芪珠方及其有效单体黄芪单体抗乙肝肝纤维化铁代谢紊乱机制研究

发布时间：2020-11-18 15:53

　　 我国是乙型肝炎高地方性流行区,并且每年死于肝硬化和肝细胞癌等乙型肝炎相关疾病的患者在不断增多,肝纤维化是慢性乙型肝炎发展到肝硬化的必经阶段,如何防治乙肝已经成为现代医学的重要问题。慢性乙型肝炎患者大多数合并有肝铁代谢紊乱,过量的铁在肝脏中沉积,加重肝脏功能损害,从而加快慢性乙型肝炎肝纤维化向肝硬化、肝癌转化的进程。如果能有效地抑制这个过程,也就延缓了患者病情恶化的进程,以此达到提高患者生活质量,延长患者生命的目的。芪珠方是临床验方,用于治疗慢性乙型肝炎具有良好的疗效,但其治疗慢性乙型肝炎的机制尚不明确。有文献报道芪珠方对慢性肝病抗肝纤维化作用机理之一可能在于通过减轻肝细胞损伤,保护肝细胞,减轻炎症反应,从而减少了肝纤维化的激发因素,抑制了胶原合成。本文选取方中重要组成成分黄芪的有效成分黄芪甲苷,分别对芪珠方和黄芪甲苷进行研究,以铁右旋糖苷作为诱导剂,建立肝铁超载小鼠模型和细胞模型,研究芪珠方及黄芪甲苷对铁超载所致肝细胞损伤的保护作用。在小鼠体内模型中,给予芪珠方组与阳性对照相比较,总铁结合力上升,血清转铁蛋白及ALT、AST下降,芪珠方可抑制肝脏中铁含量的升高,缓解由铁超载引起的肝脏铁聚积现象,铁超载导致肝损伤可能跟脂质过氧化、蛋白质硝化密切相关而芪珠方表现出良好的抗氧化及抗硝化作用,从而有效地逆转铁超载引起的肝损伤。体外细胞实验中,给予芪珠方后,GSH水平随着芪珠方剂量的增加而显著升高;ALT、AST、MDA水平随着芪珠方剂量的增加而显著降低;说明芪珠方可有效抑制铁超载引起的脂质过氧化。T-BIL水平随着芪珠方剂量的增加而显著降低;结果说明铁含量过多会造成肝细胞损伤,而芪珠方可改善铁超载引起的肝细胞损伤。最后再利用黄芪甲苷作用于铁超载所致肝损伤小鼠模型,铁超载模型组小鼠血清中AST、ALT的含量均显著高于空白对照组,血清铁含量较铁超载模型组显著降低,而TIBC显著升高;MDA大幅上升,GSH明显降低,说明铁超载的肝脏组织有严重的脂质过氧化损伤;不同剂量黄芪甲苷组的肝脏中MDA的浓度有不同程度的下降,而GSH的活性则显著升高,可初步推断肝脏的脂质过氧化损伤减轻。说明不同浓度的黄芪甲苷对于铁超载引起的脂质过氧化损伤的缓解作用呈现一定的剂量趋势,据此推测黄芪甲苷的保肝作用机制很可能与其抗氧化作用有关。
【学位单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

芪珠方及其有效单体黄芪甲苷抗乙肝肝纤维化铁代谢紊乱机制研究点，没有出现纤维结蹄组织，也未观察到水样变性或者脂肪变性的现象，无组织增生以及细胞浸润。在注射不同剂量的右旋糖酐铁之后，可以观察到不同程度上的肝细胞紊乱现象，出现变形或者坏死等情况，这说明铁的代谢紊乱成功的导致了小鼠的纤维化模型。芪珠方给药组可明显改善上述病理改变，结果见图 1。

Table 2 Determination of iron content in liver of mice in each group对照组 150-Fe 组 300-Fe 组 500-Fe Ironontent(μg/g)206.66±85.04443.33±40.41963.87±127.32**1433.60102.73*LBa 组 MBa 组 HBa 组Ironntent(μg/g)900.45±110.12&&703.33±134.28&&450.16±75.49&&&：与对照组相比，**P<0.01；***P<0.001；与模型组（500-Fe）相比，&P<0.&P<0.01，&&&P<0.001。

芪珠方及其有效单体黄芪甲苷抗乙肝肝纤维化铁代谢紊乱机制研究2.4.4 免疫组化法检测蛋白硝化的表达如下图所示，采用化学方法对小鼠的肝脏组织进行检测，如图 3 所示，图中血管膜周围棕黄色颗粒即为 3-NT，模型组中 3-NT 的含量明显较正常组显著增加，检测结果说明铁超载的现象会导致体内的蛋白出现硝化的情况，给与芪珠方之后，硝化程度明显下降。结果说明了铁超载会导致肝脏内部的蛋白硝化，而芪珠方可以改善这种症状。
【参考文献】

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1 赵龙凤;王艳;;临床一线抗病毒药物对慢性乙型肝炎治疗结局的影响[J];中华肝脏病杂志;2017年07期

2 蒋园;白云;刘萍;盛波;安然;国添柱;于伯承;葛鹏玲;温薇;;黄芪甲苷对CCl_4所致小鼠肝损伤的影响[J];中药药理与临床;2015年06期

3 郭立忠;;中药黄芪化学成份与药理活性研究分析[J];中国卫生标准管理;2015年31期

4 张良;杨召聪;顾亚琴;钱知知;周玲玲;;马兜铃酸I激活大鼠肾脏p38 MAPK通路并导致肾细胞凋亡的研究[J];中药新药与临床药理;2015年05期

5 贺蕾艳;郭瑶雪;李春;邓晔;张啟智;彭文兴;;药物性肝损伤生物标志物研究进展[J];药学学报;2015年08期

6 刘建;刘燕梅;王玉光;;黄芪甲苷对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的干预作用[J];北京中医药;2015年06期

7 刘淑荣;赵文静;刘薇;黄显娇;张紫玉;;313例经核苷酸类似物治疗的慢性乙型肝炎患者HBV基因型及耐药变异分析[J];世界最新医学信息文摘;2015年11期

8 孙婷婷;梁惠;刘颖;王文成;戈娜;刘靖靖;;D-柠檬烯对酒精性肝损伤大鼠铁过载调节作用[J];中国公共卫生;2015年09期

9 林化冰;张延明;;黄芪的药理分析及临床用法探讨[J];中医临床研究;2015年09期

10 江燕;;黄芪药理作用及在方剂配伍方面的应用[J];中国实用医药;2015年01期

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2 张燕;铁超载肝损伤机理及黄芩苷干预作用的研究[D];华中科技大学;2009年

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1 程萍;芪参方对免疫性肝损伤小鼠Treg/Th17免疫失衡影响的实验研究[D];南京中医药大学;2015年

2 张健;干扰素相关的HBeAg/抗-HBe同时阳性的临床特征及可能机制[D];南方医科大学;2013年

3 刘仪;慢性乙型肝炎患者肝细胞凋亡的研究[D];山东大学;2009年

4 万凌峰;清肝化瘀益气法治疗慢性乙型肝炎湿热瘀阻证的临床研究[D];南京中医药大学;2005年

本文编号：2888890