加味升降散对VD大鼠海马相关神经元和神经递质的影响

发布时间：2020-11-07 07:06

　　 目的:探讨基于补肾通腑法理论组成的加味升降散对血管性痴呆(VD)模型大鼠行为学的影响,及海马组织中相关神经递质和神经元的调控作用,初步揭示其治疗VD的作用环节和靶点,为临床使用提供实验数据支持。方法:90只SD大鼠,按照随机数字表,随机分成6组:假手术组,模型组,高剂量组,中剂量组,低剂量组,石杉碱甲组,每组15只,采用2-血管阻断法复制血管性痴呆大鼠模型。造模完成后,剔除模型不成功和死亡的大鼠,每组随机选取12只作为研究对象。高、中、低剂量组分别按照14ml/kg、7ml/kg、3.5ml/kg灌胃给予0.8g/ml的加味升降散水煎液,石杉碱甲组给予石杉碱甲悬浮液0.1mg/kg,假手术组、模型组灌胃生理盐水7ml/kg,tid,28天。给药结束后,采用Morris水迷宫法检测行为学,尼氏染色镜下观察海马形态学特征,ELISA检测大鼠海马和结肠中SP、VIP的表达情况,TBA法检测大鼠海马中MDA的含量,羟胺法检测大鼠海马组织中T-SOD活力的情况,ELISA检测大鼠海马中Ach变化结果;分光光度计法检测大鼠海马中AchE含量的变化,Western blotting检测大鼠海马中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达情况。结果:(1)行为学结果:与假手术组比较,模型组逃避潜伏期时间延长(P0.05),学习次数降低(P0.05),经过目标区域及平台的次数减少(P0.05),停留在目标区域及平台的时间降低(P0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组和石杉碱甲组逃避潜伏期时间缩短(P0.05),学习次数增加(P0.05),经过目标区域及平台的次数增加(P0.05),停留在目标区域及平台的时间延长(P0.05)。(2)神经元形态学特征:假手术组海马CA1区神经元基本正常;模型组海马CA1区神经元排列松散,显著丢失;与模型组比较,高、中、低剂量组和石杉碱甲组大鼠海马神经元形态有所改善,排列较为紧密有序。(3)氧化损伤因子含量的变化:与假手术组比较,模型组海马中T-SOD含量降低(P0.05),而MDA升高(P0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组和石杉碱甲组大鼠海马中T-SOD含量升高(P0.05),而MDA降低(P0.05)。(4)神经递质含量变化:与假手术组比较,模型组大鼠海马中SP、VIP、Ach、AchE含量降低(P0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组和石杉碱甲组大鼠海马中SP、VIP、Ach、AchE含量升高(P0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠结肠中SP、VIP含量降低(P0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组大鼠结肠中SP、VIP含量升高(P0.05),而石杉碱甲组大鼠结肠中SP、VIP含量与模型组无明显差异;与石杉碱甲组比,高、中、低剂量组大鼠结肠中SP、VIP含量升高(P0.05)。(5)蛋白表达情况:与假手术组比较,模型组大鼠海马中Bcl-2蛋白表达降低,Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P0.05)。与模型组比较,高、中、低剂量组和石杉碱甲组大鼠海马中bcl-2蛋白表达升高(P0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达降低(P0.05)。结论:加味升降散可改善血管性痴呆所致的认知功能障碍。其作用机制可能是通过改善海马区神经递质Ach、AchE的含量,同时通过脑肠双调,改善海马区神经递质SP、VIP的含量来改善认知功能障碍;以及通过提高海马区T-SOD的含量,降低MDA的含量抵抗氧化损伤,实现上调海马区Bcl-2蛋白水平,下调Bax、Caspase-3蛋白水平,改善海马神经元凋亡状况,从而达到改善认知功能障碍,提高学习记忆力。
【学位单位】：湖北民族学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

图 2-1 各组大鼠空间探索搜索策略影响图例Fig. 2-1 The legend about space exploration search strategy of rats in each groupA：假手术组；B：模型组；C：高剂量组；D：中剂量组；E：低剂量组；F：石杉碱甲组A: Sham operation group; B:model group; C:high-dose group; D: medium-dose grou; E:low-dose group; F: huperzine group.

第二部分 实验研究4.2 尼 染色结果各组大鼠海马组织 CA1 区尼氏染色结果，见图（2-3），假手术组大鼠海组织神经元未见明显畸形(图 A)；模型组海马神经元排列松散，显著丢失(图 与模型组相比，高剂量组、中剂量组、低剂量组和石杉碱甲组中大鼠海马组神经元在数目、排列、形态上均有所改善。见图（C、D、E、F）。

注：与假手术组比较，*P＜0.05；与模型组比较，#P＜0.05图 2-7 各组大鼠海马中 Ach、AchE 含量( n=12， x±s )Tab. 2-5 The contents of Ach,and AchE in the hippocampus of each group( n=12， x±s )4.6 大鼠海马组织中 CA1 区 Bcl-2、Bax、Caspase-3 的结果与假手术组相比，模型组海马中 Bcl-2 蛋白表达降低，Bax 和 Caspase-3 蛋白表达升高，差异具有统计学意义(P＜0.05)。与模型组相比，高、中、低剂量组和石杉碱甲组海马中 Bcl-2 蛋白表达升高，Bax 和 Caspase-3 蛋白表达降低，差异具有统计学意义(P＜0.05)。高、中、低剂量组之间相比，差异无统计学意义（P＞0.05）；高、中、低剂量组与石杉碱甲组相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。见图 2-8，图 2-9。
【参考文献】

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本文编号：2873609