大孔树脂纯化淫羊藿中朝藿定与淫羊藿苷工艺研究
发布时间：2021-02-25 05:22
目的考察大孔树脂纯化淫羊藿中朝藿定与淫羊藿苷的最佳工艺条件,并且对最佳工艺富集部位进行初步表征。方法以朝藿定A1、A、B、C及淫羊藿苷为检测指标,采用静态吸附实验对5种大孔树脂进行筛选,通过动态吸附实验考察上柱液质量浓度、最大上样量、上样体积流量、水洗体积、除杂乙醇及洗脱乙醇体积分数、除杂乙醇及洗脱乙醇体积、径高比来优选最佳工艺条件,最后以UPLC-Q-TOF/MS、HPLC、紫外分光光度法对最佳工艺富集部位进行表征。结果确定最佳大孔树脂型号为AB-8,柱径高比为1∶7,以生药0.5 g/mL的淫羊藿上柱液上样6 BV,以6 BV/h的体积流量进行动态吸附,以5 BV水和5 BV 20%乙醇除杂,以6 BV 50%乙醇洗脱,除杂及洗脱体积流量均为6 BV/h。纯化后总黄酮质量分数为63.29%,朝藿定A1、A、B、C及淫羊藿苷总量为40.48%,朝藿定A1、A、B、C及淫羊藿苷质量分数分别为1.63%、2.52%、16.36%、5.51%、14.46%。结论经验证实验,AB-8型大孔树脂纯化淫羊藿中朝藿定与淫羊藿苷的工艺稳定、合理、可行。经化学表征,富集部位主要为黄酮类成分,且黄酮类成...
【文章来源】：中草药. 2020,51(17)北大核心
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
混合对照品(A)和供试品(B)的HPLC图
吸附后的树脂加入100 mL 70%乙醇，室温浸泡24 h，期间振摇数次，抽滤至干，得解析液定容至500 mL,HPLC法测定朝藿定及淫羊藿苷5种成分的解析量，并计算解析率（解析率=解析量/吸附量），结果见表2及图2。结果表明，不同极性大孔吸附树脂对朝藿定及淫羊藿苷5种成分均有一定的吸附能力，其中D101（非极性）、AB-8（弱极性）、HPD-400（中极性）型大孔吸附树脂对5种成分的吸附能力强于HPD-600（极性）及HPD-826（氢键）型大孔吸附树脂，且AB-8型大孔吸附树脂对5种成分的吸附能力最好；D101型大孔吸附树脂对朝藿定A1的解析能力较弱，其他极性大孔吸附树脂对5种成分均能达到基本完全解析。因此，综合不同极性大孔吸附树脂的吸附及解析效果，选择AB-8型大孔吸附树脂进行下一步研究。2.4.4 上柱液质量浓度及最大上样量考察
由不同质量浓度上柱液的泄漏曲线（图3）可知，质量浓度为生药0.2 g/mL时最大上样量为12BV，质量浓度为生药0.5 g/mL时最大上样量为6BV，质量浓度为生药0.8 g/mL时最大上样量为3.5BV。不同质量浓度上柱液最大上样时的吸附量见图4，最大吸附量随质量浓度的增大而减低，可能与随着上柱液质量浓度增大，黏稠度增大不易充分吸附有关，但质量浓度为生药0.5 g/mL时的最大吸附量与质量浓度为生药0.2 g/mL时无显著性差异。因此，从节约时间等角度考虑，确定上柱液质量浓度为生药0.5 g/mL，最大上样量为6 BV。图4 不同质量浓度上柱液最大上样量时的吸附量(n=2)
【参考文献】：
期刊论文
[1]UPLC-Q-TOF-MS/MS法定性分析淫羊藿中的化学成分[J]. 马文娟,姚广哲,贾琪,欧阳慧子,常艳旭,何俊. 中药材. 2019(07)
[2]淫羊藿苷激活Nrf2/HO-1信号通路减轻自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤研究[J]. 尤旭,赵海霞,杨思琪,马琼艳,张艳,杨圆,叶勇,袁丁,张长城. 中草药. 2019(12)
[3]淫羊藿化学成分分析及其药代动力学研究进展[J]. 欧阳慧子,何俊. 天津中医药大学学报. 2019(03)
[4]淫羊藿苷药理作用研究进展[J]. 路宇仁,陈昳冰,崔元璐,王强松. 中国实验方剂学杂志. 2018(17)
[5]大孔吸附树脂在天然产物分离纯化中的应用[J]. 刘丹,吴叶红,李玮桓,张嫚丽,史清文. 中草药. 2016(15)
[6]相同摩尔浓度下淫羊藿苷及朝藿定C单体在斑马鱼骨质疏松模型中的活性研究[J]. 黄觅,冯晶,钟再选,何舜平,舒玉琴,贺江燕,王瑛. 中国中西医结合杂志. 2016(08)
