柴胡皂苷-b2通过调控STK4/IRAK1/NF-κB通路抑制原发性肝癌的研究

发布时间：2021-01-13 11:53

　　原发性肝癌（Primary liver cancer,PLC）是我国常见的恶性肿瘤之一,发病率和死亡率高,具有高转移性和高复发性,治疗困难、预后较差。慢性炎症和抑癌基因的失活是导致肝癌发生发展的重要因素。近期研究发现一些抑癌基因在免疫细胞内同样能表达,这就引发了进一步的思考:是否能筛选出一些兼具抑炎抑癌双重功能的基因,通过靶向免疫细胞和肿瘤细胞内相同的信号通路分子,进而影响癌症特别是炎症相关癌症的发生发展。临床研究发现,肝癌患者外周血中的巨噬细胞内低水平的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶4（serine/threonine-protein kinase 4,STK4）与高水平的白介素-1受体相关激酶1（IL-1 receptor associated kinase 1,IRAK1）呈负相关,且肿瘤组织内有大量的巨噬细胞浸润。IRAK1抑制剂可以明显降低由于STK4缺失导致的慢性炎症和肝癌的发生发展。因此STK4-IRAK1可以作为阻断炎性肝癌发生的新靶点。本论文主要研究了柴胡皂苷（saikosapoins,SS）-b2是否通过调控STK4/IRAK1/核因子-κB（Nuclear factor-... 

【文章来源】：河南科技大学河南省

【文章页数】：97 页

【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
第1章 绪论
    1.1 炎症与原发性肝癌的相关研究
    1.2 炎症相关通路与原发性肝癌
        1.2.1 JAK-STAT信号通路与癌症
        1.2.2 NF-κB信号通路与癌症
        1.2.3 Toll样受体信号通路与癌症
    1.3 STK4/IRAK1/NF-κB相关通路与原发性肝癌
        1.3.1 STK4与肝癌
        1.3.2 IRAK1与肝癌
    1.4 柴胡皂苷-b2抗癌作用及保肝作用研究
第2章 前言
第3章 柴胡皂苷-b2对DEN诱导的小鼠原发性肝癌的抑制作用
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 实验药品
        3.1.3 实验仪器
        3.1.4 实验试剂
        3.1.5 主要试剂配制
    3.2 试验方法
        3.2.1 模型制备与分组给药
        3.2.2 取材和计算脏器指数
        3.2.3 血液指标检测
        3.2.4 肝脏组织病理学检测
        3.2.5 免疫组织化学法检测肝脏组织内Ki67、STK4和IRAK1的表达情况
        3.2.6 qPCR检测外周血巨噬细胞中STK4和IRAK1的mRNA表达水平
        3.2.7 qPCR检测肝脏组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平
        3.2.8 Western blot法检测STK4、IRAK1和NF-κB蛋白的表达变化
    3.3 统计学方法
    3.4 结果
        3.4.1 DEN诱导小鼠4周后对肝脏形态学和血清学水平的影响
        3.4.2 柴胡皂苷-b2对DEN诱导小鼠12周后肝纤维化的影响
        3.4.3 柴胡皂苷-b2对DEN诱导小鼠19周后肝脏表面观及血清学指标的影响
        3.4.4 柴胡皂苷-b2对DEN诱导小鼠19周后体质量、肝功能和免疫功能的影响
        3.4.5 柴胡皂苷-b2对DEN诱导小鼠19周后肝脏组织病理学的影响
        3.4.6 柴胡皂苷-b2对DEN诱导小鼠19周后肝脏组织STK4和IRAK1表达的影响
        3.4.7 柴胡皂苷-b2对DEN诱导小鼠19周后外周血巨噬细胞内STK4和IRAK1 mRNA表达水平的影响
        3.4.8 柴胡皂苷-b2对DEN诱导小鼠19周后肝脏组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平的影响
        3.4.9 柴胡皂苷-b2对DEN诱导小鼠19周后肝脏组织内STK4、IRAK1和NF-κB蛋白表达的影响
    3.5 讨论
        3.5.1 柴胡皂苷-b2对原发性肝癌发生发展的影响
        3.5.2 柴胡皂苷-b2通过STK4/IRAK1/NF-κB通路对原发性肝癌的作用
第4章 柴胡皂苷-b2对LPS刺激RAW264.7巨噬细胞STK4/IRAK1/NF-κB通路的调控作用
    4.1 实验材料
        4.1.1 细胞株
        4.1.2 实验药品
        4.1.3 实验仪器
        4.1.4 实验试剂
        4.1.5 主要试剂配制
    4.2 实验方法
        4.2.1 细胞培养
        4.2.2 MTT法检测细胞活性
        4.2.3 Griess法测定RAW264.7巨噬细胞上清中的NO分泌量
        4.2.4 qPCR法检测细胞内IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平
        4.2.5 光学显微镜对RAW264.7巨噬细胞的形态学观察
        4.2.6 Western blot法检测细胞内STK4、IRAK1和NF-κB蛋白的表达变化
    4.3 统计学方法
    4.4 结果
        4.4.1 NO标准曲线
        4.4.2 LPS刺激RAW264.7巨噬细胞的剂量筛选
        4.4.3 柴胡皂苷-b2对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞治疗剂量筛选
        4.4.4 地塞米松对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞治疗剂量筛选
        4.4.5 柴胡皂苷-b2对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞内IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平的影响
        4.4.6 柴胡皂苷-b2对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞形态学的影响
        4.4.7 柴胡皂苷-b2对LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞内STK4、IRAK1和NF-κB蛋白表达的影响
    4.5 讨论
第5章 结论
参考文献
缩略语词汇表
致谢
攻读学位期间的研究成果


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2974827