罗布麻叶的HPLC指纹图谱及抗氧化活性谱效关系研究

发布时间：2020-11-17 13:42

　　 目的建立罗布麻叶的指纹图谱并考察其体外抗氧化活性的谱效关系,为揭示其抗氧化活性物质基础提供参考。方法采用HPLC法建立20批罗布麻叶的指纹图谱,不同产地罗布麻叶体外抗氧化活性的测试采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)自由基清除法,利用灰色关联度分析(GRA)法和双变量相关性分析(BCA)法对谱效关系进行探讨。结果建立了20批罗布麻叶HPLC指纹图谱,确定了18个共有峰,相似度在0.883～0.989范围内。运用对照品比对法鉴定了其中7个峰:X_2为绿原酸,X_7为芦丁,X_8为金丝桃苷,X_9为异槲皮苷,X_(12)为紫云英苷,X_(17)为槲皮素,X_(18)为山柰酚。对样品的指纹图谱进行聚类分析,结果显示可聚为4类。20批罗布麻叶均有不同程度的清除自由基活性。GRA法分析结果显示,18个共有峰与清除自由基的关联度在0.691 7～0.959 3范围内,大小依次为X_2X_9X_8X_(17)X_(18)X_(12)X_(11)X_7X_(13)X_(15)X_(14)X_1X_(10)X_3X_5X_6X_(16)X_4。BCA法分析结果显示,2号峰(绿原酸)、8号峰(金丝桃苷)、9号峰(异槲皮苷)、17号峰(槲皮素)和18号峰(山柰酚)的含量变化与DPPH·自由基清除活性大小密切相关。结论市售不同产地罗布麻叶的化学成分基本一致,但不同产地的药材质量有一定差异,罗布麻叶抗氧化作用是多成分共同起效的结果。通过建立HPLC指纹图谱及分析谱效关系探寻罗布麻叶抗氧化物质基础,可为该药材的质量评价提供参考。
【部分图文】：

HPLC图

将各批罗布麻叶药材的HPLC谱图转换成AIA格式,导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A版软件,做相似度评价,参照谱为S1的样品图谱,参照文献[22]方法和步骤,得到各批药材与对照图谱的相似度在0.883～0.989范围内。生成的对照图谱与各样品图谱的相似度结果见表2,20批样品的HPLC指纹图谱见图2。2.5.3 聚类分析

通过SPSS Statistics 19.0软件,实现对样品指纹图谱的系统聚类分析,采用组间连接法,变量为罗布麻叶18个共有峰峰面积,将欧式距离作为样品的测度,聚类分析结果见图3。由图3可知,20份样品可分成4类,S10、S18、S4和S11为第1类,S13、S19、S2、S17、S20、S3、S15、S6、S1、S16、S12、S14和S9为第2类,S7和S8为第3类,S5为第4类,未发现药材产地与聚类分析结果有明显相关性。第1类样品中,2号(绿原酸)、8号(金丝桃苷)、9号(异槲皮苷)和11号峰的峰面积均较大,其峰面积总和也相对较大,因此聚为第1类;第2类、第3类和第4类样品中,以上4个主要色谱峰峰面积总和呈依次减小的趋势,第4类样品中除16,17和18号峰外,其余各色谱峰峰面积均较小。推测这可能与样品的采收时间、生长环境和气候条件等因素有关。2.6 DPPH·自由基清除法测定各批罗布麻叶药材的抗氧化作用
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本文编号：2887566