黄芪甲苷调节miR-125a-5p抑制髓核细胞凋亡的实验研究
发布时间:2021-01-14 21:12
目的:建立髓核细胞退变的细胞模型,在前期研究基础上进一步验证miRNA-125a-5p的表达与椎间盘退变性疾病的关系,并检测髓核细胞中miRNA-125a-5p介导的信号转导通路的表达变化。通过黄芪甲苷干预IL-1诱导退变的髓核细胞,探讨黄芪甲苷对miRNA-125a-5p及其靶基因介导的信号转导通路的表达影响,揭示黄芪甲苷对髓核细胞凋亡的影响。方法:采用IL-1诱导髓核细胞的退变,试验共分为五组:(1)正常对照组;(2)IL-1β模型组;(3)IL-1β+20mg/L黄芪甲苷组;(4)IL-1β+40mg/L黄芪甲苷组;(5)IL-1β+80mg/L黄芪甲苷组;CCK-8法检测黄芪甲苷对人髓核细胞增殖的作用;RT-PCR检测黄芪甲苷对miRNA-125a-5p及其靶基因介导的信号转导通路的表达影响;Western blot检测髓核细胞中P21、Caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白表达变化结论:黄芪甲苷对促进人髓核细胞增殖作用明显,且这种增殖作用受到黄芪甲苷的浓度及干预时间的影响,其中以IL-1β+80mg/L黄芪甲苷组干预72h后对髓核细胞的增殖作用最明显。黄芪甲苷可以调控m...
【文章来源】:广州中医药大学广东省
【文章页数】:55 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究
第一节 现代医学对椎间盘退变性疾病的认识
一、椎间盘退变理论起源、发展及流行病学
二、椎间盘组织结构与功能概要
三、椎间盘退变的病因的研究进展
四、椎间盘退变疾病治疗的研究进展
五、现代医学对椎间盘退变性疾病的防治展望
第二节 中医对椎间盘退变性疾病的认识
一、中医对椎间盘退变性疾病的病因病机认识
二、中医药对椎间盘退变性疾病的防治
三、小结与展望
第三节 MICRORNA的研究进展
一、MiRNA的生物学起源
二、miR-125a的生物学作用
三、基于MiRNA的前期研究进展
四、小结与展望
第四节 黄芪甲苷的研究进展
一、中药黄芪的药理作用及临床运用
二、黄芪甲苷的研究进展
三、小结与展望
第二章 实验研究
第一节 研究背景
第二节 实验材料
一、实验对象
二、主要试验试剂与材料(见表2)
三、主要实验仪器
第三节 试验方法
一、人髓核细胞株的复苏、传代及模型构建
二、CCK-8检测细胞活力
三、Westernblot检测相关蛋白
四、PCR检测相关基因表达
五、统计学处理
第四节 实验结果
一、CCK-8检测细胞活力
二、髓核细胞中miRNA-125a-5p的表达变化
三、髓核细胞中基因表达变化
四、髓核细胞中蛋白表达变化
第五节 讨论与小结
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
附件
【参考文献】:
期刊论文
[1]补肾活血方对沙鼠增龄过程中腰椎软骨终板钙化干预作用的初步研究[J]. 朱立国,张平,宋庆慧,张万强,朱宏伟,杨丽平,朱岩,王源,李玲慧. 中国骨伤. 2017(10)
[2]黄芪甲苷治疗慢性肾脏疾病研究进展[J]. 韩海燕. 长春中医药大学学报. 2017(04)
[3]黄芪甲苷研究进展[J]. 梅周芳,施天昀,都勇,何炜,陈鸿军,揭志军. 临床医药文献电子杂志. 2017(03)
[4]miR-21通过下调ADAMTS-1表达促进大鼠肺纤维化[J]. 刘理静,尹辉明,黄民江,贺兼斌,易高众,王在岩,钱红. 细胞与分子免疫学杂志. 2016(12)
[5]黄芪甲苷的临床应用及心肌保护研究进展[J]. 李璐,习瑾昆,朱莹,贺永贵. 中国煤炭工业医学杂志. 2016(08)
[6]黄芪甲苷通过SIRT1/PGC-1α通路促进退变的髓核细胞增殖[J]. 冯仲锴,孙永强,刘汝银,岳宗进,王新立. 西安交通大学学报(医学版). 2016(05)
[7]黄芪甲苷对Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜细胞和人软骨细胞共培养体系MMP-7、CTX-Ⅱ、COMP的调控作用[J]. 王德刚,许传勇,姜玉祥,阚卫兵,肖志锋,姚丽,刘婉,谢殿洪,汤豪,张玉婷. 中国中医急症. 2016(05)
