丹参地上部分挥发油抗阿尔茨海默病作用研究

发布时间：2021-05-12 06:12

　　目的:优化丹参地上部分挥发油提取工艺,分析丹参地上部分挥发油成分组成及其总萜类含量测定,体外抗氧化实验探究丹参地上部分挥发油抗氧化能力,最后通过体内AD小鼠模型药理实验,对丹参地上部分挥发油的抗AD活性及其作用机制进行探究。以期寻找新的潜在抗AD药,促进丹参植株资源的综合开发利用。方法:采用单因素实验设计和正交试验设计,优化水蒸气蒸馏法提取丹参地上部分挥发油提取工艺;以GC/GC-MS技术分析丹参地上部分挥发油成分组成,以α-石竹烯为对照品,用5%香草醛-冰醋酸溶液和高氯酸的显色原理,建立丹参地上部分挥发油总萜类含量测定方法,对丹参地上部分挥发油总萜类含量进行测定;清除DPPH自由基、三氯乙酸还原法测定丹参地上部分挥发油体外抗氧化活性;采用腹腔注射D-gal和灌胃给药AlCl₃的方法建造AD小鼠模型,探究丹参地上部分挥发油抗AD作用,分别从行为学水平上应用Morris水迷宫实验和探针试验测定实验AD模型小鼠的学习能力和空间记忆能力,从蛋白水平上应用蛋白印迹分析（WB）和免疫组化分析（IHC）测定小鼠脑内与AD发病相关的Aβ,GFAP,BACE-1和NEP含量,从分... 

【文章来源】：山东中医药大学山东省

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
提要
Abstract
引言
第一章 丹参地上部分挥发油提取工艺优化
    1 材料与仪器
        1.1 材料
        1.2 仪器与试剂
    2 实验方法
        2.1 丹参地上部分挥发油提取工艺
        2.2 单因素法优化丹参地上部分挥发油提取工艺
        2.3 正交试验优化丹参地上部分挥发油提取工艺参数
        2.4 数据处理
    3 结果与分析
        3.1 单因素优化丹参地上部分挥发油提取工艺确定
            3.1.1 不同提取溶液对丹参地上部分挥发油收率影响
            3.1.2 浸渍时间对丹参地上部分挥发油收率的影响
            3.1.3 蒸馏时间对丹参地上部分挥发油收率影响
            3.1.4 料液比对丹参地上部分挥发油收率的影响
        3.2 正交试验结果
        3.3 验证实验
    4 讨论与小结
第二章 丹参地上部分挥发油成分分析及总萜类含量测定
    1 材料
        1.1 药材
        1.2 仪器与试剂
    2 实验方法
        2.1 丹参地上部分挥发油的提取
        2.2 GC-MS条件
        2.3 总萜类含量的测定
            2.3.1 标准溶液制备
            2.3.2 样品溶液制备
            2.3.3 测定波长的选择
            2.3.4 方法学考察
                2.3.4.1 线性关系考察
                2.3.4.2 重复性检验
                2.3.4.3 精密度检验
                2.3.4.4 稳定性试验
                2.3.4.5 加样回收试验
    3 结果与分析
        3.1 丹参地上部分挥发油GC-MS分析
        3.2 丹参地上部分挥发油总萜类含量测定
    4 讨论与小结
第三章 丹参地上部分挥发油体外抗氧化活性研究
    1 材料
        1.1 药材
        1.2 仪器与试剂
    2 实验方法
        2.1 丹参地上部分挥发油的提取
        2.2 三氯乙酸法测定丹参地上部分挥发油的还原能力
        2.3 丹参地上部分挥发油对DPPH自由基清除能力的测定
    3 结果与分析
        3.1 丹参地上部分挥发油还原能力的测定
        3.2 丹参地上部分挥发油清除DPPH自由基能力测定
    4 讨论与小结
第四章 丹参地上部分挥发油体内抗AD活性研究
    1 材料
        1.1 药材
        1.2 仪器
        1.3 小鼠
        1.4 试剂
    2 实验方法
        2.1 丹参地上部分挥发油的提取
        2.2 动物实验
        2.3 莫里斯水迷宫实验
        2.4 生物化学实验
        2.5 免疫组化实验
        2.6 蛋白印记分析
            2.6.1 脑组织总蛋白提取与蛋白浓度测定
            2.6.2 SDS-PAGE凝胶电泳
            2.6.3 转膜
            2.6.4 封闭与孵育
            2.6.5 显影
        2.7 RT-PCR
        2.8 数据分析
    3 结果与分析
        3.1 丹参地上部分挥发油对AD小鼠学习记忆能力的影响
        3.2 丹参地上部分挥发油对AD小鼠脑内相关活性分子的影响
        3.3 蛋白水平应用免疫组化分析考察AD小鼠脑内Aβ和GFAP含量
        3.4 蛋白水平应用WB分析考察AD小鼠脑内AD相关蛋白表达影响
        3.5 基因水平应用RT-PCR技术考察AD小鼠脑内相关炎症因子和衰老因子表达
    4 讨论与小结
第五章 结语
参考文献
第六章 文献综述
    参考文献
致谢
论文著作


【参考文献】：
期刊论文
[1]丹参茎叶提取物抗氧化活性物质基础与量效关系研究[J]. 曾慧婷,宿树兰,沙秀秀,尚尔鑫,朱振华,郭盛,严辉,钱大玮,段金廒.  中草药. 2017(22)
[2]Dissecting the hypothalamic pathways that underlie innate behaviors[J]. Xi Zha,Xiaohong Xu.  Neuroscience Bulletin. 2015(06)
[3]丹参叶的化学成分研究[J]. 史国玉,郭庆梅,周凤琴.  山西大学学报(自然科学版). 2015(04)
[4]丹参地上部分糖类成分的动态变化[J]. 葛婷,郑云枫,崔健,夏彦铭,黄利,彭国平.  中国现代中药. 2014(12)
[5]生长期内丹参不同部位中水苏糖含量的动态变化[J]. 郑云枫,葛婷,夏彦铭,邹立思,崔健,彭国平.  南京中医药大学学报. 2014(06)
[6]丹参地上部分正丁醇萃取部位化学成分检测及其抗脑缺血研究[J]. 张寒,贾敏,孙艳平,杨颖.  西北农业学报. 2014(04)
[7]阿尔茨海默病200年[J]. 纪勇.  中国现代神经疾病杂志. 2014(03)
[8]正交试验优选丹参茎叶中丹参素和丹酚酸B的提取工艺研究[J]. 刁保忠,靳维荣,张文周.  中华中医药杂志. 2013(09)
[9]HPLC-ELSD同时测定丹参注射液中4种糖类成分的含量[J]. 黄利,葛婷,夏蕴琼,杨锦强,郑云枫,朱立静,刘将.  中国现代中药. 2013(06)
[10]丹参地上部分抗脑缺血活性部位筛选[J]. 张寒,贾敏,杨颖.  中药药理与临床. 2013(03)

硕士论文
[1]丹参茎叶资源化学研究与药材质量标准的建立[D]. 沙秀秀.南京中医药大学 2016
[2]中国丹参挥发性成分评价与活性分析[D]. 周晓希.陕西师范大学 2014
[3]丹参叶茶加工工艺及其抗氧化性能研究[D]. 贾士军.山东农业大学 2012
[4]野生丹参地上部分抗氧化有效成分的提取分离与鉴定[D]. 于鹏飞.山东中医药大学 2009
[5]丹参地上部分化学成分及抗氧化活性研究[D]. 仲惟燕.山东中医药大学 2009



本文编号：3182893