[7]试谈中药提取工艺中使用大孔吸附树脂纯化的研究要求与评价[J]. 宋丹,张永文. 中国新药杂志. 2015(07)
[8]淫羊藿的化学成分及质量控制研究进展[J]. 袁航,曹树萍,陈抒云,过立农,郑健,林瑞超. 中草药. 2014(24)
[9]二维斑马鱼模型联合色谱技术评价朝藿定A及其代谢物宝藿苷I抗骨质疏松活性[J]. 詹扬,韦英杰,孙娥,徐凤娟,贾晓斌. 药学学报. 2014(06)
[10]基于淫羊藿黄酮类化合物的体内代谢阐述其抗骨质疏松药效物质基础[J]. 蒋俊,崔莉,孙娥,李杰,成旭东,丁淑敏,封亮,贾晓斌. 中草药. 2014(05)
本文编号：3050509
【文章来源】：中草药. 2020,51(17)北大核心
【文章页数】：9 页
【部分图文】：
混合对照品(A)和供试品(B)的HPLC图
吸附后的树脂加入100 mL 70%乙醇，室温浸泡24 h，期间振摇数次，抽滤至干，得解析液定容至500 mL,HPLC法测定朝藿定及淫羊藿苷5种成分的解析量，并计算解析率（解析率=解析量/吸附量），结果见表2及图2。结果表明，不同极性大孔吸附树脂对朝藿定及淫羊藿苷5种成分均有一定的吸附能力，其中D101（非极性）、AB-8（弱极性）、HPD-400（中极性）型大孔吸附树脂对5种成分的吸附能力强于HPD-600（极性）及HPD-826（氢键）型大孔吸附树脂，且AB-8型大孔吸附树脂对5种成分的吸附能力最好；D101型大孔吸附树脂对朝藿定A1的解析能力较弱，其他极性大孔吸附树脂对5种成分均能达到基本完全解析。因此，综合不同极性大孔吸附树脂的吸附及解析效果，选择AB-8型大孔吸附树脂进行下一步研究。2.4.4 上柱液质量浓度及最大上样量考察
由不同质量浓度上柱液的泄漏曲线（图3）可知，质量浓度为生药0.2 g/mL时最大上样量为12BV，质量浓度为生药0.5 g/mL时最大上样量为6BV，质量浓度为生药0.8 g/mL时最大上样量为3.5BV。不同质量浓度上柱液最大上样时的吸附量见图4，最大吸附量随质量浓度的增大而减低，可能与随着上柱液质量浓度增大，黏稠度增大不易充分吸附有关，但质量浓度为生药0.5 g/mL时的最大吸附量与质量浓度为生药0.2 g/mL时无显著性差异。因此，从节约时间等角度考虑，确定上柱液质量浓度为生药0.5 g/mL，最大上样量为6 BV。图4 不同质量浓度上柱液最大上样量时的吸附量(n=2)
【参考文献】：
期刊论文
[1]UPLC-Q-TOF-MS/MS法定性分析淫羊藿中的化学成分[J]. 马文娟,姚广哲,贾琪,欧阳慧子,常艳旭,何俊. 中药材. 2019(07)
[2]淫羊藿苷激活Nrf2/HO-1信号通路减轻自然衰老大鼠睾丸生殖细胞DNA损伤研究[J]. 尤旭,赵海霞,杨思琪,马琼艳,张艳,杨圆,叶勇,袁丁,张长城. 中草药. 2019(12)
[3]淫羊藿化学成分分析及其药代动力学研究进展[J]. 欧阳慧子,何俊. 天津中医药大学学报. 2019(03)
[4]淫羊藿苷药理作用研究进展[J]. 路宇仁,陈昳冰,崔元璐,王强松. 中国实验方剂学杂志. 2018(17)
[5]大孔吸附树脂在天然产物分离纯化中的应用[J]. 刘丹,吴叶红,李玮桓,张嫚丽,史清文. 中草药. 2016(15)
[6]相同摩尔浓度下淫羊藿苷及朝藿定C单体在斑马鱼骨质疏松模型中的活性研究[J]. 黄觅,冯晶,钟再选,何舜平,舒玉琴,贺江燕,王瑛. 中国中西医结合杂志. 2016(08)
[7]试谈中药提取工艺中使用大孔吸附树脂纯化的研究要求与评价[J]. 宋丹,张永文. 中国新药杂志. 2015(07)
[8]淫羊藿的化学成分及质量控制研究进展[J]. 袁航,曹树萍,陈抒云,过立农,郑健,林瑞超. 中草药. 2014(24)
[9]二维斑马鱼模型联合色谱技术评价朝藿定A及其代谢物宝藿苷I抗骨质疏松活性[J]. 詹扬,韦英杰,孙娥,徐凤娟,贾晓斌. 药学学报. 2014(06)
[10]基于淫羊藿黄酮类化合物的体内代谢阐述其抗骨质疏松药效物质基础[J]. 蒋俊,崔莉,孙娥,李杰,成旭东,丁淑敏,封亮,贾晓斌. 中草药. 2014(05)
本文编号：3050509
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