蛋白水平均低于正常对照组(P均0.01),PM2.5+低氧+YPF组PGC-1α、PPARγmRNA及蛋白水平均高于PM2.5+低氧组(P均0.05);PM2.5+低氧+siPGC-1α+YPF组PGC-1α、PPARγmRNA及蛋白水平均低于PM2.5+低氧+siCONTROL+YPF组(P均0.01);2.PM2.5+低氧组β-defension 2蛋白水平均低于正常对照组(P0.01),PM2.5+低氧+YPF组β-defension 2蛋白水平均高于PM2.5+低氧组(P0.05);PM2.5+低氧+siPGC-1α+YPF组β-defension 2蛋白水平低于PM2.5+低氧+siCONTROL+YPF组(P0.01);3.PM2.5+低氧组MCP-1蛋白水平高于正常对照组(P0.01),PM2.5+低氧+YPF组MCP-1蛋白水平均低于PM2.5+低氧组(P0.05);PM2.5+低氧+siPGC-1α+YPF组MCP-1蛋白水平高于PM2.5+低氧+siCONTROL+YPF组(P0.01)。4.PM2.5+低氧组NF-κBp65蛋白水平高于正常对照组(P0.01),PM2.5+低氧+YPF组NF-κBp65蛋白水平低于PM2.5+低氧组(P0.05);PM2.5+低氧+siPGC-1α+YPF组NF-κBp65蛋白水平与PM2.5+低氧+siCONTROL+YPF组相比,无明显差异。结论:PM2.5联合低氧能抑制BEAS-2B细胞中PGC-1α-PPARγ通路的表达,并引发免疫炎症反应,YPF可改善这种影响,并可能通过PGC-1α-PPARγ通路而起保护作用。
【学位单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

不同浓度不同时间PM2.5暴露后BEAS-2B中PGC-1α和PPARγmRNA水平

图 1 不同浓度不同时间 PM2.5 暴露后 BEAS-2B 中 PGC-1α和 PPARγmRNA 水平Fig.1 Levels of PGC-1α and PPARγ mRNA in BEAS-2B cells exposed todifferent concentrations of PM2.5 for different timeNote:(A)PGC-1α mRNAlevels (B)PPARγ mRNAlevels.*P<0.01 vs 0μg/mL,6h;**P<0.01vs 0μg/mL,12h;▼P<0.01 vs 0μg/mL,24h;△P<0.01 vs 25μg/mL,6h;☆P<0.01 vs50μg/mL,6h;▽P<0.05 vs 100μg/mL,6h；▲P<0.01 vs 100μg/mL,12 h.A. B.

图 3 PM2.5 联合低氧暴露后 BEAS-2B 中 PGC-1α和 PPARγ mRNA 水平Fig.3 Levels of PGC-1α and PPARγ mRNAin BEAS-2B cells exposed to 50μg/mL PM2.5 combined hypoxia in in different timeNote:(A)PGC-1α mRNAlevels (B)PPARγ mRNAlevels.*P<0.01 vs Control 6h;**P<0.01vs Control 12h;***P<0.01 vs Control 24h;△P<0.01 vs PM+Hypoxia 6h.A. B.
【参考文献】

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本文编号：2865304