丹蛭降糖胶囊调节TLR4/MyD88/NF-kB信号通路防治糖尿病心肌损伤的机制研究

发布时间：2025-01-17 13:16

　　目的观察丹蛭降糖胶囊保护2型糖尿病模型大鼠心肌损伤的作用;完善TLR4-MyD88-NF-κB信号通路调节糖尿病心肌损伤的病理机制;揭示丹蛭降糖胶囊防治糖尿病心肌损伤的分子机制。方法在体动物实验,以高脂饲料联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法复制2型糖尿病大鼠模型,丹蛭降糖胶囊分别按照270、540、1080 mg/kg三个剂量组连续干预8周,通过观察丹蛭降糖胶囊对模型大鼠一般体征(体重、饮水量、摄食量)、血糖和血脂水平、血流动力学指标、心肌组织病理形态学(HE和Masson染色)的影响,研究丹蛭降糖胶囊防治2型糖尿病及并发心肌损伤的药物效应;借助Western blot、RT-qPCR、免疫组化等现代分子生物学实验方法和技术,研究模型大鼠心肌组织TLR4-MyD88-NF-κB信号通路相关蛋白和基因表达及下游相关炎症因子的变化规律,观察模型大鼠心肌组织凋亡的变化,并研究丹蛭降糖胶囊的干预作用。体外细胞实验,通过体外高糖诱导H9c2心肌细胞损伤模型,TLR4特异性阻断剂TAK-242及丹蛭降糖胶囊含药血清干预后,采用MTT及流式细胞术观察高糖对心肌细胞活力及凋亡率...

【文章页数】：105 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
英文缩略词表
前言
第一部分 丹蛭降糖胶囊防治糖尿病心肌病的药效学研究
    1.材料与方法
        1.1 实验动物
        1.2 药物
        1.3 试剂
        1.4 主要仪器
    2.实验方法
        2.1 2型糖尿病模型大鼠的制备
        2.2 动物分组和给药
        2.3 大鼠一般体征观察
        2.4 大鼠血糖水平监测
        2.5 大鼠血脂检测
        2.6 大鼠血流动力学指标检测
        2.7 大鼠心脏重量指数检测
        2.8 大鼠心肌组织病理学检测
        2.9 Western blot 法检测心肌组织 TLR4-MyD88-NF-κB 信号通路相关蛋白表达
        2.10 RT-qPCR 法检测心肌组织 TLR4-MyD88-NF-κB 信号通路相关基因表达
        2.11 ELISA 法检测大鼠血清 TNF-α、IL-1β、IL-6 的含量
        2.12 TUNEL法检测大鼠心肌组织细胞凋亡
        2.13 统计处理
    3.实验结果
        3.1 丹蛭降糖胶囊对大鼠一般体征的影响
        3.2 丹蛭降糖胶囊对模型大鼠血糖的影响
        3.3 丹蛭降糖胶囊对模型大鼠血脂的影响
        3.4 丹蛭降糖胶囊对模型大鼠血流动力学指标的影响
        3.5 丹蛭降糖胶囊对模型大鼠心脏重量指数的影响
        3.6 丹蛭降糖胶囊对模型大鼠心肌组织病理学的影响
        3.7 模型大鼠心肌组织 TLR4-MyD88-NF-κB 信号通路相关蛋白表达的变化及丹蛭降糖胶囊的干预作用
        3.8 模型大鼠心肌组织 TLR4-MyD88-NF-κB 信号通路相关基因表达的变化及丹蛭降糖胶囊的干预作用
        3.9 模型大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量的变化及丹蛭降糖胶囊的干预作用
        3.10 模型大鼠心肌细胞凋亡的变化及丹蛭降糖胶囊的干预作用
    4.讨论
        4.1 丹蛭降糖胶囊防治糖尿病心肌病的中医理论分析
        4.2 实验动物模型的选择
        4.3 阳性药的选择
        4.4 免疫炎症反应与糖尿病心肌病
        4.5 实验结果分析
第二部分 丹蛭降糖胶囊调节 TLR4-MyD88-NF-κB 信号通路抗高糖诱导心肌细胞凋亡的机制研究
    1.材料与方法
        1.1 实验动物、细胞与药物
        1.2 试剂
        1.3 仪器
    2.实验方法
        2.1 丹蛭降糖胶囊含药血清制备
        2.2 H9c2细胞培养
        2.3 不同浓度葡萄糖对H9c2心肌细胞损伤的影响
        2.4 高糖诱导H9c2心肌细胞损伤模型的制备
        2.5 分组及干预
        2.6 流式细胞术(AnnexinV/PI 双染法)检测 H9c2 心肌细胞凋亡率
        2.7 Western blot 检测蛋白的表达
        2.8 RT-qPCR 检测 mRNA 的表达
        2.9 统计处理
    3.实验结果
        3.1 不同浓度葡萄糖对H9c2心肌细胞损伤的影响
        3.2 高糖诱导 H9c2心肌细胞TLR4-MyD88-NF-κB信号通路蛋白表达的变化及丹蛭降糖胶囊的影响
        3.3 TLR4-MyD88-NF-κB信号通路调节高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡作用及丹蛭降糖胶囊的干预效应
        3.4 丹蛭降糖胶囊干预高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的分子机制
    4.讨论
        4.1 高血糖与心肌细胞凋亡
        4.2 实验结果分析
全文总结及展望
参考文献
综述
    参考文献
个人简介
攻读学位期间发表论文、主持课题及获奖情况等
致谢



本文编号：4028115