基于p38MAPK/Nrf2/HO-1通路探讨清达颗粒对脂多糖诱导活化的小胶质细胞抗氧化作用研究

发布时间：2023-03-19 09:39

　　目的观察清达颗粒(QDG)对脂多糖(LPS)诱导活化的小胶质细胞抗氧化作用,探讨其与p38MAPK/Nrf2/HO-1抗氧化信号通路的可能联系。方法体外培育BV-2小胶质细胞,采用MTT法筛选合适的药物浓度,之后采用LPS(1μg/mL)诱导炎症模型,将其分为对照组、LPS组、LPS+QDG组,并LPS+QDG组设置31.25μg/mL、62.50μg/mL、125.00μg/mL 3个质量浓度亚组,检测各组细胞活性氧(ROS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛(MDA)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的表达情况,Western Blot法检测磷酸化p38MAPK(p-p38)、p38MAPK(p38)、转录因子Nrf2、细胞核内Nrf2、血红素加氧酶-1(HO-1)的蛋白表达情况以及p38抑制剂干预LPS诱导的炎症细胞HO-1蛋白的表达情况。结果 LPS+QDG组ROS、TNF-α、MDA的释放抑制受到一定程度上促进GSH-Px的释放,并升高p-p38、细胞核内Nrf2以及HO-1蛋白的表达。p38抑制剂干预后下调了LPS+QDG组HO-1蛋白的表达。结论清达颗粒可有效减...

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 药物与细胞株
    1.2 实验试剂
    1.3 实验仪器
    1.4 清达颗粒母液的制备
    1.5 BV-2细胞培养与传代
        1.5.1 MTT法检测不同浓度LPS对BV-2细胞的细胞活力影响
        1.5.2 MTT法检测不同浓度清达颗粒对BV-2细胞的细胞活力影响
        1.5.3 MTT法检测清达颗粒对LPS干预的BV-2细胞的细胞活力影响
        1.5.4 ROS含量检测
        1.5.5 ELISA检测细胞上清液中TNF-α浓度
        1.5.6 MDA含量测定
        1.5.7 GSH-Px含量测定
        1.5.8 Western Blot法检测Nrf2、细胞核内Nrf2、p38、p-p38、HO-1蛋白表达及p38抑制剂(LY2228820)干预LPS诱导的BV-2细胞后HO-1蛋白的表达情况
    1.6 统计学处理
2 结 果
    2.1 不同浓度LPS对BV-2细胞的细胞活力影响
    2.2 不同浓度清达颗粒对BV-2细胞的细胞活力影响
    2.3 清达颗粒对LPS干预的BV-2细胞的细胞活力影响
    2.4 清达颗粒对LPS干预的BV-2细胞中ROS含量影响
    2.5 清达颗粒对LPS干预的BV-2细胞上清液中TNF-α浓度影响
    2.6 清达颗粒对LPS干预的BV-2细胞上清液中MDA含量的影响
    2.7 清达颗粒对LPS干预的BV-2细胞中GSH-Px含量的影响
    2.8 清达颗粒对LPS干预的BV-2细胞的Nrf2、细胞核内Nrf2、p38、p-p38、HO-1蛋白表达的影响以及p38抑制剂作用下清达颗粒干预LPS诱导的BV-2细胞HO-1蛋白表达的影响
3 讨 论



本文编号：3765020