基于斑马鱼模型的消癌平发育毒性和抗炎作用研究

发布时间：2023-05-17 21:15

　　目的:1、比较消癌平及其单体通关藤皂苷G、H、I的胚胎发育毒性大小,阐述消癌平的胚胎发育毒性机制;2、评价消癌平的抗肿瘤活性和比较消癌平及其单体通关藤皂苷G、H、I的抗炎活性大小;3、通关藤皂苷H的毒/效的相关性分析。方法:1、发育毒性研究。(1)胚胎发育量-毒关系。将发育至受精后6小时(6 hours post fertilization,hpf)的野生型AB系斑马鱼胚胎,按照预实验设定不同暴露浓度,持续暴露120小时,分别于暴露后24、48、72、96、120小时(hour post exposure,hpe)观察并记录死亡率和孵化率。消癌平和通关藤皂苷G、H、I均按照上述同样方法处理。(2)消癌平发育毒性机制研究。消癌平暴露6 hpf的胚胎持续120小时,进行斑马鱼畸形率的统计、体长测量、心率测定、形态评分和行为学检测,同样时间点收集样本用于病理切片观察心脏、肝脏的变化,透射扫描电镜观察心肌纤维和心肌细胞内细胞器的变化,实时定量聚合酶链式反应(Real-time Quantitative PCR,RT-PCR)检测氧化应激、内质网应激、凋亡和wnt/β-cetanin通路相关基因...

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【学位级别】：硕士

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前言
第一章 消癌平和通关藤皂苷G、H和I的发育毒性研究
    第一节 消癌平和通关藤皂苷G、H和I对斑马鱼胚胎的发育毒性研究
        1 材料与方法
            1.1 材料与设备
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 通关藤皂苷G、H、I的含量测定结果
            2.2 消癌平暴露后对斑马鱼胚胎发育毒性的影响
            2.3 通关藤皂苷G的对斑马鱼胚胎发育毒性的影响
            2.4 通关藤皂苷H对斑马鱼胚胎发育毒性的影响
            2.5 通关藤皂苷I对斑马鱼胚胎发育毒性的影响
        3 讨论
        4 结论
    第二节 消癌平对斑马鱼胚胎的发育毒性作用机制研究
        1 材料与方法
            1.1 材料与设备
            1.2 方法
        2 结果
            2.1 消癌平连续暴露120h后对斑马鱼发育的影响
            2.2 消癌平连续暴露120h后对斑马鱼行为学的影响
            2.3 消癌平连续暴露120h后对斑马鱼体内ROS的含量检测
            2.4 消癌平连续暴露120h后对斑马鱼体内MDA、CAT、GSH和T-SOD的检测
            2.5 从组织病理切片角度考察消癌平对斑马鱼不同器官的毒性
            2.6 消癌平连续暴露120h后对斑马鱼产生的心脏毒性
            2.7 消癌平连续暴露120h后对斑马鱼发育毒性相关基因表达的影响
                2.7.1 内质网应激相关基因的变化
                2.7.2 氧化应激相关基因的变化
                2.7.3 凋亡相关基因的变化
                2.7.4 wnt通路相关基因的变化
        3 讨论
        4 结论
第二章 消癌平和通关藤皂苷G、H、I的抗炎作用研究
    1 材料与方法
        1.1 材料与设备
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 染色前后MDA-MB-231细胞形态图
        2.2 注射肿瘤细胞后48小时的斑马鱼形态
        2.3 消癌平抑制斑马鱼体内肿瘤细胞迁移
        2.4 消癌平和通关藤皂苷G、H、I的抗炎活性评价
    3 讨论
    4 结论
第三章 通关藤皂苷H的毒/效相关性研究
    1 材料与方法
        1.1 材料与设备
        1.2 方法
    2 结果
        2.1 TH对正常生理状态下斑马鱼幼鱼的发育影响
        2.2 TH对LPS诱导的炎症状态下斑马鱼幼鱼的发育影响
        2.3 TH的毒效相关性
        2.4 TH的抗炎效应
        2.5 TH对抗炎相关基因的表达影响
    3 讨论
    4 结论
参考文献
展望
全文创新点
综述
    参考文献
致谢
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果
个人简历



本文编号：3818016