七味白术散对菌群失调腹泻小鼠及肠道细菌乳糖酶基因表达的影响

发布时间：2020-11-22 06:26

　　 目的:研究抗生素所致菌群失调腹泻及七味白术散干预后对小鼠乳糖酶基因表达的影响,探明小鼠乳糖酶基因表达与小鼠肠道乳糖酶活性影响的相关性,为七味白术散对菌群失调腹泻的疗效机理提供依据。方法:SPF级昆明小鼠42只,雌雄各半,随机分为正常组16只、模型组24只。连续造模5天,造模期间正常组予以蒸馏水0.35m L/只/次,每日灌胃2次,模型组小鼠予以头孢拉定胶囊+硫酸庆大霉素混合抗生素11.67m L/kg/次,每日灌胃2次,造成小鼠肠道菌群紊乱。造模成功后按照随机数字表法从正常组和模型组中各取8只小鼠,雌雄各半,颈椎脱臼处死后无菌收集内容物及肠粘膜,用于检测菌群失调腹泻造模后小鼠肠道乳糖酶活性和小鼠肠道乳糖酶mRNA的总量。造模第5天将模型组16只小鼠,雌雄各半,按照随机数字表法,随机分为模型组和七味组,正常组、模型组和七味组各8只小鼠,雌雄各半。连续治疗4天,治疗期间正常组和模型组予以蒸馏水0.35m L/只/次,每日灌胃2次,七味组予以七味白术散0.104g/kg/次,每日灌胃2次,治疗4天后分别处死三组的8只小鼠,用于检测七味白术散治疗菌群失调腹泻小鼠后,小鼠肠道乳糖酶活性和小鼠肠道乳糖酶mRNA的总量。结果:菌群失调腹泻造模5天后,与正常组相比,模型组小鼠内容物及粘膜乳糖酶活性均出现了显著的降低,差异具有统计学意义(p0.01);正常组和模型组中小鼠内容物和粘膜的mRNA表达量无明显差异(p0.05)。七味白术散治疗4天后,与正常组相比,模型组小鼠内容物及粘膜乳糖酶活性均降低,七味组小鼠内容物(p0.01)及粘膜(p0.05)中的乳糖酶活性均升高,差异具有统计学意义;与模型组相比,七味组小鼠肠道内容物及粘膜乳糖酶活性显著升高,差异具有统计学意义(p0.01)。正常组、模型组、七味组中小鼠内容物和粘膜的mRNA表达量无明显差异(p0.05)。结论:菌群失调腹泻造模会降低小鼠和细菌肠内容物和肠黏膜中的乳糖酶活性,七味白术散可促进小鼠和细菌肠道乳糖酶活性的恢复。菌群失调腹泻造模及七味白术散治疗对小鼠肠道乳糖酶mRNA的总量无影响。七味白术散可在蛋白水平调控小鼠肠道乳糖酶活性,在基因水平对小鼠肠道乳糖酶mRNA的总量的变化无影响。目的:研究抗生素所致菌群失调腹泻及七味白术散干预后,对小鼠肠道细菌乳糖酶基因表达的影响,探明小鼠肠道乳糖酶活性与细菌乳糖酶基因表达的相关性,为七味白术散对菌群失调腹泻的疗效机理提供依据。方法:SPF级昆明小鼠42只,雌雄各半,随机分为正常组16只、模型组24只。连续造模5天,造模期间正常组予以蒸馏水0.35m L/只/次,每日灌胃2次,模型组小鼠予以头孢拉定胶囊+硫酸庆大霉素混合抗生素11.67m L/kg/次,每日灌胃2次,造成小鼠肠道菌群紊乱。造模成功后按照随机数字表法从正常组和模型组中各取8只小鼠,雌雄各半,颈椎脱臼处死后无菌收集内容物及肠粘膜,用于检测菌群失调腹泻造模后肠道乳糖酶活性和小鼠肠道细菌乳糖酶mRNA的总量。造模第5天将模型组16只小鼠,雌雄各半,按照随机数字表法,随机分为模型组和七味组,使得正常组、模型组和七味组各8只小鼠,雌雄各半。连续治疗4天,治疗期间正常组和模型组予以蒸馏水0.35m L/只/次,每日灌胃2次,七味组予以七味白术散0.104g/kg/次,每日灌胃2次,治疗4天后分别处死三组的8只小鼠,用于检测七味白术散治疗菌群失调腹泻小鼠后,肠道乳糖酶活性和小鼠肠道细菌乳糖酶mRNA的总量。结果:菌群失调腹泻造模5天后,与正常组相比,模型组小鼠内容物及粘膜乳糖酶活性均出现了显著的降低,差异具有统计学意义(p0.01);正常组和模型组中小鼠内容物和粘膜的mRNA表达量无明显差异(p0.05)。七味白术散治疗4天后,与正常组相比,模型组小鼠内容物及粘膜乳糖酶活性均降低,七味组小鼠内容物(p0.01)及粘膜(p0.05)中的乳糖酶活性均升高,差异具有统计学意义;七味组与模型组相比,小鼠肠道内容物及粘膜乳糖酶活性显著升高,差异具有统计学意义(p0.01);正常组、模型组、七味组中小鼠内容物和粘膜的mRNA表达量无明显差异(p0.05)。菌群失调腹泻造模5天后,正常组和模型组中小鼠肠道细菌内容物和粘膜的mRNA表达量无明显差异(p0.05);七味白术散治疗4天后,正常组、模型组、七味组中小鼠肠道内容物和粘膜中细菌乳糖酶mRNA表达量无明显差异(p0.05)。结论:菌群失调腹泻造模会降低小鼠和细菌肠内容物和肠黏膜中的乳糖酶活性,七味白术散可促进小鼠和细菌肠道乳糖酶活性的恢复。菌群失调腹泻造模及七味白术散治疗对小鼠肠道细菌乳糖酶mRNA的总量无影响。七味白术散可在蛋白水平调控小鼠肠道细菌的乳糖酶活性,在基因水平对小鼠肠道细菌乳糖酶mRNA的总量的变化无影响。
【学位单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R285.5
【部分图文】：

图 8 七味白术散治疗后小肠内容物和粘膜细菌乳糖酶基因表达 PCR 琼脂糖凝胶电泳图2.2 造模对小肠内容物中细菌乳糖酶 mRNA 表达量的影响造模后所提取的正常组、模型组小鼠肠道细菌内容物和粘膜总 RNA 浓度、纯度及完整性均较好，为小鼠内容物和粘膜 RNA 逆转录提供了良好的基础。由表
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本文编号：2894274