糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的作用研究

发布时间：2020-11-05 13:20

　　 目的探讨糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的影响。方法采用KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病小鼠模型,随机分为模型组、糖肾宁组及缬沙坦组,每组10只,并将10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。各组小鼠干预给药12周后处死,心尖取血、摘取双侧肾脏,进行相应指标检测。使用酶联免疫法检测血清肌酐及尿素氮水平,PAS染色观察各组小鼠肾组织细胞外基质增生情况,免疫组化检测各组小鼠肾组织Collagen I及FN蛋白表达,WB及RT-PCR检测各组小鼠足细胞P-cadherin和FSP-1的蛋白及mRNA表达。结果 (1)与正常对照组相比,模型组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显降低(P0.05)。(2)与正常对照组相比,模型组小鼠肾小球细胞外基质明显增生,基质蛋白Collagen I及FN表达上调(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠肾小球细胞外基质增生减轻,基质蛋白Collagen I及FN表达明显下调(P0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组小鼠足细胞P-cadherin蛋白及mRNA表达明显下调(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表达明显上调(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠足细胞P-cadherin蛋白及mRNA表达明显上调(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表达明显下调(P0.05)。结论糖肾宁能够抑制糖尿病肾病小鼠足细胞上皮间质转分化,可能是其减轻肾小球细胞外基质增生、延缓疾病进展的分子机制。
【部分图文】：

使用PAS染色观察各组小鼠肾组织细胞外基质增生情况。与正常对照组相比，模型组小鼠肾小球肥大，细胞外基质出现增生;与模型组相比，糖肾宁组及缬沙坦组小鼠肾小球减小，细胞外基质增生减轻。提示糖肾宁能够减轻KK-Ay小鼠肾小球细胞外基质增生。见图1。2.3 糖肾宁对KK-Ay小鼠肾小球细胞外基质蛋白Collagen I及FN蛋白表达的影响

应用免疫组化检测各组小鼠肾组织细胞外基质蛋白Collagen I及FN蛋白表达情况。与正常对照组相比，模型组小鼠肾小球细胞外基质蛋白Collagen I及FN蛋白表达明显增加;与模型组相比，糖肾宁组及缬沙坦组小鼠Collagen I及FN蛋白表达明显减少。提示糖肾宁能够减少KK-Ay小鼠肾小球细胞外基质蛋白Collagen I及FN蛋白表达。见图2、表3。2.4 糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞EMT标志蛋白P-cadherin及FSP-1蛋白表达的影响

应用WB检测各组小鼠肾组织P-cadherin蛋白及FSP-1蛋白表达情况。实验结果显示，与正常对照组相比，模型组小鼠肾组织P-cadherin蛋白表达明显下调(P<0.05),FSP-1蛋白表达明显上调(P<0.05);与模型组相比，糖肾宁组及缬沙坦组小鼠肾组织P-cadherin蛋白表达明显上调(P<0.05),FSP-1蛋白表达明显下调(P<0.05)。实验结果表明，糖肾宁能够上调KK-Ay小鼠足细胞表型标志蛋白P-cadherin表达，下调间充质表型标志蛋白FSP-1蛋白表达。见图3、表4。2.5 糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞EMT标志蛋白P-cadherin及FSP-1基因mRNA转录水平的影响
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