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AcMNPV p95基因一段339 bp序列在病毒复制中的作用

发布时间:2018-07-03 21:15

  本文选题:杆状病毒 + p ; 参考:《复旦学报(自然科学版)》2017年02期


【摘要】:杆状病毒苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)的p95基因编码的P95蛋白是病毒核衣壳的组成部分,也是虫体经口感染相关因子PIF(Per os Infectivity Factor)复合体的组成部分.前期研究表明,完整的P95蛋白对病毒的复制是非必需的,其中一段450bp的序列可以部分弥补p95基因的作用.本研究将p95基因一段339bp的片段(Core339,AcMNPV基因组位置:69 576~69 914bp)以正反两个方向分别插入到p95基因敲除的AcMNPV基因组中多角体位点的polyA之后,构建了两株重组病毒vP95K/EGFP/339+和vP95K/EGFP/339-.该两株病毒能在Sf9细胞中正常复制,复制水平与p95基因正常的AcEGFP相当,但复制速度较慢.重组病毒感染细胞的Western blot分析未检测到P95蛋白的表达.这一结果表明P95蛋白的缺失对病毒在细胞中的复制没有显著影响,但核心片段Core339对于病毒复制具有关键作用.
[Abstract]:The p95 protein encoded by the nuclear polyhedrosis virus (AcMNPV) is a part of the nucleocapsid and the PIF (Peros Infectivity Factor) complex of the baculovirus. Previous studies have shown that the complete P95 protein is not necessary for the replication of the virus, and one of the 450bp sequences can partly compensate for the role of the p95 gene. In this study, a 339bp fragment of p95 gene (Core339AcMNPV genomic position: 69 57669 914bp) was inserted into the polyhedron polyA of the p95 knockout AcMNPV genome in both positive and negative directions. Two recombinant viruses, vP95K / EGFP / 339 and vP95K / EGFP / 339-respectively, were constructed. The two viruses can replicate normally in Sf9 cells, and the replication level is similar to that of AcEGFP with normal p95 gene, but the rate of replication is slow. The expression of P95 protein was not detected by Western blot analysis. The results showed that the deletion of P95 protein had no significant effect on virus replication in cells, but the core fragment Core339 played a key role in virus replication.
【作者单位】: 复旦大学生命科学学院微生物学与微生物工程系;
【基金】:国家自然科学基金(31370183)
【分类号】:Q939.4

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本文编号:2095029

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