[8]椎旁神经阻滞对中医综合治疗腰椎间盘突出症的增效作用[J]. 张晓磊,薛小军,杨智强,郑文亮. 牡丹江医学院学报. 2016(01)
[9]黄芪甲苷联用维生素D3对二维回转培养大鼠原代成骨细胞增殖的影响[J]. 王婷梅,梅其炳,曲丽娜,李莹辉. 化学与生物工程. 2016(02)
[10]用中药离子导入疗法和中医正骨手法治疗腰椎间盘突出症的效果探析[J]. 刘继巍. 当代医药论丛. 2015(23)
本文编号:2977558
【文章来源】:广州中医药大学广东省
【文章页数】:55 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
Abstract
引言
第一章 文献研究
第一节 现代医学对椎间盘退变性疾病的认识
一、椎间盘退变理论起源、发展及流行病学
二、椎间盘组织结构与功能概要
三、椎间盘退变的病因的研究进展
四、椎间盘退变疾病治疗的研究进展
五、现代医学对椎间盘退变性疾病的防治展望
第二节 中医对椎间盘退变性疾病的认识
一、中医对椎间盘退变性疾病的病因病机认识
二、中医药对椎间盘退变性疾病的防治
三、小结与展望
第三节 MICRORNA的研究进展
一、MiRNA的生物学起源
二、miR-125a的生物学作用
三、基于MiRNA的前期研究进展
四、小结与展望
第四节 黄芪甲苷的研究进展
一、中药黄芪的药理作用及临床运用
二、黄芪甲苷的研究进展
三、小结与展望
第二章 实验研究
第一节 研究背景
第二节 实验材料
一、实验对象
二、主要试验试剂与材料(见表2)
三、主要实验仪器
第三节 试验方法
一、人髓核细胞株的复苏、传代及模型构建
二、CCK-8检测细胞活力
三、Westernblot检测相关蛋白
四、PCR检测相关基因表达
五、统计学处理
第四节 实验结果
一、CCK-8检测细胞活力
二、髓核细胞中miRNA-125a-5p的表达变化
三、髓核细胞中基因表达变化
四、髓核细胞中蛋白表达变化
第五节 讨论与小结
结语
参考文献
附录
在校期间发表论文情况
致谢
附件
【参考文献】:
期刊论文
[1]补肾活血方对沙鼠增龄过程中腰椎软骨终板钙化干预作用的初步研究[J]. 朱立国,张平,宋庆慧,张万强,朱宏伟,杨丽平,朱岩,王源,李玲慧. 中国骨伤. 2017(10)
[2]黄芪甲苷治疗慢性肾脏疾病研究进展[J]. 韩海燕. 长春中医药大学学报. 2017(04)
[3]黄芪甲苷研究进展[J]. 梅周芳,施天昀,都勇,何炜,陈鸿军,揭志军. 临床医药文献电子杂志. 2017(03)
[4]miR-21通过下调ADAMTS-1表达促进大鼠肺纤维化[J]. 刘理静,尹辉明,黄民江,贺兼斌,易高众,王在岩,钱红. 细胞与分子免疫学杂志. 2016(12)
[5]黄芪甲苷的临床应用及心肌保护研究进展[J]. 李璐,习瑾昆,朱莹,贺永贵. 中国煤炭工业医学杂志. 2016(08)
[6]黄芪甲苷通过SIRT1/PGC-1α通路促进退变的髓核细胞增殖[J]. 冯仲锴,孙永强,刘汝银,岳宗进,王新立. 西安交通大学学报(医学版). 2016(05)
[7]黄芪甲苷对Wnt/β-catenin信号通路活化的人滑膜细胞和人软骨细胞共培养体系MMP-7、CTX-Ⅱ、COMP的调控作用[J]. 王德刚,许传勇,姜玉祥,阚卫兵,肖志锋,姚丽,刘婉,谢殿洪,汤豪,张玉婷. 中国中医急症. 2016(05)
[8]椎旁神经阻滞对中医综合治疗腰椎间盘突出症的增效作用[J]. 张晓磊,薛小军,杨智强,郑文亮. 牡丹江医学院学报. 2016(01)
[9]黄芪甲苷联用维生素D3对二维回转培养大鼠原代成骨细胞增殖的影响[J]. 王婷梅,梅其炳,曲丽娜,李莹辉. 化学与生物工程. 2016(02)
[10]用中药离子导入疗法和中医正骨手法治疗腰椎间盘突出症的效果探析[J]. 刘继巍. 当代医药论丛. 2015(23)
本文编号:2977558
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