SSAT通过AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭

发布时间：2021-12-18 03:32

　　实验背景:结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤疾病,有着较高的发病率和死亡率,其排名仅次于胃癌、食管癌和原发性肝癌。研究结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制是抗癌治疗过程中的一项长期任务。在癌症的治疗研究中,人们发现在癌症患者体内一类阳离子小分子化合物-多胺的代谢功能发生紊乱,因此多胺成为治疗性干预中具有强吸引力的靶标。精脒/精胺-N1-乙酰转移酶（Spermidine/Spermine-N1-acetylransferase,SSAT）是多胺代谢途径的第一个限速酶,严格调控着细胞内的多胺水平,因而成为了多胺与肿瘤关系研究中的一个热点。然而,SSAT对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制仍不完全清楚。实验目的:本文以结直肠癌细胞（HCT 116、HT-29）为研究对象,主要研究SSAT对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。实验方法:首先用蛋白印迹检测法（Western blot）实验方法检测结直肠癌细胞HCT 116和HT-29中SSAT蛋白的表达情况。然后采用细胞转染的方法使细胞内SSAT的蛋白水平上调或者下调。采用高效液相色谱分析法（High Pertormanc... 

【文章来源】：河南大学河南省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 绪论
第二章 试剂、材料和仪器
    2.1 主要试剂及材料
    2.2 细胞株与菌株
    2.3 质粒、小干扰RNA与引物
    2.4 试剂及主要溶液的配制
        2.4.1 细胞及细菌培养溶液配制
        2.4.2 HPLC所用试剂的配制
        2.4.3 蛋白印迹实验所用试剂的配制
    2.5 主要仪器
第三章 实验方法
    3.1 细胞株的培养
    3.2 质粒DNA的转化及提取
    3.3 细胞转染实验
    3.4 单克隆筛选
    3.5 细胞迁移实验
    3.6 细胞侵袭实验
    3.7 伤口愈合实验
    3.8 细胞生长曲线的测定
    3.9 细胞克隆形成分析
    3.10 HPLC法检测细胞内多胺含量
    3.11 蛋白提取及浓度测定
    3.12 蛋白印迹法检测细胞内蛋白水平方法
    3.13 统计学分析
第四章 实验结果
    4.1 SSAT高表达和低表达细胞株的构建
    4.2 SSAT对结直肠癌细胞增殖能力的影响
    4.3 SSAT对结直肠癌细胞的迁移的影响
    4.4 SSAT对结直肠癌细胞侵袭的影响
    4.5 SSAT对AKT/GSK-3β通路的影响
    4.6 SSAT通过改变多胺含量来调节AKT/GSK-3β活性
    4.7 SSAT对WNT信号通路的影响
    4.8 GSK-3β抑制剂逆转SSAT引起的细胞侵袭抑制作用
结论
讨论
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Role of epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer initiation and progression[J]. Zhao Peng,Chen-Xiao Wang,Er-Hu Fang,Guo-Bin Wang,Qiang Tong.  World Journal of Gastroenterology. 2014(18)
[2]Activation of Rac1-PI3K/Akt is required for epidermal growth factorinduced PAK1 activation and cell migration in MDA-MB-231 breast cancer cells[J]. Yu Yang a,Jun Du a,Zhenzhen Hu a,Jiaojing Liu a,Yinhui Tian a,Yichao Zhu b,Le Wang a,Luo Gu b a Department of Physiology,b Cancer Center,Nanjing Medical University,Nanjing,Jiangsu 210029,China..  Journal of Biomedical Research. 2011(04)
[3]β-catenin up-regulates the expression of cyclinD1, c-myc and MMP-7 in human pancreatic cancer: Relationships with carcinogenesis and metastasis[J]. Yu-Jun Li, Zhi-Min Wei, Yun-Xiao Meng, Xiang-Rui Ji, Department of Pathology, The Affiliated Hospital of Medical College, Qingdao University, Qingdao 266003, Shandong Province, China.  World Journal of Gastroenterology. 2005(14)



本文编号：3541543